清遠麻雞快慢羽品系產蛋性能比較分析

劉聰 李華 張正芬 華國洪 羅杰靈 于輝

摘要：【目的】明確清遠麻雞快慢羽系產蛋性能差異，并分析清遠麻雞慢羽系中Z染色體上K基因座禽內源性白血病毒21基因（ev21）對產蛋性能的影響，為下一步培育無ev21基因清遠麻雞品系及開展抗性研究提供參考依據。【方法】運用不同產蛋模型擬合不同羽速清遠麻雞的產蛋曲線，尋找最佳模型并分析產蛋過程中存在的問題;采用PCR-RFLP檢測清遠麻雞慢羽系中ev21基因的插入情況。【結果】清遠麻雞慢羽系的開產日齡極顯著遲于快羽系（P<0.01，下同），但開產體重和開產蛋重、40周齡蛋重及64周齡產蛋量均極顯著高于快羽系，清遠麻雞慢羽系的40周齡體重極顯著低于快羽系。利用伍德模型、楊寧模型和分室模型分別對清遠麻雞快慢羽系的產蛋率進行擬合，發現慢羽系和快羽系均以楊寧模型擬合的效果最佳，對應的擬合度（R2）分別為0.966和0.974。在清遠麻雞慢羽系中，L1亞群（含ev21基因）和L2亞群（不含ev21基因）間的產蛋性能差異均不顯著（P>0.05），即ev21基因存在與否對產蛋性能無明顯影響。【結論】清遠麻雞慢羽系產蛋性能優于快羽系，具體表現為產蛋率高，蛋重，且產蛋量多;ev21基因存在與否對清遠麻雞慢羽系產蛋性能無直接影響。清遠麻雞慢羽系產蛋性能尚有提升空間，因此生產上需加強其產蛋期的飼養管理。

關鍵詞： 清遠麻雞;快羽系;慢羽系;ev21基因;產蛋性能

0 引言

【研究意義】清遠麻雞屬于地方小型優質肉雞，因其脂肪沉積適中、肉質嫩滑鮮香、風味獨特而享譽國內外，目前有關清遠麻雞生長性能、肉質風味已有研究報道（何蘭花等，2016;區炳慶等，2016），但針對其產蛋性能的報道較少，尤其基于清遠麻雞核心群不同羽速間產蛋性能差異的研究尚無報道。羽速屬于伴性遺傳性狀，快羽和慢羽由位于Z染色體上的一對基因控制，其中快羽為隱性、慢羽為顯性（宋素芳等，2003）。羽速基因對生產性能的影響在不同條件、不同品種、甚至同一品種不同品系間存在明顯差異。因此，比較分析清遠麻雞快慢羽品系間的產蛋性能，找出其潛在的遺傳差異，對制定合理的選育方法和飼養方案具有重要意義。【前人研究進展】至今，有關羽速對雞群產蛋性能的影響已有大量報道，但研究結論不一，主要與其品種、飼養條件及研究群體大小有關。在地方肉雞品種中，文昌雞黃麻慢羽系的開產日齡和300日齡產蛋數均優于快羽系（李亨，2011）;崇仁麻雞和日本古屋雞則表現為快羽系的雞蛋品質較優，且開產日齡早于慢羽系（周希平等，2001;Nakamura et al.，2003）;而北京油雞快慢羽系的總產蛋數及平均蛋重無明顯差異（初芹等，2011）、安義瓦灰雞和壩上長尾雞不同羽速品系間的開產性狀、300日齡產蛋量和蛋重等產蛋性能也無明顯差異（Iraqi and Smith，1994;趙書雨，2015）。可見，羽速對雞產蛋性能的影響取決于品種差異、飼養環境及研究群體大小等條件，即有必要針對不同地方品種開展不同羽速間產蛋性能的相關研究。禽白血病病毒（Avian leukosis virus，ALV）是引起禽類各種造血細胞腫瘤性增生的一類逆轉錄酶病毒，可分為6種亞型（A、B、C、D、E和J），其中E型白血病病毒（ALV-E）為內源性病毒，遵循孟德爾遺傳規律隨雞基因組復制而復制。ALV-E的表達不僅影響外源病毒的感染和疾病發生，還對家禽的重要經濟性狀（產蛋量、蛋重和蛋比重等）產生較大影響（王麒等，2017）。ev21是ALV-E的一種，不少學者認為在慢羽雞群體中插入ev21基因序列后會抑制其免疫力，且多個生產性狀受到影響，尤其是雞群對ALV的易感性增強（Fadly and Smith，1997）。一般情況下，ev21基因和慢羽基因K在基因組上緊密連鎖（Elferink et al.，2008;Takenouchi et al.，2017），但也有研究表明慢羽系中存在ev21缺失體，可用于培育抗病品系（李競一等，2011）。【本研究切入點】清遠麻雞經過多個世代選育，其產蛋性能顯著提高（李國南，2006），但至今鮮見運用不同產蛋模型對其不同羽速間的產蛋性能差異進行研究，也尚未明確健康群體中慢羽系ev21-K基因組的插入是否影響其產蛋性能。【擬解決的關鍵問題】運用不同產蛋模型擬合不同羽速清遠麻雞的產蛋曲線，尋找最佳模型并分析產蛋過程中存在的問題;探明清遠麻雞慢羽系中ev21基因對產蛋性能的影響，為下一步培育無ev21基因清遠麻雞品系及開展抗性研究提供參考依據。

