飼料中總磷測定注意事項

馬林杰

摘要：對飼料中總磷測定的關鍵點，炭化-灰化處理、定容、分光光度操作等過程進行了論述，提高檢測準確度。

關鍵詞：炭化-灰化 分光光度 準確度

Points for Attention in the Determination of Phosphorus in Feed

Ma Linjie

（Hulunbuir Quality Measurement and Inspection Institute）

Abstract： In this paper， the key points of determination of total phosphorus in feed， carbo nization-ashing treatment， constant volume， spectrophotometric operation and other processes are discussed to improve the detection accuracy.

Key words： carbonization-ashing， spectrophotometry， accuracy

磷是動物體內含量最多的礦物元素之一，和鈣一起構成骨組織和牙齒，其余大部分構成軟組織成分，小部分存在于體液中，參與許多物質代謝過程，是細胞膜和血液中緩沖物質及RNA、DNA、輔酶的成分。

磷缺乏和過多均有危害。磷不足時會引起幼齡動物患佝僂癥，成年動物患軟骨癥，表現為食欲不良，增重減緩，全身虛弱。磷過多時，易引起甲狀旁腺機能亢進，造成骨組織營養不良，產生跛行和長骨骨折。

30%～70%的磷是以植酸鹽的形式存在。動物性飼料中以魚粉的含磷量最高，礦物性飼料中磷的利用效率也很高。補充磷的礦物質飼料有骨粉、磷酸氫鈣、磷酸二氫鈣等。

磷測定過程容易出現檢測超出重復性和再現性要求，筆者通過嚴格控制每一操作細節，可以達到非常高的檢測精確度、準確度。

1 實驗儀器、材料

1.1 實驗儀器

AL204電子天平[梅特勒-托力多（上海）有限公司];SX-12-10高溫電阻爐（天津泰斯特儀器有限公司）;DB-3D電熱板（天津泰斯特儀器有限公司）; 101-ZN數顯敼風干燥箱（華北儀器有限公司）;T6新世紀紫外分光光度計（北京普析儀器有限公司）。

1.2 試驗材料

飼料樣品;硝酸;鹽酸（1+1）;釩鉬酸銨顯色劑;磷標準溶液（50 μg/mL）

本試驗中所有試劑均為分析純AR及其以上試劑? 實驗用水的pH值范圍和電導率應符合GB/T 6682—2008《分析實驗室用水規格和實驗方法》中三級水標準要求，試驗所用溶液在未注明何種溶液時，均指水溶液。

2 試驗方法

2.1 檢測方法

GB/T 6437—2018《飼料中總磷的測定 分光光度法》中7.1.1干灰化法。

2.2 試驗原理

試樣中總磷經消解，在酸性條件下與釩鉬酸銨生成黃色的釩鉬黃[（NH4）3PO4NH4VO3·16MoO3]絡合物，釩鉬黃的吸光度值與總磷的濃度成正比，在波長400nm下測定試樣溶液中釩鉬黃的吸光度值與標準系列比較定量。

2.3 注意事項

（1）干灰化法：試樣的稱樣量2.5 g左右，精確至0.0002 g，于電爐上（坩堝蓋與坩堝間留有小縫隙，不要拿下蓋）炭化，直至呈灰黑色，不冒煙。將坩堝及蓋移入電阻爐中，最好是冷爐升溫至550 ℃計時，一般灰化3 h，對于部分含礦物質較多，難灰化的樣品要適當延長灰化時間，燒至呈灰黑色，無炭黑粒既可，一定要燒透燒完全，否則磷元素不能全部分解出來，造成檢測結果偏低。

（2）灰化后的樣品，加入濃硝酸和鹽酸于電熱板或電爐上，使用電爐時，用可調溫電爐，或在其上放一塊耐火板加熱使其溫度均勻平和，待液體加熱微沸時，停止加熱，利用余熱慢慢加熱，且不可大火，造成試液揮發損失過多而影響檢測結果，更不可以燒干。

（3）在消煮過程中坩堝蓋要凸面朝向坩堝（向下），這樣揮發的液體又回落至坩堝，減少揮發損失。

（4）在試樣測定過程中，移取液體量一定控制在磷含量50μg～750μg范圍內（一般樣液體積為1.0 mL～10.0 mL），可以根據明示的磷百分含量進行折算），過多或過少造成顯色示值偏離分光光度計量程示值中心位置，引入的誤差過大，影響檢測結果，總之，測定時樣液的吸光度示值盡量接近儀器量程中心位置。

（5）由于是顯色反應，顯色劑、樣液的移取一定要準確無誤，用精度較高的單標線吸管移取。

（6）要嚴格控制顯色溫度，溫度高，顯色時間可以短些，假如顯色時溫度為25 ℃，10 min就可以，若溫度為15 ℃，顯色時間要長些，因為溫度決定達到反應最大值的速度，反應達到最大值后，時間長短對吸光度影響不大，但也不宜過長，一般不超過半小時，否則會影響檢測結果。

（7）空白試驗參與總磷含量計算，對誤差的貢獻同樣大，因此空白要作平行試驗，取平均值。

（8）樣液的顯色范圍較大，為50μg～750μg，最好顯色示值位于光度量程的中位值附近更準確，對一些特定檢測，可先取一個中間體積，如5mL（一般樣液體積為1.0 mL～10.0 mL）樣液進行顯色，確定濃度大小，再取樣液進行測定。

3 結語

通過規范、控制炭化-灰化處理過程、定容、樣液量、分光光度操作過程，以期達到提高檢測準確度，滿足檢測重復性和再現性的要求。

參考文獻

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