復方海藻粥對便秘模型小鼠通便功能的作用研究

白旭，胡波，王尚儀，范雨萌，宋淑亮，梁浩，吉愛國，2，*

（1.山東大學（威海）海洋學院，山東威海264209；2.山東大學藥學院，山東濟南250012）

便秘是現代老人們生活中的常見問題[1-3]，隨著生活方式和工作方式的改變，便秘也越來越多地影響到中青年人的生活[4]。現代很多人往往容易忽視便秘，但是便秘對人的身體健康有著很大的影響和損害[5]，一方面便秘會導致人體內毒素積累，降低五臟功能，甚至可能導致其他疾病的發生[6]，另一方面毒素的長期積累會使機體內分泌系統功能異常，激素代謝失調，導致肝臟的負擔加重。

現在一些藥物雖然可以有效改善便秘[7-11]，但是都不適合長期使用，而且大部分藥物都存在不良反應。針對現狀，本研究經長期的技術與實踐探索，改變了以往通過單一飲食結構來調節便秘的方法，研究出一種能夠通過食療達到潤腸通便、改善便秘癥狀，同時可以長期食用的復方海藻粥。本研究主要依據藥食同源和食品類共同作用促進潤腸通便的原則[12-13]，并且充分考慮到復方海藻粥中組合食材芋頭、海帶、無花果、低聚果糖、大棗、牛磺酸[14-16]等的自身性質與組合作用。其中海帶具有消痰，利水的作用；芋頭具有通便，調節腸道蠕動功能，調節中氣和散結的功能；無花果味甘，性涼，歸肺、胃、大腸經，具有開胃，止瀉痢，治五痔，為緩和滋養潤腸藥；大棗，性甘，溫，歸脾、胃經，補中益氣，養血安神；低聚果糖是一種天然活性物質，可以防治腹瀉和便秘，在考慮海藻粥功能作用的同時還考慮到其口感。復方海藻粥貫徹的藥食同源的原則——以海帶為主要變量，將各種食材包括芋頭、海帶、無花果、低聚果糖、大棗、牛磺酸等一起熬制，不僅兼具每種食材的功效，同時還可以使食材互相調節，相互促進，而且將各種食材以粥的形式熬制，一方面有利于人體消化吸收，相較其他形式更容易發揮潤腸通便的效果，另一方面，相較于市面上其他治療便秘的藥品以及其他治療形式，復方海藻粥食用方便，更加適用于現在缺乏時間的中青年人。以粥的形式服用，在吃飯的同時起到治療便秘的作用，更容易讓人接受。總之經試驗驗證，復方海藻粥不僅食用方便，可以改善便秘情況，同時還提高了腸道蠕動功能[17]，在用于預防、輔助治療或治療便秘中具有良好的效果。本試驗不僅可以為海帶具有潤腸通便的功效提供理論支持，同時為海帶的綜合利用提供了新的思路。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

芋頭粉：江蘇振亞食品有限公司；海帶：榮成市福星海產有限公司；無花果：榮成市四季鮮生態有限公司；低聚果糖：江門市德昂生物科技有限公司；大棗：烏魯木齊新邊界貿易有限公司；牛磺酸：潛江永安藥業股份有限公司；麻仁丸：6 g/袋，太極集團重慶桐君閣藥廠有限公司，使用前配制成所需濃度的麻仁丸混懸液；鹽酸地芬諾酯：2.5 mg/片，長春長紅制藥有限公司，使用前配制成所需濃度的復方地芬諾酯混懸液；碳墨混懸液（墨汁，首粒黑便指示劑）：準確稱量100 g阿拉伯樹膠，溶解至400 mL 水中，待煮沸至溶液澄清透明后，再在溶液中加入50 g 活性碳粉并煮沸3 次，溶液冷卻后加水定容到500 mL，于4 ℃冰箱中保存，使用前混勻，加入等量蒸餾水，制得碳墨液（墨汁）待用[18-20]；清潔級SPF 級昆明種雄性小鼠90 只，體質量為 20 g～25 g。

