邱成書,李 河,李傳華
(1成都師范學院化學與生命科學院,成都611130;2紅河學院生命科學與技術學院,蒙自661100;
3農業部南方食用菌資源利用重點實驗室,國家食用菌工程技術研究中心,上海市農業遺傳育種重點實驗室,上海市農業科學院食用菌研究所,上海201403)
杏鮑菇[Pleurotus eryngii(DC.)Quél.]隸屬側耳科(Pleurotaceae)側耳屬(Pleurotus),野生杏鮑菇常常生長在枯死的刺芹植株上,故名刺芹側耳[1]。杏鮑菇菌肉肥厚,營養豐富,具有特殊的杏仁香味和鮑魚味,故稱杏仁鮑魚菇,其子實體純白,質地脆嫩,有“平菇王”“干貝菇”等美譽[1-2]。杏鮑菇中蛋白質、脂肪、寡糖和多糖含量高,并含有多種維生素及微量元素[3-4],具有促進胃腸消化、增強機體免疫能力、防止心血管病等藥用功效[5-8]。
杏鮑菇降解木質素和纖維素的能力很強,栽培杏鮑菇的培養料通常以富含木質素和纖維素的材料作為碳源;其利用富含蛋白質的原料能力也很強,生產上通常以棉籽殼等原料充當氮源[9]。宮志遠等[10]研究發現,以棉籽殼為主料栽培的杏鮑菇品質優于以玉米芯和玉米秸稈兩種栽培料為主料栽培的杏鮑菇。杏鮑菇可在中國廣大地區進行栽培,但各地栽培原料卻不同,因此進行杏鮑菇栽培,所需原材料需因地制宜,選擇最適合當地的原材料[11]。杏鮑菇規模化生產中,常用雜木屑、玉米芯和棉籽殼等作為主要栽培料,米糠或麩皮充當輔料[12-14]。
平菇栽培廢料富含蛋白質、粗纖維和多種礦質營養,如果處理不當易造成環境污染和資源浪費[15]。胡建偉等[16]以平菇菌糠搭配棉籽殼作為主要栽培料進行雞腿菇的栽培,發現栽培料中添加質量比為17.5%的平菇菌糠,雞腿菇的產量和經濟效益最好。在奶牛和肉牛生產過程中,牛糞作為排泄物,如果處理不當,容易給環境造成較大的污染。牛糞含有大量的粗纖維、粗蛋白和灰分等成分[17],可以進行充分利用。在利用牛糞進行食用菌栽培方面,國內有過一定的研究,如楊立賓等[18]利用牛糞與作物秸稈搭配,在防護林下栽培雙孢蘑菇,能顯著提高生物轉化率。本試驗嘗試利用牛糞、平菇栽培廢料和一定比例的麩皮進行杏鮑菇栽培,以期更好地利用廢棄生物資源,降低杏鮑菇栽培成本,提高經濟效益。
杏鮑菇2號(XB-2),引種自綿陽市食用菌研究所。該菇菌絲生長快,白色粗壯;子實體單生或叢生,菌蓋灰白色,菌柄潔白,形態呈保齡球狀,肉質肥厚,味道鮮美,一般常用木屑、棉籽殼袋栽。
1.2.1 試劑
過磷酸鈣(AR)、石膏、葡萄糖(AR)、蔗糖(AR)、蒸餾水、瓊脂(AR)等試劑購自天津市化學試劑三廠。
1.2.2 栽培原料
在耕牛養殖戶家收集濕的牛糞,置于陽光下曬干,碾細成粉末,裝入編織袋,存放于干燥通風的地方備用。平菇栽培廢料從常年栽培平菇基地收集,在陽光下曬干,粉碎存儲于通風處備用,馬鈴薯、麩皮在農貿市場購置。
YXQ-LS-50SII型滅菌鍋(上海博迅實業有限公司醫療設備廠)、SW-CJ-IF型超凈工作臺(蘇凈集團蘇州安泰空氣技術有限公司)、GC-250H型人工氣候培養箱(上海悅豐儀器儀表有限公司)、YCD-EL259型冰箱(中科美菱低溫科技有限公司)、超聲波工業加濕機(杭州正島電器設備有限公司)、亞都超聲波加濕器、電子天平(賽多利斯科學有限公司)。
1.4.1 母種擴繁
PDS培養基(馬鈴薯200 g、蔗糖20 g、瓊脂20 g,過濾加水并調至濾液1 000 mL)。用接種針挑取杏鮑菇母種菌絲于PDS斜面培養基的中部,每個母種接15—20支試管,將接種好的試管放入恒溫培養箱(DNP-9162型)中進行避光培養,溫度控制在25—28℃。一般情況下,培養10—15 d菌絲即可長滿斜面。
1.4.2 配方
參照前人研究[9-14],牛糞(初步檢測未發現Pb、Cu、Zn、Cd等重金屬超標)和平菇栽培廢料(原平菇栽培配方為棉籽殼45%、玉米芯45%、過磷酸鈣1%、米糠7%,石灰2%)設置7個不同配比組合,每個配比設置5個重復,每個重復不少于7瓶;以雜木屑和麩皮(杏鮑菇的早期配方)搭配作為對照(表1)。

