基于“品種-質(zhì)量-藥效”相關(guān)性的中藥動(dòng)物藥品質(zhì)觀△

萬德光，楊文宇

1.成都中醫(yī)藥大學(xué) 藥學(xué)院，四川 成都 611137；2.西華大學(xué)，四川 成都 610039

中藥動(dòng)物藥療效顯著，自古稱“血肉有情之品”，多有“行走通竄之功”，通常具有起效較快的特點(diǎn)。我國藥用動(dòng)物種類繁多，歷代本草典籍所載動(dòng)物藥持續(xù)增加，如阜陽漢簡(jiǎn)《萬物》記載動(dòng)物藥26種，《五十二病方》記載動(dòng)物藥57種，《神農(nóng)本草經(jīng)》記載動(dòng)物藥67種，《本草綱目》記載動(dòng)物藥增至461種，《中華本草》達(dá)1000余種，這些豐富的品種為臨床用藥提供了多種選擇。由于動(dòng)物藥成分復(fù)雜，多數(shù)動(dòng)物藥的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)尚不明確，以致目前動(dòng)物藥的質(zhì)量控制水平總體上仍然較低，質(zhì)控指標(biāo)與藥效關(guān)聯(lián)性不強(qiáng)的問題尤其突出。從《中華人民共和國藥典》收載的動(dòng)物藥分析[1]不難發(fā)現(xiàn)，多數(shù)缺乏完整的鑒別、檢查、含量測(cè)定項(xiàng)目；除水蛭有凝血酶原活性測(cè)定外，大多檢測(cè)項(xiàng)目與藥效關(guān)聯(lián)性不確切。因此，動(dòng)物藥的現(xiàn)代研究亟待加強(qiáng)，尤其應(yīng)加強(qiáng)品質(zhì)評(píng)價(jià)、有效成分、藥理活性等方面的基礎(chǔ)研究[2]?？上驳氖?，近年來基于藥效的生物評(píng)價(jià)受到重視[3]，并取得一定進(jìn)展。然而，中藥獲得良好臨床療效的前提是藥材品質(zhì)良好，故應(yīng)以臨床療效為中心建立中藥品質(zhì)評(píng)價(jià)和品質(zhì)保證體系。遺傳因素(基原種質(zhì))、環(huán)境因素、人為因素(如采收加工、運(yùn)輸貯藏、人為調(diào)控、人為污染)[4]等都會(huì)影響中藥品質(zhì)并進(jìn)而影響臨床療效。其中，基原種質(zhì)是根本，環(huán)境條件和人工干預(yù)是影響藥材質(zhì)量的重要因素，藥效是質(zhì)量的體現(xiàn)。因此，從“品種-質(zhì)量-藥效”角度探討影響中藥動(dòng)物藥品質(zhì)的相關(guān)因素及其相互關(guān)系，將有利于提升保障中藥動(dòng)物藥療效的品質(zhì)評(píng)價(jià)和控制水平。

1 關(guān)于中藥“品種-質(zhì)量-藥效”的相關(guān)性

中藥的品種、質(zhì)量與藥效是中藥研究和應(yīng)用領(lǐng)域3個(gè)密切相關(guān)的層面[5]，其中品種是中藥的根，療效是中藥的魂。要提高中藥的療效，必須重視中藥材品種，優(yōu)良的品種是中藥質(zhì)量的保證，優(yōu)良的質(zhì)量是中藥臨床療效的保障。

中藥臨床藥效是其質(zhì)量的具體體現(xiàn)，而決定質(zhì)量的因素，在于其品種以及從品種到中藥材-中藥飲片-臨床使用產(chǎn)品整個(gè)過程的各種干預(yù)條件，包括種植(養(yǎng)殖)、環(huán)境、采收、加工、炮制、貯運(yùn)直至制劑用法等。種質(zhì)和干預(yù)條件決定了中藥材或中藥飲片的性狀特征與成分組成(含量)，而后者直接決定著中藥的安全性和有效性。種質(zhì)是中藥質(zhì)量的源頭，以上干預(yù)條件則是保障質(zhì)量的因素。因此，基于整體觀視角，中藥品質(zhì)的控制與保障，應(yīng)包括種質(zhì)控制、過程監(jiān)控、產(chǎn)品檢測(cè)3個(gè)層次；中藥品質(zhì)的控制與保障體系，可相應(yīng)地分解成種質(zhì)品質(zhì)(遺傳品質(zhì))、環(huán)境品質(zhì)、種植(養(yǎng)殖)品質(zhì)、加工品質(zhì)、儲(chǔ)運(yùn)品質(zhì)、形態(tài)品質(zhì)、化學(xué)品質(zhì)和效用品質(zhì)?；谥兴幤贩N-質(zhì)量-藥效的層次和關(guān)聯(lián)性，可從遺傳主導(dǎo)、環(huán)境飾變、多樣性維持、傳承延續(xù)、效用定質(zhì)、多元調(diào)控、物流保質(zhì)、辨?zhèn)味ㄏ?個(gè)要素進(jìn)行分析[6-7](見圖1)。1)遺傳主導(dǎo)：遺傳因素主導(dǎo)物種的形態(tài)學(xué)特征、生理功能與代謝物質(zhì)，親緣關(guān)系決定著中藥品質(zhì)的差異。2)環(huán)境飾變：氣候因素(如溫度、濕度、光照等)、地形條件(如緯度、海拔、地勢(shì)等)、土壤條件(如水、pH、各種元素等)、生物因子(如生存環(huán)境、物種種類、微生物等)可引起中藥品質(zhì)變化。3)多樣性維持：遺傳多樣性維持中藥品質(zhì)的穩(wěn)定，物種多樣性維系充足的藥用資源，生態(tài)多樣性孕育豐富的生存環(huán)境。4)傳承延續(xù)：藥用品種的繼承、創(chuàng)新和發(fā)展體現(xiàn)中藥遺傳品質(zhì)的傳承，道地產(chǎn)地、適宜產(chǎn)地體現(xiàn)環(huán)境品質(zhì)的傳承，文獻(xiàn)關(guān)于中藥性狀特征、采收加工和炮制的方法、臨床應(yīng)用的記敘，體現(xiàn)中藥形態(tài)品質(zhì)、加工品質(zhì)和效用品質(zhì)的傳承。5)效用定質(zhì)：中藥臨床療效是其品質(zhì)終極評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)，種質(zhì)資源、產(chǎn)地、加工和炮制方法等，均是效用優(yōu)選的結(jié)果。6)多元調(diào)控：通過控制種植(養(yǎng)殖)條件及采收、加工、炮制、用法等環(huán)節(jié)，人工干預(yù)中藥品質(zhì)。7)物流保質(zhì)：中藥貯運(yùn)過程中，采用適當(dāng)?shù)陌b運(yùn)輸措施、貯藏方法和貯藏時(shí)間才能保障中藥商品的品質(zhì)。8)辨?zhèn)味ㄏ颍翰捎脗鹘y(tǒng)和現(xiàn)代科技手段確定是否符合國家法定的品種和質(zhì)量要求，這是防止偽劣藥品進(jìn)入臨床以保證療效的重要環(huán)節(jié)。無論是植物藥或動(dòng)物藥都存在“品種-質(zhì)量-藥效”關(guān)聯(lián)問題，要保證中藥臨床療效的安全和有效性，必須認(rèn)真分析具體品種的上述環(huán)節(jié)，找出與中藥品質(zhì)相關(guān)的關(guān)鍵節(jié)點(diǎn)，并采用相應(yīng)的措施防控才能保證中藥品質(zhì)。