1 材料與方法

1. 1 試驗材料

清遠麻雞由廣東天農食品有限公司原種場提供，選取同一世代、相同批次的清遠麻雞快慢羽純系，其中，慢羽母雞684羽，快羽母雞925羽。于40周齡時在慢羽系群體中隨機選取250羽，翼下靜脈采血，加入抗凝劑冷凍保存，用于開展慢羽系自然健康群體中Z染色體上是否存在ev21基因插入位點的分子分型檢測。

1. 2 飼養管理水平

清遠麻雞快慢羽系均在出雛時帶上翅號，0～6周齡在育雛舍飼養，7～17周齡在育成舍飼養，至18周齡后將雞群轉入產蛋舍，自由飲水，限料飼喂，產蛋期日糧組成及營養水平詳見表1，其余飼養管理按廣東天農食品有限公司原種場生產要求進行操作。

1. 3 指標測定及方法

1. 3. 1 產蛋性能指標 從清遠麻雞快慢羽系雞群中各隨機選取200羽，記錄開產時間、開產體重及開產蛋重（開產后連續稱3 d產蛋總重，共300枚，取平均值），以群體產蛋率達5%的日齡為開產日齡，周平均產蛋率首次超過5%的周齡為第一產蛋周。

1. 3. 2 分子檢測 采用小量全血基因組DNA快速提取試劑盒提取DNA，參照Iraqi和Smith（1994）設計的引物、反應體系和程序進行PCR擴增。酶切反應：取PCR擴增產物10.0 μL、限制性內切酶Hae Ⅲ 0.8 μL、10×Loading Buffer 1.2 μL，37 ℃過夜消化7～12 h。酶切產物以1.5%瓊脂糖凝膠電泳進行檢測。

1. 4 統計分析

使用Excel 2007和SPSS 20.0進行數據統計和分析，各處理間采用Duncan’s新復極差法進行多重比較。采用非線性回歸過程（NLIN）進行曲線參數計算，以擬合度（R2）評定數學模型擬合的效果，產蛋模型分別為：

2 結果與分析

2. 1 清遠麻雞快慢羽系開產性狀的比較

由表2可看出，清遠麻雞慢羽系的開產日齡極顯著遲于快羽系（P<0.01，下同），而開產體重和開產蛋重極顯著高于快羽系。

2. 2 清遠麻雞快慢羽系產蛋后期產蛋性能的比較

由表3可看出，清遠麻雞慢羽系的40周齡體重極顯著低于快羽系，而40周齡平均蛋重極顯著高于快羽系，64周齡產蛋量也極顯著高于快羽系。

2. 3 清遠麻雞快慢羽系產蛋率及產蛋曲線模型的比較

由表4可知，清遠麻雞慢羽系在開產后前7周其產蛋率呈上升趨勢，于27周齡時達峰值（83.91%）;清遠麻雞快羽系在開產后前9周其產蛋率呈上升趨勢，于29周齡時達峰值（79.73%）。將80%定為產蛋高峰期，得知清遠麻雞慢羽系在27～29周齡處于產蛋高峰期，而清遠麻雞快羽系最高產蛋率為29周齡的79.73%，隨后兩個品系的產蛋率整體上呈逐漸降低趨勢。