1.2 主要儀器設備

BSA224S-CW 電子天平：德國賽多利斯集；秒表、手術剪、8 號灌胃針、5 cm 注射器：鄭州康佳醫療器械有限公司；R4 動物籠具：蘇州格勒試驗設備有限公司；DF-101S 水浴鍋：北京依諾泰儀器有限公司。

1.3 方法

1.3.1 粥的比例

1）低劑量實驗組的配比為芋頭60%，海帶15%，無花果15%，低聚果糖4%，大棗4%，牛磺酸2%。

2）中劑量實驗組的配比為芋頭55%，海帶20%，無花果15%，低聚果糖4%，大棗4%，牛磺酸2%。

3）高劑量實驗組的配比為芋頭50%，海帶25%，無花果15%，低聚果糖4%，大棗4%，牛磺酸2%。

1.3.2 粥的熬制

1）原料的預處理：將芋頭粉和海帶粉分別過篩，并按照一定的比例均勻混合。

2）浸提液的制備：將無花果和大棗切碎成顆粒狀，100 ℃水提30 min，過濾取提取液備用。

3）熬制：在鍋中倒入少量冷水，并將芋頭粉、海帶粉分次倒入，中間適量添水，邊攪拌邊加熱，直至成黏稠糊狀，再將水提取的濾液分多次加入，加熱攪拌20 min，待混合攪拌均勻后即成，得到復方海藻粥。

1.3.3 實驗分組

將90 只昆明雄性小鼠隨機分為便秘模型對照組，空白對照組，陽性對照組，高劑量實驗組，中劑量實驗組和低劑量實驗組6 組進行實驗。

1.3.4 復方地芬諾酯進行便秘模型誘導實驗

將復方地諾芬酯片配制成一定濃度的復方地諾芬酯混懸液，給與小鼠復方地芬諾酯片1.56 g/kg 灌胃進行便秘造模[21-27]，每天一次，連續3 d，期間正常飲食。

1.3.5 小鼠排便實驗

第3 天造模結束后，禁食不禁水，實驗中陽性對照組給予1.56 g/kg 麻仁丸混懸液灌喂，高、中、低實驗組均給與15.2 g/kg 的海藻粥灌喂，空白對照組和模型對照組用等量生理鹽水灌喂，灌喂30 min 后以0.2 mL 墨汁灌喂，觀察首粒黑便的排出時間，6 h 內每組小鼠的排便情況（大便粒數、大便濕重、大便干重、大便含水量），喂食7 d 并記錄。實驗中，小鼠均單籠飼養，正常飲食。計算公式：大便濕度/%=[大便濕質量（g）-大便干質量（g）]/大便濕質量（g）×100

1.3.6 小鼠小腸運動實驗

第7 天灌胃后，所有小鼠禁食不禁水24 h，第8 天灌喂結束后，每只小鼠灌喂1.0 mL 碳墨液，30 min 后乙醚處死，剖腹，小心剝離并剪取從幽門到回盲部的小腸腸管，放置于平板上，輕輕將小腸腸管拉成一條直線，測量直線的總長度為“小腸總長度”，從幽門到碳墨前端的距離為“墨汁推進距離”，然后用公式計算小腸的碳墨推進率。計算公式：小腸碳墨推進率/%=墨汁推進距離/小腸總長度×100。

1.3.7 統計學處理

2 結果與討論

2.1 復方海藻粥對小鼠糞便粒數、質量及含水量的影響

對小鼠進行灌喂不同配方的復方海藻粥，實驗結果見表1 和表2。

由表1 和表2 可知，模型對照組較空白對照組6 h內的糞便數量、糞便質量和糞便含水量明顯下降（p＜0.01），糞便粒數減少約31.37 %，糞便重量減少約25.58 %，含水率減少約14.34%，均符合便秘小鼠大便干結，排便困難的特點，說明復方地芬諾酯造模成功。實驗組與空白對照組和陽性對照組相比雖然6 h內糞便粒數、糞便質量、糞便含水量均略偏低，但是實驗組與模型對照組之間進行對比，在灌喂一定量的復方海藻粥之后，6h 內糞便粒數、糞便質量、糞便含水量均有增加（p＜0.05），且中、高劑量組有明顯上升（p＜0.01），且高劑量組的糞便粒數、質量以及含水率在灌喂復方海藻粥之后各指標的增加基本與陽性對照組一致，高劑量組的6 h 糞便含水率增加百分比為17.51%，與空白對照組16.49%基本一致，表明復方海藻粥可以顯著改善小鼠的排便情況，基本可以達到正常水平，且海帶的潤腸通便效果優于芋頭粉。