圖1 基于“品種-質(zhì)量-藥效”相關(guān)性的中藥品質(zhì)要素示意圖

2 基于“品種-質(zhì)量-藥效”的中藥動(dòng)物藥品質(zhì)觀

中藥“品種-質(zhì)量-藥效”的相關(guān)性，雖然針對(duì)中藥植物藥的論述較多，但同樣適用于中藥動(dòng)物藥。中藥臨床療效仍然是動(dòng)物藥品質(zhì)最終的評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)，動(dòng)物藥品質(zhì)受到種質(zhì)、產(chǎn)地、養(yǎng)殖、采收、加工、貯藏、炮制、制劑等環(huán)節(jié)影響，這些環(huán)節(jié)中關(guān)鍵節(jié)點(diǎn)的研究和分析，是實(shí)現(xiàn)生產(chǎn)監(jiān)控、保證藥材品質(zhì)的基礎(chǔ)。

2.1 從遺傳主導(dǎo)角度探析中藥動(dòng)物藥的品質(zhì)

動(dòng)物物種或品系不同，由于遺傳物質(zhì)(基因)的差異，在動(dòng)物的形態(tài)特征、結(jié)構(gòu)組成和體內(nèi)生理代謝等方面會(huì)表現(xiàn)出差異；若親緣關(guān)系相近，則其形態(tài)結(jié)構(gòu)和生理代謝具有一定的相似性。就動(dòng)物藥而言，特定基原的動(dòng)物藥材，具有特定的形態(tài)學(xué)特征和化學(xué)組分；源自近緣物種(種間差異)的動(dòng)物藥，或同種不同品系(種內(nèi)差異)的動(dòng)物藥，它們的藥材形態(tài)學(xué)特征和化學(xué)組分都會(huì)表現(xiàn)出一些共性和差異性。這些因素最終會(huì)表現(xiàn)為藥效(療效)的共同性和差異性。

2.1.1 遺傳主導(dǎo)著動(dòng)物藥材的形態(tài)學(xué)特征 例如中藥海馬源于Hippocampus屬多種動(dòng)物，它們的性狀特征和顯微特征既具有共性也具有個(gè)性(物種特性)。其共性眾所周知，無需贅述，此處著眼于差異性的比較。1)藥材性狀特征差異性[8-10]：線紋海馬(克氏海馬)體長(zhǎng)15～30 cm，具長(zhǎng)吻，頰棘向后突出，軀干部狹窄且光滑，體環(huán)增厚；大海馬(管海馬)體長(zhǎng)7～20 cm，頰棘不明顯，呈圓點(diǎn)狀，體平滑，無棘刺；刺海馬(棘海馬)體長(zhǎng)10～16 cm，冠上有4～5個(gè)明顯的棘刺，體環(huán)棘刺明顯；三斑海馬體長(zhǎng)7～18 cm，頰棘彎鉤狀，第1、4、7節(jié)的短棘基部各有1黑斑；小海馬(日本海馬)長(zhǎng)3～9 cm，第4、7體環(huán)交接處增大呈按鈕狀。2)藥材顯微特征差異性[11]：5種海馬的皮膚碎片、橫紋肌纖維及骨碎片的特征有較明顯的區(qū)別。