利用伍德模型、楊寧模型和分室模型分別對清遠麻雞快慢羽系的產蛋率進行擬合，擬合參數詳見表5。擬合度（R2）以楊寧模型最高，清遠麻雞快慢羽系分別為0.974和0.966;模型估計值與實測值進行比較也發現楊寧模型的擬合數據最接近實際（圖1和圖2）。分室模型擬合的清遠麻雞產蛋率在20周齡為負值，伍德模型擬合的清遠麻雞最高產蛋率比實際時間推遲7～8周。因此，實際生產中建議采用楊寧模型擬合清遠麻雞的產蛋率。

2. 4 ev21基因對清遠麻雞快慢羽系產蛋性能的影響

對250羽清遠麻雞慢羽系個體進行ev21基因檢測，PCR-RFLP電泳結果（圖3）顯示：含ev21基因的個體擴增出1條條帶（1450 bp），而不含ev21基因的個體均擴增出2條條帶（382和1068 bp）。由表6可知，L1亞群（含ev21基因）和L2亞群（不含ev21基因）間的產蛋性能差異均不顯著（P>0.05）。

3 討論

本研究結果表明，清遠麻雞慢羽系的開產日齡遲于快羽系，與寧中華等（2005）對白殼蛋雞的研究結果相同，但與李亨（2011）、趙書雨（2015）的研究結果存在明顯差異。在我國南方的優質雞品種（吳旭，2006;陶林等，2014）中，其開產日齡早晚排序為：文昌雞（126 d）<清遠麻雞快羽系（135 d）<清遠麻雞慢羽系（139 d）<信宜懷鄉雞A系（142 d）<快羽杏花雞（146 d）<惠陽胡須雞（150 d），即清遠麻雞在開產日齡上表現出一定的優勢。清遠麻雞慢羽系的開產體重和開產蛋重均比快羽系重，與孫漢等（2004）對萬載康樂黃雞的研究結果相近。值得注意的是：清遠麻雞慢羽系的開產體重比快羽系重144.40 g/羽，但至40周齡時其體重比快羽系輕75.20 g/羽，而蛋重表現為清遠麻雞慢羽系高于快羽系，故導致蛋重與體重呈正相關的經典結論不一致。究其原因可能是清遠麻雞慢羽系在40周齡時采集血樣開展ev21基因檢測而導致雞群應激，造成其體重明顯低于快羽系清遠麻雞。

產蛋率及產蛋率曲線不僅顯示出產蛋量的高低，還能反映育雛期和育成期的飼養管理水平，同時根據產蛋曲線可指導飼養過程中飼料的加減，使種雞在標準體重下更好地發揮其產蛋性能（董晶等，2017;何蘭花等，2017;李巖等，2018）。清遠麻雞慢羽系在經過多年的選育后，其產蛋性能已得到較大程度的提高，但產蛋高峰持續時間較短。清遠麻雞慢羽系從開產到產蛋高峰期（產蛋率≥80%）需要50 d，而產蛋高峰僅持續3周，產蛋率最高達83.91%;清遠麻雞快羽系從開產到產蛋高峰需68 d，最高產蛋率僅79.73%。因此，今后需繼續加強對清遠麻雞快羽系采食量進行分析，通過優化飼養管理而提高早期產蛋能力。本研究還發現，清遠麻雞快慢羽系產蛋率維持在60%以上的時間分別為17和13周，維持50%以上產蛋率的時間分別為24和23周。同為地方優質雞，文昌雞開產日齡為18周，產蛋率高峰期為22周齡，最高產蛋率為81.6%，產蛋率在60%以上的時間可持續15～18周（吳旭，2006）;信宜懷鄉雞產蛋率最高為70.5%，產蛋率維持在60%以上有14周，維持在50%以上則長達24周（陶林等，2014）。由此可知，清遠麻雞慢羽系產蛋率>文昌雞產蛋率>清遠麻雞快羽系產蛋率>信宜懷鄉雞產蛋率。本研究通過楊寧模型對清遠麻雞的產蛋率進行曲線擬合，發現清遠麻雞慢羽系實際產蛋率除了在24周齡較擬合產蛋率低外，其余周齡均高于擬合值;而清遠麻雞快羽品系實際產蛋率除了在22～23周齡比擬合值高外，其余周齡均低于擬合值。在實際生產中，清遠麻雞快羽系常作為側重生長性能父系選育，其產蛋性能不如側重繁殖性能選育的慢羽系，因此需進一步加強對清遠麻雞慢羽系產蛋高峰持續期的選擇，充分發揮其產蛋潛力。

