口蹄疫懸浮滅活疫苗質量控制的意義及方案

摘要：該文主要結合實際工作經驗，分析了口蹄疫懸浮滅活疫苗質量控制的意義以及質量控制方案。

關鍵詞：口蹄疫;疫苗質量;方案

中圖分類號：S851.3

文獻標識碼：B

doi：10.3969/j.issn.2096-3637.2019.05.049

0引言

目前在口蹄疫懸浮劑滅活疫苗生產中主要利用BKH2，傳代細胞培養復制病毒，然后將得到的培養物直接滅活后制成相關產品。在該生產流程中，BKH21傳代細胞制備的質量、病毒增殖復制的長度、培養物的濃度以及滅火及其產品的均質、乳化等過程是質量控制的難點和要點。而決定BKH21傳代細胞質量的2個關鍵因素是細胞的密度和活力。目前在大多數口蹄疫懸浮劑疫苗生產廠家內部使用的配方相對比較完善，培養基并不是主要影響因素，因此在疫苗質量控制中關鍵是原材料。

1意義

1.1國家強制要求

口蹄疫病毒是危害偶蹄類動物的一種重特大傳染性疾病，該種疾病的傳播流行會給養殖戶造成不可挽回的經濟損失。進入2l世紀，隨著國家對口蹄疫防控重視程度和疫苗生產時間的延長，口蹄疫疫苗的監管制度逐漸完善，相關管理體系已基本形成。國家連續出臺了《新獸藥研制管理辦法》、《獸藥注冊辦法》等一系列獸藥管理辦法，在獸藥研制注冊生產、質量管理、流通環節、管理監督管理環節都有相關法律法規依據，切實提高了疫苗研制和生產的質量，保證生產環節安全可靠。確保疫苗質量，農業部還采取了駐廠監督、飛行檢查、批簽發等多種日常監督管理模式[1]。

1.2企業自身需要

疫苗作為一種特殊的商品，企業生產質量是衡量企業競爭能力的主要方向，它是企業一切工作的基礎，更是鞏固和擴大市場份額的前提，關系到企業未來的生存和發展。企業在追求經濟效益最大化的同時，企業也需要承擔相應的社會責任，通過勇于承擔社會責任，塑造企業形象，打造企業品牌價值，進而獲得長遠經濟效益。因此要求口蹄疫懸浮劑滅活疫苗生產企業要嚴格質量控制，構建完善的質量控制方案，強化疫苗生產研發各個環節的控制管理，保證生產出來的疫苗符合相關要求，質量過硬。

1.3生物品特殊要求

由于口蹄疫疫苗本身的生物特性以及安全防護方面存在諸多漏洞，在生物安全方面，如果不能嚴格做好質量控制工作，很容易對周圍人類、生態環境造成嚴重危害。由于口蹄疫屬于國家一類重特大疫病，病毒培養、病毒滅活、疫苗制備等各個環節都存在生物安全方面的風險因素。口蹄疫的生物安全問題直接影響人類的生命健康，做好質量防控能有效降低病毒的傳播可能，它不僅是提高和保障動物健康的基礎，更是提高和保障人類生命健康，促進社會穩定發展的前提[2]。

2控制方案

2.1原材料質量控制

由于口蹄疫懸浮滅活疫苗在制備過程中常需要很多生物原料，如血清、動物性水解乳蛋白等，所以在整個生產中必須對這些原材料進行嚴格的質量控制，要求原材料供貨商提供外源病毒檢測報告，要在檢測報告中明確原材料中是否含有牛海綿狀腦病病毒。在免疫接種口蹄疫懸浮滅活疫苗后產生的一系列不良反應中，有相當一部分是由于在疫苗生產中輔料質量不過關所致。因此需要根據相應的疫苗生產流程和生產工藝，加強對輔料質量的檢測，嚴格控制輔料中的微生物限度，進行嚴格的熱源檢查、細菌內毒素檢查，確保各個輔料使用的安全性和合理性。在疫苗生產制備過程中，不應將輔料看作成沒有活性的生產材料。只有確保各個輔料的理化性質穩定安全可靠，才能確保疫苗進入動物機體后不會發生嚴重的副作用和副反應，疫苗安全性和有效性較高。