2.1.2 遺傳主導(dǎo)動(dòng)物生理代謝以及藥材化學(xué)組分和藥效 例如鹿茸的法定基原是梅花鹿和馬鹿兩種Cervus屬動(dòng)物，同屬不同種意味著它們具有共性和差異性。1)生理代謝異同性：在相同飼養(yǎng)條件下，梅花鹿和馬鹿的血清胰島素樣生長(zhǎng)因子-1(IGF-1)和生長(zhǎng)激素(GH)濃度變化同步，但在每一年的大部分時(shí)間點(diǎn)，梅花鹿均高于馬鹿且變化幅度大于后者[12]。2)藥材化學(xué)組分異同性：梅花鹿茸和馬鹿茸的營養(yǎng)成分(粗蛋白、膳食纖維、粗脂肪、維生素B2、多種氨基酸及總量、微量元素)相近[13]，但對(duì)水溶性總蛋白HPLC指紋圖譜中8個(gè)共有峰的比較表明，梅花鹿茸相比馬鹿茸所含主要成分含量更高；電泳圖譜和質(zhì)譜比較表明，梅花鹿茸和馬鹿茸多肽的化學(xué)性質(zhì)有較大差異[14]。3)藥效異同性：梅花鹿茸和馬鹿茸多肽對(duì)兔軟骨細(xì)胞和大鼠表皮細(xì)胞的分裂都有促進(jìn)作用，但馬鹿茸多肽對(duì)表皮細(xì)胞的增殖作用更強(qiáng)[15]，梅花鹿茸乙醇提取物在抑制紅細(xì)胞凝集和促進(jìn)纖維蛋白溶解上是馬鹿茸乙醇提取物的3～5倍[16]。此外，因人工飼養(yǎng)時(shí)頻繁交換種鹿，東北地區(qū)梅花鹿不同品系存在明顯的種內(nèi)差異，根據(jù)對(duì)mtDNA D-loop部分序列的分析表明，東北雙陽品系已基本失去了傳統(tǒng)的遺傳獨(dú)特性[17]，梅花鹿不同培育品系的外貌特征如鹿茸主干的伸展方向也出現(xiàn)明顯差異性[18]，表明梅花鹿種內(nèi)遺傳差異性引起了藥材差異性，這在一定程度上會(huì)造成其藥材化學(xué)品質(zhì)和效用品質(zhì)的差異。

可見，遺傳因素對(duì)藥用動(dòng)物的形態(tài)特質(zhì)與代謝特質(zhì)起到了主導(dǎo)作用，直接關(guān)系中藥動(dòng)物藥的品質(zhì)與藥效。

2.2 從環(huán)境飾變角度探析中藥動(dòng)物藥的品質(zhì)

動(dòng)物的自穩(wěn)調(diào)節(jié)系統(tǒng)完善，影響動(dòng)物生長(zhǎng)狀態(tài)和藥材品質(zhì)變化的環(huán)境因素和程度與植物存在差異。總體上可分為生物因素和非生物因素，生物因素包括環(huán)境微生物、寄生蟲、群養(yǎng)或獨(dú)養(yǎng)等，非生物因素包括食源、土壤、溫度、水、鹽、圈養(yǎng)或散養(yǎng)等，這些因素直接或間接影響著動(dòng)物生理代謝和生長(zhǎng)，進(jìn)而影響到動(dòng)物藥材的品質(zhì)。

2.2.1 環(huán)境微生物的影響 例如山東不同地域的9株白僵菌(7株球孢白僵菌、2株卵孢白僵菌)感染家蠶的實(shí)驗(yàn)表明，不同地域、不同菌株對(duì)家蠶的致死率存在明顯差異，而且各菌株生產(chǎn)的白僵蠶中草酸銨含量也差異很大[19]。

2.2.2 寄生蟲的影響 例如麝科動(dòng)物極易感染寄生蟲(24個(gè)養(yǎng)麝場(chǎng)的1049只麝感染9種寄生蟲的總陽性率達(dá)70.83%[20])，可引起消瘦、腹瀉、生長(zhǎng)發(fā)育受阻等危害，一定程度影響麝香的產(chǎn)量和質(zhì)量[21]。

2.2.3 群養(yǎng)或獨(dú)養(yǎng)的影響 群養(yǎng)時(shí)動(dòng)物個(gè)體之間存在競(jìng)爭(zhēng)關(guān)系，例如藥用蜈蚣幼體群養(yǎng)時(shí)每次攝食量約為總體質(zhì)量的1/3，但單獨(dú)飼養(yǎng)時(shí)攝食量達(dá)群養(yǎng)的3倍[22]。

2.2.4 土壤等生長(zhǎng)基質(zhì)的影響 地鱉的飼養(yǎng)，考察體長(zhǎng)、腹寬和體質(zhì)量增長(zhǎng)率等指標(biāo)，非土壤基質(zhì)(椰殼粉、鋸末、雞糞肥)顯著優(yōu)于傳統(tǒng)土壤基質(zhì)(腐殖土、草木灰、雞糞肥)[23]。

2.2.5溫度的影響 不同溫度(18、20、22、24、26、28、32 ℃)下，幼年大海馬的性腺發(fā)育、生殖力、受精率、孵化率和成活率均有顯著差異，適宜溫度為26～28 ℃[24]；溫度突變(從23 ℃分別突變至15、28、33 ℃)可使大海馬幼體的生長(zhǎng)指標(biāo)(體質(zhì)量、體長(zhǎng)、成活率)、生化組分(粗蛋白、粗脂肪)、酶(超氧化物歧化酶、過氧化氫酶、堿性磷酸酶、血清酸性磷酸酶)的活力發(fā)生顯著改變[25]。

2.2.6 水環(huán)境的影響 珍珠化學(xué)成分與養(yǎng)殖所用水有直接關(guān)系，海水珍珠明顯富含Na、K、Mg、Sr，而淡水珍珠明顯富含Mn[26]；合浦海水珍珠的氨基酸含量明顯高于一般淡水珍珠[27]；臨床應(yīng)用表明，海水珍珠長(zhǎng)于明目，而淡水珍珠則優(yōu)于抗胃部及皮膚潰瘍[28]。

2.2.7 鹽的影響 不同鹽度的海水對(duì)毛蚶的耗氧率和排氨率有顯著影響，并且與溫度有交互作用[29]。

2.2.8 圈養(yǎng)或散養(yǎng)的影響 對(duì)梅花鹿茸不同部位的16種氨基酸和15種無機(jī)元素的測(cè)定表明，圈養(yǎng)梅花鹿茸各部位必需氨基酸含量、游離氨基酸總量和無機(jī)元素含量明顯高于散養(yǎng)梅花鹿茸[30]。

可見，藥用動(dòng)物代謝差異性和藥材品質(zhì)的差異性除受控于遺傳因素外，其生長(zhǎng)環(huán)境條件的變化，將引起代謝產(chǎn)物及形態(tài)特征的相應(yīng)變化，從而會(huì)對(duì)其藥材品質(zhì)產(chǎn)生直接影響。