ALV感染雞群后通常會導致機體生產性能急劇下降、性成熟推遲，且產蛋性能受到影響。一般認為，ev21基因的存在會提高機體對外源ALV的易感性，從而干擾免疫應答系統（譚艷，2016）。Gavora等（1995）研究發現，ev21基因的插入導致攻毒后雞群產蛋性能下降;Feng等（2016）針對慢羽系中ev21基因與ALV-J及誘導宿主干擾素刺激基因的表達進行深入研究;Fang等（2018）研究表明，ev21基因不是決定慢羽表型的唯一因素，快羽座位k的天然突變也有可能產生慢羽座位K（Zhang et al.，2018）。因此，探明無ev21基因序列插入的慢羽系個體對組建抗性品系具有重要意義。此外，李競一等（2011）、李培周等（2013）先后在慢羽系雞群中找到ev21缺失個體，但尚未分析其對生產性能造成的影響。本研究結果表明，ev21基因的存在與否對健康雞群產蛋性能無直接影響，該結論將為后期開展攻毒試驗打下基礎。

4 結論

清遠麻雞慢羽系產蛋性能優于快羽系，具體表現為產蛋率高，蛋重，且產蛋量多;ev21基因的存在與否對清遠麻雞慢羽系產蛋性能無直接影響。清遠麻雞慢羽系產蛋性能尚有提升空間，生產上需加強其產蛋期的飼養管理。

參考文獻：

初芹，張劍，王海宏，耿愛蓮，陶士軍，劉華貴. 2011. 北京油雞早期蛋重及其與體重相關性研究[C]//畜牧獸醫學會家禽學分會. 安全優質的家禽生產. 廣州：第十五次全國家禽學術討論會. [Chu Q，Zhang J，Wang H H，Geng A L，Tao S J，Liu H G. 2011. Study on the correlation between early egg weight and body weight of Beijing fatty chicken[C]//Poultry Credit Association of Society of Zootechnics and Veterinary Science. Safety and quality poultry production. Guangzhou：The Fifteenth National poultry Symposium.]

董晶，杜炳旺，劉宜林，李艷青，陳運冬. 2017. 信宜懷鄉雞C品系第3世代產蛋率和累計產蛋數曲線擬合分析[J]. 南方農業學報，48（1）：158-162. [Dong J，Du B W，Liu Y L，Li Y Q，Chen Y D. 2017. Curve fitting analysis for laying rate and total egg number of the third generation of Xinyi Huaixiang chicken C strain[J]. Journal of Southern Agriculture，48（1）：158-162.]

何蘭花，鄧炳真，黎家杰，溫麗華，林樹茂. 2017. 南海黃雞產蛋曲線數學模型研究[J]. 黑龍江畜牧獸醫，（8）：78-80. [He L H，Deng B Z，Li J J，Wen L H，Lin S M. 2017. Study on mathematical model of laying curve of Nanhai yellow chicken[J]. Heilongjiang Animal Science and Vete-rinary Medicine，（8）：78-80.]

何蘭花，李華，鄺智祥，陳潔忠. 2016. 雜合清遠麻雞生長性能分析[J]. 江蘇農業科學，44（2）：252-254. [He L H，Li H，Kuang Z X，Chen J Z. 2016. Analysis on the growth performance of mixed Qingyuan Patridge chicken[J]. Jiangsu Agricultural Sciences，44（2）：252-254.]

李國南. 2006. 清遠麻雞的品種選育現狀及產業化發展趨勢[J]. 中國家禽，28（21）：38-39. [Li G N. 2006. Breeding status of Qingyuan Patridge chicken and industrialization development trend[J]. China Poultry， 28（21）：38-39.]