2.2病毒培養過程中質量控制

相對于傳統的病毒培養模式，口蹄疫懸浮滅活疫苗在制備中對培養工藝進行了有效革新和發展，因此在病毒培養中需要轉變理念，強化對病毒培養過程中各個環節的質量控制。病毒分離培養中應優選培養基。在全新生產工藝上，細胞培養逐漸由貼壁生長轉變為懸浮生產，需要對培養基的類型進行進一步優化，滿足整個病毒培養的生產需求，并不斷對原有的細胞進行純化馴化培養后，逐步實現病毒細胞的繁殖增長。另外，應進一步優化懸浮液質量。在病毒培養中應嚴格控制好懸浮液培養的轉速、溫度、溶解氧濃度、pH值、接種密度、細胞活力等指標，通過對細胞增殖時間、細胞增殖數量，來評估整個細胞培養的質量。還應對整個病毒繁殖培養的反應器進行優化。目前反應器能實時監測和控制的項目，主要包括反應溫度、攪拌速度、溶解氧濃度、pH值，而對于病毒分離培養過程中的在線滅菌系統自動滅菌與定位清洗的全自動化生物反應器、生物反應器、自動取樣和分析系統還有待進一步優化。在病毒分離培養過程中，氧氣供給方式、攪拌速度、攪拌方式、熱傳遞等指標也需要進一步探索研究[3]。 2.3病毒純化工藝質量控制

制備的口蹄疫懸浮滅活疫苗進入動物機體后，要產生很好的免疫應答反應，需確保疫苗中有較高含量的抗原。而如果滅活疫苗中含有大量非病毒蛋白，在疫苗免疫接種后很容易引起副反應。另外，病毒增殖中產生的病毒非結構性蛋白對于感染動物的甄別困難較大。因此在進行口蹄疫疫苗免疫接種中，尤其是在多家疫苗免疫接種過程中，為確保動物產生很好的免疫抗體，同時降低疫苗使用過程中產生的副反應，減少疫苗使用量，方便病毒抗原的儲存，便于對免疫和感染情況進行有效鑒別，應進行病毒純化培養。目前在大型疫苗生產企業內所使用的濃縮純化技術主要包括超濾和沉淀2種方法。在疫苗純化培養中通過利用聚乙二醇或者聚環氧乙烷既能實現對病毒濃度的有效濃縮和純化培養，而且還能極大降低抗原收獲物中非病毒蛋白的含量和成分。

2.4生產過程中質量監督

疫苗質量控制貫穿于疫苗生產的全過程，這才能得到符合相關質量標準的滅活疫苗產品。口蹄疫疫苗從原料的進廠到生產后檢驗合格涉及到諸多環節和許多程序，每個環節都應嚴格把控質量，不能忽視任何一個環節，否則很容易導致產品質量不合格。因此，口蹄疫疫苗生產企業應結合自身產品的實際特點，選擇合理的生產工藝和生產技術，對生產全過程進行有效的質量監督管理，控制疫苗質量。

3結束語

疫苗生產廠家不僅需要對疫苗的理化性質、無菌性、安全性、免疫效果等多方面進行嚴格檢查，而且官方獸醫還應不定期隨機抽檢廠家的口蹄疫疫苗，重點對成品的疫苗進行無菌檢查、安全性檢查和免疫效力檢查，評價疫苗質量，確保疫苗生產企業能生產出質量過硬的疫苗產品。

參考文獻

[1]何隨彬，金盈宇，龔志亮，等.口蹄疫疫曲最新研究進展[J].上海畜牧獸醫通訊，2019（2）：30-32，35.

[2]陳建文.牛A型口蹄疫病毒多表位疫曲的研究[D].蘭州：甘肅農業大學，2013.

[3]張中旺，張永光.口蹄疫表位疫曲的研究進展[J].中國人獸共患病學報，2008（6）：570-573。591.

作者簡介：王發信（1977-），男，甘肅定西人，漢族，本科，主要從事疫曲生產工作。