2.3 從生物多樣性維持角度探析中藥動(dòng)物藥的品質(zhì)

藥源是保證臨床有藥可用的關(guān)鍵，維系中藥動(dòng)物藥的藥源，與藥材品質(zhì)、藥用動(dòng)物的生物多樣性密切相關(guān)。正是由于一些藥用動(dòng)物的生物多樣性出現(xiàn)危機(jī)，缺乏對(duì)多樣性的可持續(xù)保護(hù)，甚至喪失多樣性，才導(dǎo)致一些動(dòng)物藥資源瀕危，以致被禁止使用，例如虎骨、犀角、穿山甲等即是如此。因此，生物多樣性保護(hù)對(duì)保障動(dòng)物藥有藥可用、安全、有效具有重要意義?，F(xiàn)將影響動(dòng)物藥品質(zhì)和資源的生物多樣性因素，歸納成遺傳因素(品種品系)、物種因素和生態(tài)因素3個(gè)層面。

2.3.1 遺傳多樣性影響動(dòng)物藥品質(zhì) 例如基因多態(tài)性分析表明，IGF-1基因、GH基因、褪黑激素受體1A(MTNR1A)基因和雄激素受體(AR)基因的單核苷酸多態(tài)性對(duì)梅花鹿的產(chǎn)茸性狀(產(chǎn)茸量、主干圍度)有一定影響[31-33]。

2.3.2 物種多樣性保障動(dòng)物藥資源供給 物種多樣性對(duì)維系中藥事業(yè)延續(xù)發(fā)展功不可沒。我國是動(dòng)物種類最多的國家之一，有記載的脊椎動(dòng)物種類達(dá)6347種，居世界前列。據(jù)有關(guān)資料統(tǒng)計(jì)，全國用于中藥飲片或中成藥生產(chǎn)涉及的中藥材有1000多種，其中動(dòng)物藥有100余種。除單一物種外，在醫(yī)療實(shí)踐中，還使用親緣關(guān)系相近物種所形成的多基原品種，例如《中華人民共和國藥典》(2015年版)收載的土鱉蟲(2個(gè)基原)、牡蠣(3個(gè)基原)、地龍(4個(gè)基原)、海馬(5個(gè)基原)、石決明(6個(gè)基原)。此外，多基原品種還較廣泛存在于地區(qū)習(xí)用藥材品種中，例如，前幾年對(duì)海馬藥材商品市場(chǎng)調(diào)查表明，成都荷花池和河北安國藥市的海馬藥材商品，源于Hippocampus屬的13種動(dòng)物[9]；又如海粉(海兔科動(dòng)物的卵群帶)，《中藥大辭典》(1977年)將中國特有種藍(lán)斑背肛海兔Notarchusleachiicirrosus定為基原動(dòng)物，《中華本草》(1999年)進(jìn)一步將黑斑海兔Aplysiakurodai和網(wǎng)紋海兔A.pulmonica納入其基原動(dòng)物范圍，而中國海域的海兔科動(dòng)物多達(dá)6屬23種，因此類動(dòng)物具有藥食兩用性，故實(shí)際上各種海兔的卵群帶都有可能在民間作為海粉藥用[34]。

2.3.3 生態(tài)多樣性是保障中藥動(dòng)物藥資源可持續(xù)利用的重要因素 藥用動(dòng)物生活于特定的生態(tài)系統(tǒng)和生態(tài)環(huán)境中[35]，其生態(tài)等級(jí)、野生量(種群密度)、養(yǎng)殖量(養(yǎng)殖密度)、資源總量，可能隨影響生態(tài)系統(tǒng)的因素(如共生物種、自然環(huán)境條件、人為污染、采收強(qiáng)度等)變化而變化。由于長(zhǎng)期以來的過度利用和保護(hù)不力，我國藥用動(dòng)物生態(tài)多樣性的現(xiàn)狀不容樂觀。為改變這一局面，第一，應(yīng)基于恢復(fù)生態(tài)學(xué)原理，加大藥用動(dòng)物生態(tài)多樣性恢復(fù)和重建力度[36]；第二，應(yīng)加強(qiáng)立法管理，例如冬蟲夏草管理法規(guī)的修訂，應(yīng)考慮制定可持續(xù)采集方案，并對(duì)采集區(qū)域、采集人數(shù)、采挖時(shí)間進(jìn)行適當(dāng)限制[37]；第三，應(yīng)大力發(fā)展藥用動(dòng)物的養(yǎng)殖或藥用動(dòng)物有效成分的合成[38]。

2.4 從藥物傳承角度探析中藥動(dòng)物藥的品質(zhì)

中藥的品種、產(chǎn)地、質(zhì)量、采收、加工、炮制、用法和療效在歷史發(fā)展的長(zhǎng)河中，一方面由于療效穩(wěn)定而世代傳承；另一方面歷代都有品種變遷、產(chǎn)地變遷、新品質(zhì)特征、新加工方法、效用拓展變遷等新情況出現(xiàn)。因此，中藥品質(zhì)始終在繼承和創(chuàng)新相互交織之中發(fā)展，這就是中藥品質(zhì)傳承的特點(diǎn)[2]。

2.4.1 品種(遺傳品質(zhì))的傳承與創(chuàng)新 例如我國飼養(yǎng)的梅花鹿是野生東北梅花鹿經(jīng)長(zhǎng)時(shí)間人工馴養(yǎng)繁育而傳承下來的種質(zhì)，與中國多樣化的環(huán)境相適應(yīng)，在演化過程中形成了不同形態(tài)的群體類型，如伊通型、撫松型、龍?zhí)渡叫?、雙陽型、東豐型等[39]。家養(yǎng)梅花鹿經(jīng)多年人工選育，形成了6個(gè)品種、1個(gè)品系，這些品種(品系)具有遺傳性能穩(wěn)定、產(chǎn)茸能力高的特點(diǎn)；同時(shí)梅花鹿各品種(品系)間的雜交以及梅花鹿同馬鹿間的雜交，也獲得了一些具有雜交優(yōu)勢(shì)的茸鹿品種[40]。另外，經(jīng)現(xiàn)代科技手段獲得一些與天然來源動(dòng)物藥相似療效的新藥物，也是品種傳承與創(chuàng)新的另一種方式。例如，以天然牛黃為參照而發(fā)展得到的人工培育牛黃、人工合成牛黃等[41]。