李亨. 2011. 家禽繁殖性狀相關基因的遺傳效應及組織表達規律研究[D]. 揚州：揚州大學. [Li H. 2011. Studies on expression characteristics genetic effects of poultry reproductive genes[D]. Yangzhou：Yangzhou University.]

李競一，李榮妮，王曉亮，王翔宇，楊永林，鮑海港，趙春江，凌遙. 2011. 慢羽雞ev21結合位點缺失個體的檢測[J]. 中國畜牧雜志，47（11）：6-8. [Li J Y，Li R N，Wang X L，Wang X Y，Yang Y L，Bao H G，Zhao C J，Ling Y. 2011. Detection of ev21 binding sites in late-feathering chickens[J]. Chinese Journal of Animal Science，47（11）：6-8.]

李培周，李華，杜炳旺，陳潔波，陶林，陳琦，林麗超. 2013. 貴妃雞羽速基因分子檢測及相關早熟性狀分析[J]. 中國家禽，35（21）：5-8. [Li P Z，Li H，Du B W，Chen J B，Tao L，Chen Q，Lin L C. 2013. Molecular detection of feathering locus and prematurily traits of Princess chicken[J]. Chinese Poultry，35（21）：5-8.]

李巖，詹凱，李俊營，劉偉，馬瑞鈺，崔海軍，張新，柳哲杰. 2018. 本交籠養種雞產蛋曲線模型研究[J]. 中國家禽，40（9）：48-51. [Li Y，Zhan K，Li J Y，Liu W，Ma R Y，Cui H J，Zhang X，Liu Z J. 2018. Mathematical model analyses of laying curves for layer breeders in natural mating cages[J]. China Poultry，40（9）：48-51.]

寧中華，王忠，彭丹芳，侯卓成，徐桂云. 2005. 禽白血病和羽速基因對白殼蛋雞生產性能的影響[J]. 中國畜牧雜志，41（10）：23-25. [Ning Z H，Wang Z，Peng D F，Hou Z C，Xu G Y. 2005. The influence of avian leukosis and fea-ther speed genes on production performance of white layer chickens[J]. Chinese Journal of Animal Science，41（10）：23-25.]

區炳慶，趙海全，張正芬，黃得純，華國洪，于輝，李華. 2016. 清遠麻雞白羽系屠宰性能及肉質研究[J]. 廣東農業科學，43（6）：169-172. [Ou B Q，Zhao H Q，Zhang Z F，Huang D C，Hua G H，Yu H，Li H. 2016. Studies on slaughter performance and meat quality of white feather strains on Qingyuan Patridge chicken[J]. Guangdong Agricultural Science，43（6）：169-172.]

宋素芳，康相濤，孫桂榮，王彥斌，李國喜，李明. 2003. 羽速基因對固始雞主要生產性能的影響[J]. 中國農學通報，19（4）：11-13. [Song S F，Kang X T，Sun G R，Wang Y B，Li G X，Li M. 2003. Effect of feathering growth gene on the main productive traits of Gushi chicken[J]. Chinese Agricultural Science Bulletin，19（4）：11-13.]

孫漢，歐陽建華，潘珂，李海華，趙虹. 2004. 從萬載康樂黃雞的產蛋規律探討地方雞種產蛋性能的選擇[J]. 中國畜牧雜志，40（8）：47-49. [Sun H，Ouyang J H，Pan K，Li H H，Zhao H. 2004. Selection of laying performance of local chicken breeds from laying rules of Wanzai Kangle yellow chicken[J]. Chinese Journal of Animal Science，40（8）：53-55.]

譚艷. 2016. 快慢羽雞抗ALV-J天然免疫差異的研究[D]. 廣州：華南農業大學. [Tan Y. 2016. The differential innate immune response to ALV-J infection between the in late feathering chicken and the early feathering chicken[D]. Guangzhou：South China Agricultural University.]

陶林，杜炳旺，陳建，劉宜林，陳運東，葉偉慶，李東華. 2014. 信宜懷鄉雞不同品系產蛋性能比較分析[C]//中國畜牧業協會. 第四屆（2014）中國黃羽肉雞行業發展大會會刊. 寧波：《中國家禽》編輯部. [Tao L，Du B W，Chen J，Liu Y L，Chen Y D，Ye W Q，Li D H. 2014. Comparison of laying performance in different strains of Xinyi Huai-xiang chicken[C]//China Animal Husbandry Association. The Fourth（2014） China Yellow Broiler Industry Develop-ment Conference. Ningbo： Editorial Department of China Poultry.]