表1 栽培杏鮑菇培養基配方(質量比)Table 1 Formula of culturemedium for cultivating P.eryngii %
1.4.3 拌料與滅菌
按不同處理干料混合均勻,加水至培養料含水量達60%左右。裝料時將料裝至250 mL玻璃栽培瓶肩,然后用手按壓料的四周使其中間松四周緊,再在料中間打孔以利于菌絲快速生長,蓋上封口膜,套上橡膠圈,于126℃恒溫滅菌3 h。滅菌結束后冷卻至常溫,搬入接種間冷卻4—5 h至室溫,待接種。
1.4.4 接種
取預先活化好且活力強的杏鮑菇試管種,在超凈工作臺中用接種針進行接種,菌塊大小0.5 cm2,每瓶接5塊。接種后放置于室溫黑暗房間中培養25 d左右,直至菌絲長滿瓶。
1.4.5 栽培管理
杏鮑菇栽培過程中具體管理方法參見黃年來等[19]。
1.4.6 出菇管理
杏鮑菇菌絲長滿培養瓶后,移至出菇房,溫度保持在17℃左右,濕度調節至85%—90%。10 d后,調節溫度至12℃,形成5℃左右溫差刺激2—3 d,濕度維持不變,此時可見原基形成。待原基出現后,及時打開封口膜進行培養,調節溫度至18℃,濕度90%,并加強通風,保證出菇房氧氣充足。
采集成熟杏鮑菇商品子實體,觀察記錄不同配方子實體數據(包括菌蓋色澤、直徑,菌柄長度,每瓶成熟子實體鮮重,并計算出單個子實體鮮重)和生物學效率。試驗結果以平均值±標準差表示,用Duncan多重比較法進行差異顯著性檢驗。
單個子實體鮮重=每瓶成熟子實體鮮重/每瓶成熟子實體個數;生物學效率=子實體樣品干重/原料干重×100%。
從表2可以看出,杏鮑菇菌絲在不同配方的栽培料中均能生長,但不同配方中菌絲生長速度差異明顯。對照組菌絲生長速度最快、菌絲潔白(圖1);其次是配方5,菌絲潔白,菌絲長滿瓶需23 d;其他配方菌絲生長速度遠低于配方5,尤其是配方1和配方7的菌絲生長過于緩慢,菌絲密度、色澤、菌絲健壯程度較差;其余4個配方菌絲生長情況稍好,菌絲相對濃密、粗壯,色澤潔白。雖然對照組杏鮑菇菌絲生長最快,但菌絲特別纖弱和稀疏,因此不宜作為杏鮑菇栽培配方。配方2、配方3、配方4和配方6的杏鮑菇菌絲雖然可以在較短時間內長滿菌瓶,但菌絲長勢一般,因此也不適合作為以牛糞、平菇栽培廢料和麩皮栽培杏鮑菇的最佳配方。

表2 不同配方中杏鮑菇菌絲的生長情況Table 2 M ycelial grow th of P.eryngii in different formula

圖1 配方1、配方5和對照中杏鮑菇菌絲的生長情況Fig.1 M ycelial grow th of P.eryngii in formula 1,formula 5 and CK
菌絲繼續培養至40 d時,菌絲逐漸扭結形成原基,原基進一步分化形成子實體。從圖2和表3可知,從接種到原基形成,配方5所需時間最短,僅38 d(對照為41 d),且原基多、密集、較大;其他配方的原基較少,原基顆粒較小,明顯與配方5和對照有一定差異。從圖3和表3可以看出,配方5杏鮑菇子實體形態和生理指標與對照最為相似,其余配方形成的子實體明顯較差。可見,配方5的搭配與對照接近,原基和子實體生長較好,其他配方均存在一定不足。

圖2 杏鮑菇在不同配方中形成原基Fig.2 Primordia formation of P.eryngii in different formulae

表3 杏鮑菇原基和子實體特征Table 3 Characteristics of fruiting body and primodium of P.enyngii

圖3 不同配方中的杏鮑菇子實體形態Fig.3 M orphological characteristics of P.enyngii fruiting body in different formulae
從表4可以看出,配方1的杏鮑菇每瓶總產量、生物學效率最低;配方2和配方5的每瓶總產量高于其他配方,但略低于對照,配方5的生物學效率略高于對照。配方5的單個子實體鮮重在所有配方中最高,但其總產量低于對照,表明配方5采收的總菇數比對照少。配方5的生物學效率比對照和其他配方都高。總體而言,杏鮑菇產量、單個子實體鮮重和生物學效率均說明配方5與對照相近,是最佳配方。

表4 不同配方中的杏鮑菇生產特征Table4 Product characteristics of P.enyngii in different formulae
用牛糞、平菇栽培廢料搭配一定比例的麩皮作為栽培料用于栽培杏鮑菇在一定程度上是切實可行的,牛糞與平菇栽培廢料提供的營養基本可以滿足杏鮑菇的生長發育需要。試驗栽培料生產的杏鮑菇菌絲、原基和子實體特性及產量和雜木屑及麩皮(對照)栽培料差異不大。
試驗所得的杏鮑菇與市場購買的杏鮑菇經初步比較,在食用方面沒有顯著差異。新鮮杏鮑菇切片后,兩者氣味濃烈程度沒有差別;同樣方法做出的菜口感也沒有明顯區別。為了更好地評價利用牛糞、平菇栽培廢料與常規栽培料栽培的杏鮑菇品質差異,后續將從可溶性糖、蛋白質和常見礦質營養素等方面深入研究。
用牛糞、食用菌栽培廢料栽培杏鮑菇能有效利用廢棄資源,減少資源浪費。本試驗為開拓杏鮑菇生產原材料進行了有益的嘗試,試驗結果可為探究食用菌的栽培原料提供一定的借鑒。在棉籽殼、雜木屑資源比較匱乏,養殖業較為發達的地區,可以添加適當比例的牛糞用于替代棉籽殼、雜木屑等材料進行杏鮑菇栽培,緩減牛糞對環境造成的壓力,同時降低杏鮑菇栽培的原料成本,提高經濟效益。