2.4.2 環(huán)境品質(zhì)的傳承與發(fā)展 例如冬蟲夏草生長(zhǎng)需要特殊的生境[42]，早期文獻(xiàn)記載產(chǎn)于川西地區(qū)，是四川道地藥材，《四川通志》(1733年)始載產(chǎn)裡塘(今理塘)，謂其“出撥浪工山，本草不載”；《本草從新》(1757年)謂“四川嘉定府所產(chǎn)者最佳”，《本草綱目拾遺》(1765年)謂“出四川江油縣化林坪”。至今，四川甘孜、阿壩等地所產(chǎn)冬蟲夏草的規(guī)模仍較為大宗。與現(xiàn)今市場(chǎng)多重“藏草”輕“川草”不同，清末以前，因交通不發(fā)達(dá)，典籍未見記載青海、西藏等產(chǎn)區(qū)，“藏草”亦未大量從深山傳出[43]。而自《本草問答》(1893年)記載“此物生于西蕃草地”以來，青藏高原逐漸成為冬蟲夏草的主產(chǎn)區(qū)?？梢?，冬蟲夏草的產(chǎn)地雖有歷史變遷，但各重要產(chǎn)地的海拔、坡度、植被、土壤、氣候等環(huán)境因子是相似的。

2.4.3 形態(tài)品質(zhì)的傳承與發(fā)展 海馬始載唐代《本草拾遺》，記述其形態(tài)特征是“大小如守宮，蟲形若馬形，其色黃褐”，據(jù)此難以判斷其具體物種；宋代《本草衍義》謂“首如馬，身如蝦，背傴僂，身有竹節(jié)紋，長(zhǎng)二三寸，今謂之海馬”的描述較準(zhǔn)確，可依此確定其基原為Hippocampus屬動(dòng)物，但仍難以確定到具體種；明代《本草原始》新收載小海馬：“似海馬而小者，名海蛆，又名海蝎子，亦呼小海馬”；清代《本草綱目拾遺》引《百草鏡》進(jìn)一步謂：“海馬之屬有三，小者長(zhǎng)不及寸名海蛆，不入藥；中等長(zhǎng)者一二寸名海馬，尾盤旋作圈形……海龍乃海馬中絕大者，長(zhǎng)四五寸至尺許不等，皆長(zhǎng)身而尾直不作圈”?？梢?，歷代本草對(duì)海馬形態(tài)特征的認(rèn)識(shí)在傳承中有發(fā)展，基原物種的認(rèn)識(shí)也逐漸清晰。至近現(xiàn)代，《中藥志》(1959年)首次確定了海馬藥材的4個(gè)基原物種，對(duì)源于這些物種的藥材性狀特征給出了更加準(zhǔn)確的描述(詳見2.1.1)[8]。

2.4.4 采收加工品質(zhì)的傳承與發(fā)展 例如水蛭的采收時(shí)間歷代本草記載“五月六月采”(今公歷6—7月)，現(xiàn)代研究進(jìn)一步確定7月下旬是最佳采收期[44]。鹿茸的干燥方式，歷代本草記載“陰干”，現(xiàn)代研究發(fā)展了常溫干燥方式并確定了具體參數(shù)，即：切極薄片，置吸水紙上，于35 ℃干燥4 h[45]。

2.4.5 炮制品質(zhì)傳承與發(fā)展 白僵蠶的炮制自古采用高溫處理，例如《千金要方》謂“微炒之”，《日華子本草》載“炒用”，《圣濟(jì)總錄》要求“麩炒令黃”；現(xiàn)代對(duì)傳承至今的麩炒炮制法研究表明，高溫麩炒后蛋白質(zhì)含量下降(與炮制緩和藥性的目的相吻合)，生品中的黃曲霉毒素已被除去(增加了安全性)，從而證明了麩炒炮制的合理性[46]。

2.4.6 效用品質(zhì)的傳承與發(fā)展 效用延續(xù)傳承，例如海粉在《本經(jīng)逢原》謂“散癭瘤、解毒熱”，《本草從新》載“消癭瘤積塊”，《隨息居飲食譜》謂“消癭瘤、愈瘰疬”，現(xiàn)代研究從海兔科動(dòng)物中分離得到了大量的抗腫瘤活性成分，其中Dolastatin 10被作為抗腫瘤化療藥開發(fā)，已在美國開展臨床試驗(yàn)[34]。效用范圍拓展，例如九香蟲在《本草綱目》載主治“膈脘滯氣、脾腎虧損、壯元陽”，《本草新編》謂“專興陽益精”；現(xiàn)代藥理實(shí)驗(yàn)證明其具有補(bǔ)腎壯陽的活性[47]，同時(shí)臨床研究發(fā)現(xiàn)其治血管瘤的新特性[48]。

因此，不僅應(yīng)從歷史傳承角度去理解動(dòng)物藥的品質(zhì)，也應(yīng)加強(qiáng)現(xiàn)代研究深入闡釋和拓展其品質(zhì)內(nèi)涵。

2.5 從效用定質(zhì)角度探析中藥動(dòng)物藥的品質(zhì)

效用是中藥動(dòng)物藥品質(zhì)的決定性因素，體現(xiàn)在效用優(yōu)選藥源、產(chǎn)地、采收加工和炮制方法4個(gè)方面。

2.5.1 效用優(yōu)選藥源 例如，鱉甲來源于中華鱉Trionyxsinensis，而市場(chǎng)上常有混淆品緣板鱉甲和山瑞鱉甲。通過甲亢“陰虛”型大鼠的物質(zhì)代謝、甲亢“陰虛”型小鼠應(yīng)激能力等多指標(biāo)權(quán)衡分析，均以中華鱉甲正品的效果最為明顯[49]。