王麒，王晗，張秀玲，劉春楊，張樂超，李蘭會，李祥龍. 2017. 雞內源白血病病毒ev21與慢羽非連鎖分析和LTR區啟動子活性分析[J]. 畜牧獸醫學報，48（5）：930-937. [Wang Q，Wang H，Zhang X L，Liu C Y，Zhang L C，Li L H，Li X L. 2017. Analysis of non-linkage between endogenous ALV-ev21 and late feathering of chickens and its promo-ter activity of LTR[J]. Chinese Journal of Animal and Ve-terinary Sciences，48（5）：930-937.]

吳旭. 2006. 文昌雞產蛋性能及蛋品質性狀分子標記的研究[D]. 揚州：揚州大學. [Wu X. 2006. Study on the mole-cular markers of egg-laying and egg quality traits in Wenchang chicken[D]. Yangzhou：Yangzhou University.]

趙書雨. 2015. 壩上長尾雞不同羽速、羽色群體生長發育的比較[D]. 秦皇島：河北科技師范學院. [Zhao S Y. 2015. Comparism of grouth and development in Bashang long-tail chicken different feathering and the feather color group[D]. Qinhuangdao：Hebei Normal University of Science & Technology.]

周希平，謝金防，劉林秀，謝明貴. 2001. 羽速基因對崇仁麻雞蛋質性狀的影響[J]. 江西畜牧獸醫雜志，（3）：9. [Zhou X P，Xie J F，Liu L X，Xie M G. 2001. Effect of feather speed gene on egg quality traits of Chongren Ma chicken[J]. Jiangxi Journal of Animal Husbandry & Veterinary Medicine，（3）：9.]

Elferink M G，Vallée A A A，Jungerius A P，Crooijmans R P M A，Groenen M A M. 2008. Partial duplication of the PRLR and SPEF2 genes at the late feathering locus in chicken[J]. BMC Genomics，9：391-398.

Fadly A M，Smith E J. 1997. Role of contact and genetic transmission of endogenous virus-21 in the susceptibility of chickens to avian leukosis virus infection and tumors[J]. Poultry Science，76（7）：968-973.

Fang G J，Jia X Z，Li H，Tan S W，Nie Q H，Yu H，Yang Y. 2018. Characterization of microRNA and mRNA expression profiles in skin tissue between early-feathering and late-feathering chickens[J]. BMC Genomics，19（1）：399. doi： 10.1186/s12864-018-4773-z.

Feng M，Tan Y，Dai M M，Li Y F，Xie T T，Li H M，Shi M Q，Zhang X Q. 2016. Endogenous retrovirus ev21 dose not recombine with ALV-J and induces the expression of ISGs in the host[J]. Frontiers in Cellular and Infection Microbiology，6：140. doi： 10.3389/fcimb.2016.00140.

Gavora J S，Benkel B，Spencer J L，Gagnon C，Crittenden L B. 1995. Influence of the alv6 recombinant avian leukosis virus transgene on production traits and infection with avian tumor viruses in chickens[J]. Poultry Science，74（5）：852-863.

Iraqi F，Smith E J. 1994. Determination of the zygosity of ev21-K in late-feathering male White Leghorns using the polymerase chain reaction[J]. Poultry Science，73（7）：939-946.

Nakamura A，Noda K，Miyakawa H，Mizuno K. 2003. Associa-tion of feathering gene and economic traits in Nagoya breed[J]. Research Bulletin of the Aichiken Agricultural Research Center，（35）：179-182.

Takenouchi A，Toshishige M，Ito N，Tsudzuki M. 2017. Endogenous viral gene ev21 is not responsible for the expression of late feathering in chickens[J]. Poultry Science，97（2）：403-411.

Zhang X L，Wang H，Zhang L C，Wang Q，Du X L，Ge L H，Zhou R Y，Li LH，Li X L. 2018. Analysis of a genetic factors contributing to feathering phenotype in chickens[J]. Poultry Science，97（10）：3405-3413.

（責任編輯 蘭宗寶）