2.5.2 效用優(yōu)選產(chǎn)地 例如，地龍“性寒故能解諸熱疾”(《本草綱目》)，通過解熱、降壓、平喘、利尿等藥理實(shí)驗(yàn)表明，道地藥材廣地龍、滬地龍的解熱作用強(qiáng)于非道地產(chǎn)區(qū)(山東)產(chǎn)的土地龍，而其他作用的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義[50]。水蛭能“逐惡血瘀血”(《本草綱目》)，螞蟥Whitmaniapigra為其基原之一，不同產(chǎn)地的種群存在差異；以抗凝血酶活性結(jié)合黃嘌呤和次黃嘌呤含量等理化指標(biāo)為評(píng)價(jià)依據(jù)，考察多個(gè)產(chǎn)地螞蟥的內(nèi)在質(zhì)量差異，結(jié)果表明江蘇江寧基地養(yǎng)殖品種高于其他種群，浙江桐鄉(xiāng)基地養(yǎng)殖品種高于野生品種，螞蟥道地產(chǎn)區(qū)江蘇、浙江明顯高于非道地主產(chǎn)區(qū)河北衡水[51]。

2.5.3 效用優(yōu)選采收加工方法 《本草蒙筌》謂“采收按時(shí)月……禽獸蟲魚，或取無時(shí)，或收按節(jié)，亦有深義”，李時(shí)珍謂“制造異法度”，指出了藥效與采收、加工、炮制的相關(guān)性，以及基于藥效進(jìn)行優(yōu)選的必要性。例如，以纖溶活性及單位效價(jià)為評(píng)價(jià)指標(biāo)，考察地龍藥材的兩種采收方法(剖開凈制、自然吐泥凈制)、兩種干燥加工方法(曬干、烘干)，結(jié)果表明自然吐泥凈制法采收的藥材活性較大，兩種采收加工方法的毒性差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，在日光下曝干省時(shí)、質(zhì)量好、收率高[52]。

2.5.4 效用優(yōu)選炮制方法 地龍治“喘促”(《本草綱目》)，現(xiàn)代藥理研究也證實(shí)其有平喘作用；廣地龍不同炮制品(蛤粉制、黃酒制、白酒制、醋制、凈制)的止咳、化痰和平喘等實(shí)驗(yàn)結(jié)果，表明蛤粉制廣地龍效果最好[53]。

可見，臨床療效是評(píng)判中藥品質(zhì)優(yōu)劣的終極標(biāo)準(zhǔn)，因此有必要從效用優(yōu)選角度去認(rèn)識(shí)中藥動(dòng)物藥的品質(zhì)。

2.6 從多元調(diào)控角度探析中藥動(dòng)物藥的品質(zhì)

動(dòng)物藥的生產(chǎn)和使用過程中，包括飼養(yǎng)管理、采收加工、炮制、用法等諸多環(huán)節(jié)都會(huì)影響藥材的品質(zhì)，多元調(diào)控就是人工干預(yù)這些影響動(dòng)物藥品質(zhì)的過程和因素，使其向有利一面發(fā)展。

2.6.1 飼養(yǎng)管理調(diào)控措施 相關(guān)調(diào)控措施又可分成適應(yīng)型、補(bǔ)給型、調(diào)節(jié)型。適應(yīng)型措施：例如， 基于麝的生物學(xué)特性、麝養(yǎng)殖圈舍布局和結(jié)構(gòu)的研究，表明場(chǎng)址和圈舍結(jié)構(gòu)與養(yǎng)殖效果密切相關(guān)，而海拔、緯度、氣溫、植被是影響麝養(yǎng)殖場(chǎng)選址的重要因素，以海拔1200～1250 m較2600 m以上建養(yǎng)麝場(chǎng)的養(yǎng)殖效果更好，成體、幼體麝成活率分別達(dá)95%和93%，較后者分別提高20%和23%，由此制定科學(xué)規(guī)范而適應(yīng)麝生長(zhǎng)的選場(chǎng)、圈舍建設(shè)方案[54]。補(bǔ)給型措施：例如，比較青綠飼料、青綠飼料加低蛋白飼料、青綠飼料加高蛋白飼料、配合飼料飼喂林麝的結(jié)果表明，飼料營養(yǎng)顯著影響麝香產(chǎn)量和品質(zhì)，單獨(dú)飼喂青綠飼料難以滿足麝泌香的營養(yǎng)需要，提高營養(yǎng)水平可相應(yīng)提升麝香的產(chǎn)量和品質(zhì)[55]。調(diào)節(jié)型措施：包括通過特定化學(xué)物質(zhì)、限制種群密度、控制溫度、活動(dòng)量等措施。例如，麝香生產(chǎn)中應(yīng)用外源性雄激素連續(xù)兩年誘導(dǎo)雄麝可使其產(chǎn)生二次泌香，提高麝香年產(chǎn)量，而且誘導(dǎo)后不但對(duì)其次年自然泌香節(jié)律無影響，還使次年自然泌香量明顯增加[56]。又如螞蟥的養(yǎng)殖中，考察不同養(yǎng)殖密度對(duì)螞蟥生長(zhǎng)和內(nèi)在品質(zhì)影響的結(jié)果表明，適宜養(yǎng)殖密度可達(dá)每畝50萬條(1畝=666.7 m2)[57]。而養(yǎng)殖密度對(duì)中華蟾蜍幼蟾體質(zhì)量和體長(zhǎng)無顯著影響，但嚴(yán)重影響幼蟾的成活率，密度控制在20只/m2，其在第一次冬眠前的成活率約為30%[58]。

2.6.2 采收加工調(diào)控措施 例如通過控制捕捉時(shí)間、哈士蟆體質(zhì)量調(diào)控哈蟆油的出產(chǎn)率，以10月中旬至11月初，體質(zhì)量35～50 g為佳；通過防止商品蛙被凍傷、促使商品蛙加速干燥、避免蛙體內(nèi)水分結(jié)冰等適宜措施可調(diào)控產(chǎn)地加工過程中出現(xiàn)“紅油”“黑油”“凍油”等品質(zhì)異?，F(xiàn)象的發(fā)生[59]。

2.6.3 炮制調(diào)控措施 通過炮制調(diào)節(jié)中藥動(dòng)物藥品質(zhì)，是保證臨床療效的一種重要手段，歷代積累了豐富經(jīng)驗(yàn)。常通過加輔料炮制，如醋制、酒制、麩炒等方法消除動(dòng)物類中藥具有的特殊氣味或刺激性，增加藥效或溶出度；如醋炙五靈脂、酒制烏梢蛇不僅可除去腥味，還有活血止痛的作用；麩炒白僵蠶既除去腥味又增加活性成分溶出，減少有害草酸銨含量等。或通過煅制、醋淬等使貝殼類中藥質(zhì)地疏松，可增加藥物的溶出度或增強(qiáng)某一療效，如貝殼類中藥鍛制后還能增強(qiáng)其收斂固澀、止酸等作用。另外一方面，某些動(dòng)物藥還作炮制輔料，增強(qiáng)其他藥物作用或減少副作用，如牛膽汁制天南星能增強(qiáng)息風(fēng)止痛作用，蜜炙百部、紫菀能增強(qiáng)潤(rùn)肺止咳作用，蜜炙遠(yuǎn)志則緩解其胃腸道毒性等。此外，中藥的給藥途徑、應(yīng)用形式、煎煮方法、服藥方法等調(diào)控直接關(guān)系臨床療效，歷代多有總結(jié)，是用法調(diào)控中藥品質(zhì)的另一個(gè)重要方面。

綜上可見，今后應(yīng)進(jìn)一步加強(qiáng)動(dòng)物藥生產(chǎn)中多元調(diào)控研究，特別是飼養(yǎng)管理研究，以提高中藥材產(chǎn)量和穩(wěn)定質(zhì)量為目標(biāo)，采取有利的調(diào)控措施，以保證動(dòng)物藥的品質(zhì)，從而保證其臨床療效。

2.7 從中藥物流保質(zhì)角度探析中藥動(dòng)物藥的品質(zhì)

中藥材的貯藏和運(yùn)輸對(duì)其品質(zhì)影響較大，明代《本草蒙筌》就指出“藏留防耗壞”，在長(zhǎng)期醫(yī)療實(shí)踐中認(rèn)識(shí)到貯藏對(duì)保證中藥品質(zhì)的重要性。動(dòng)物藥含有較多蛋白質(zhì)、脂肪等易腐敗變質(zhì)的成分，因此更應(yīng)在物流過程尤其是貯藏環(huán)節(jié)進(jìn)行嚴(yán)格管控。

2.7.1 明確貯藏變質(zhì)的原因 例如水蛭、地龍?jiān)谫A藏過程中常見的變質(zhì)現(xiàn)象是霉變、蟲蛀、泛油、變色等，根據(jù)倉儲(chǔ)保管實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)分析，變質(zhì)的原因主要是藥材含水量超標(biāo)、溫度較高、濕度較大、害蟲或其蟲卵感染[60]，因此保存時(shí)應(yīng)有針對(duì)性地控制這些因素，有利于防止藥材變質(zhì)。

2.7.2 采用適當(dāng)?shù)馁A藏養(yǎng)護(hù)方法 在長(zhǎng)期的藥材貯藏養(yǎng)護(hù)中，已經(jīng)總結(jié)出一些行之有效的方法，例如藥材與乙醇共貯[61]、傷濕膏與生石灰共貯[62]；或與其他中藥對(duì)抗共貯，例如大蒜與土鱉蟲、全蝎、僵蠶、守宮等共貯，吳茱萸與蛇類藥材共貯，花椒與鹿茸共貯[63]，阿膠等膠質(zhì)類藥材埋入谷糠中貯存[64]等，都是經(jīng)長(zhǎng)期實(shí)踐、行之有效的方法。隨著現(xiàn)代科技的進(jìn)步，一些新方法、新技術(shù)、新設(shè)備和新材料等廣泛應(yīng)用在中藥貯藏養(yǎng)護(hù)中。如氣調(diào)、冷藏、輻射、遠(yuǎn)紅外干燥等方法和手段的應(yīng)用，有效控制了影響中藥品質(zhì)的因素。此外，在中藥商品物流中，還須重視運(yùn)輸過程的諸多因素對(duì)中藥動(dòng)物藥品質(zhì)的影響，如運(yùn)輸過程中防雨淋、吸潮、曝曬以及運(yùn)輸工具的保潔，避免殘留有害物質(zhì)(殺蟲劑、消毒劑及其他有毒試劑等)污染、影響中藥動(dòng)物藥的品質(zhì)。

2.7.3 加強(qiáng)質(zhì)量監(jiān)測(cè)分析并明確貯藏時(shí)間對(duì)品質(zhì)的影響 例如通過蛋白電泳譜帶分析、光譜分析、膨脹度測(cè)定、多糖含量測(cè)定等發(fā)現(xiàn)貯藏年限對(duì)哈蟆油質(zhì)量的影響[65-66]，為準(zhǔn)確監(jiān)測(cè)貯藏過程中哈蟆油品質(zhì)變化提供了技術(shù)方案。

總之，不同的動(dòng)物藥由于藥材的理化性質(zhì)不同，貯藏變質(zhì)的情況各異，應(yīng)進(jìn)一步加強(qiáng)貯運(yùn)條件的研究，并有針對(duì)性地采取相應(yīng)的、適當(dāng)?shù)奈锪鞅Ｙ|(zhì)措施。

2.8 從藥物辨?zhèn)味ㄏ蚪嵌忍轿鲋兴巹?dòng)物藥的品質(zhì)

明確藥材是否符合國家法定的品種和質(zhì)量要求，是防止偽劣藥品進(jìn)入臨床、從而保證中藥安全有效的重要環(huán)節(jié)。藥材品種來源正確與否，是中藥材品質(zhì)評(píng)價(jià)的第一步。動(dòng)物類藥材的來源，有動(dòng)物全體、部分組織器官、分泌物、病理性產(chǎn)物、人工加工品等，混淆物種的產(chǎn)品冒充或摻雜的情況也較多。因此，動(dòng)物藥的真?zhèn)舞b別應(yīng)在充分考察有關(guān)本草文獻(xiàn)的基礎(chǔ)上，從外觀形態(tài)特征到內(nèi)在化學(xué)組分特征進(jìn)行綜合分析。目前，基于傳統(tǒng)經(jīng)驗(yàn)歸納的性狀鑒別和基于特定化學(xué)成分的理化分析鑒別已成為中藥鑒別的常規(guī)方法，無需更多討論，此處僅簡(jiǎn)要敘述對(duì)動(dòng)物藥鑒別有較大幫助的技術(shù)手段。

2.8.1 深入挖掘性狀鑒別潛力 深入研究藥材外觀和內(nèi)部形態(tài)結(jié)構(gòu)特征，歸納出準(zhǔn)確、全面、突出反映藥材基原屬性的專屬性特征。例如海馬的藥材性狀特征，就是在結(jié)合考證、標(biāo)本考察和藥源調(diào)查的基礎(chǔ)上，提出能準(zhǔn)確反映藥材性狀與基原關(guān)系的特征[8-10]。又如基于多個(gè)產(chǎn)地60份冬蟲夏草樣本形態(tài)特征的詳細(xì)觀察，最終規(guī)范了冬蟲夏草藥材蟲體部分的形態(tài)學(xué)描述，完善了冬蟲夏草顯微學(xué)的鑒別特征[67]。

2.8.2 發(fā)現(xiàn)標(biāo)志性蛋白用于動(dòng)物藥的鑒別 動(dòng)物藥的蛋白質(zhì)含量豐富，且不同動(dòng)物具有不同蛋白質(zhì)組成，可通過蛋白組學(xué)分析發(fā)現(xiàn)標(biāo)志性蛋白，實(shí)現(xiàn)基原物種的準(zhǔn)確鑒別。例如冬蟲夏草的混淆品和偽品較多[68]，利用雙向電泳技術(shù)，篩選鑒定出正品冬蟲夏草中共同表達(dá)的蛋白斑點(diǎn)和偽品穩(wěn)定差異表達(dá)的蛋白質(zhì)斑點(diǎn)[69]；又如海馬是多基原動(dòng)物藥，針對(duì)基原物種三斑海馬進(jìn)行雙向電泳分析，提出三斑海馬藥材蛋白質(zhì)組學(xué)特征[70]；這些研究為通過蛋白質(zhì)特征準(zhǔn)確鑒別這兩種藥材奠定了基礎(chǔ)。

2.8.3 利用遺傳物質(zhì)(DNA)鑒別動(dòng)物藥 例如，近年來發(fā)展很快的DNA條形碼技術(shù)[71]。由于DNA鑒別專屬性好，未來該技術(shù)將成為多數(shù)動(dòng)物鑒別的主要手段，而且可通過組裝試劑盒實(shí)驗(yàn)實(shí)現(xiàn)簡(jiǎn)便、易重復(fù)的鑒別，現(xiàn)已研制成功冬蟲夏草PCR快速檢測(cè)試劑盒[72]。但部分動(dòng)物藥不含DNA或難以提取出DNA，如蟾酥、牛黃、珍珠等，這些藥材的鑒別可能仍主要依賴于理化分析手段。

綜上可見，動(dòng)物藥的基原和藥用部位較復(fù)雜，藥效物質(zhì)基礎(chǔ)大多不明確，而且摻偽制假自古有之。因此，真?zhèn)舞b別動(dòng)物藥往往難度較大，需要多種手段和方法并用以杜絕偽劣品，保證動(dòng)物藥品質(zhì)是一項(xiàng)長(zhǎng)期而艱巨的任務(wù)。

3 中藥動(dòng)物藥品質(zhì)評(píng)價(jià)與品質(zhì)保證體系的建立

如何保障中藥品質(zhì)，實(shí)現(xiàn)臨床用藥安全、有效、穩(wěn)定和可控，是目前中藥研究的關(guān)鍵問題之一。因此，建立科學(xué)、規(guī)范的中藥品質(zhì)評(píng)價(jià)體系和保證體系，一直是中藥研究的重點(diǎn)和難點(diǎn)。長(zhǎng)期以來，植物藥的研究相對(duì)較深入，而動(dòng)物藥的基礎(chǔ)研究較薄弱，同時(shí)，人工飼養(yǎng)藥用動(dòng)物的技術(shù)難度大、成本高，且動(dòng)物藥的摻偽制假現(xiàn)象也較多，這就使得建立動(dòng)物藥品質(zhì)評(píng)價(jià)與保證體系的任務(wù)更為迫切和艱巨?；谏鲜鰪摹捌贩N-質(zhì)量-藥效”相關(guān)性的角度對(duì)中藥動(dòng)物藥品質(zhì)的分析和認(rèn)識(shí)，提出建立中藥動(dòng)物藥品質(zhì)評(píng)價(jià)與保證體系的初步構(gòu)想(見圖2)，以拋磚引玉，為深入開展中藥動(dòng)物藥品質(zhì)評(píng)價(jià)與研究提供參考。

注：虛線為品質(zhì)評(píng)價(jià)研究路線；實(shí)線為品質(zhì)保證路線。圖2 中藥動(dòng)物藥品質(zhì)評(píng)價(jià)研究和品質(zhì)保證體系模式圖