表1 復方海藻粥對小鼠糞便粒數、質量及含水量的影響Table 1 Effects of instant porridge on the number，weight and water content of stool in mice

表2 實驗組比模型組小鼠糞便粒數、質量及含水量的增加量Table 2 The increase in the number，weight and water content of stool in the experimental group compared with the model group

2.2 復方海藻粥對小鼠排便時間的影響

復方海藻粥對小鼠排便時間的影響、實驗組比模型組小鼠排便時間的減少量見表3 和表4。

通過表3 和表4 可知，模型對照組的首粒黑便時間較正常對照組明顯增加（p＜0.01），與便秘小鼠排便困難的特點符合，結合表1 中6 h 內的糞便數量、糞便質量和糞便含水量明顯下降的實驗結果說明復方地芬諾酯造模成功。實驗組較模型組首粒黑便時間明顯縮短，高、中、低劑量組均比模型對照組的時間短（p＜0.01），且隨著劑量的增加，首粒黑便時間減少，高劑量組排便時間較模型組時間縮短約28.56%，與陽性對照組30.23%基本一致，說明復方海藻粥中的海帶可以更有效改善小鼠的便秘情況。

表3 復方海藻粥對小鼠排便時間的影響Table 3 The effect of instant porridge on the time of defecation in mice

表4 實驗組比模型組小鼠排便時間的減少量Table 4 The reduction of defecation time in the experimental group compared with the model group

2.3 復方海藻粥對小鼠小腸推進率的影響

便秘的典型特征之一是腸胃蠕動功能受到影響減慢，故進行了小腸推進率實驗，即通過小腸推進率來證明復方海藻粥的腸道改善功能，實驗結果見表5。

表5 實驗組比模型組小腸推進率的增加量Table 5 The increase of intestinal propulsive rate in the experimental group compared with the model group

由表5 可知，與空白對照組相比，模型對照組的小腸推進率明顯降低（p＜0.01），說明復方地芬諾酯造模成功。和模型對照組相比，復方海藻粥高、中、低劑量組均可以明顯增加小腸推進率（p＜0.01），促進小鼠的小腸蠕動，高劑量組相比于中、低劑量組小腸推進率明顯偏高，高劑量組小腸推進率比模型對照組增加約32.27%，與空白對照組增加35.56%、陽性對照組增加33.07%基本一致，高劑量組復方海藻粥對便秘鼠的小腸蠕動功能改善效果明顯，說明海帶具有較好的潤腸通便功能。

3 結論與討論

本試驗采用地諾芬酯造成小鼠功能性便秘模型，研究復方海藻粥對便秘模型小鼠的便秘改善作用和潤腸通便作用。在使用地諾芬酯造模后，小鼠6 h 內排便粒數，排便質量，糞便含水量與空白對照組明顯減少，說明造模成功。在用不同配方的復方海藻粥灌喂小鼠后，小鼠的便秘功能得到明顯改善。6 h 內小鼠排便粒數高、中、低劑量組分別比模型對照組增加10.75%、22.58%、38.17%，空白對照組和陽性對照組6 h 內小鼠排便粒數分別為45.70 %和40.32 %，可以看出高劑量組的排便增加數已經基本與空白對照組和陽性對照組一致，高劑量組的糞便質量和糞便含水率分別達到25.00 %和17.51 %，與空白對照組34.38 %和16.49%基本一致。從6 h 內小鼠排便粒數、糞便質量和糞便含水率3 個指標來看高劑量組小鼠與模型對照組具有極顯著差異（p＜0.01），與空白對照組無顯著性差異，說明復方海藻粥可以改善便秘情況，且隨著海帶劑量的增加便秘情況的改善作用更加明顯。空白對照組和陽性對照組的首粒黑便時間分別比模型對照組縮短了41.87%和30.23%，高劑量組時間減少約28.56%，與陽性對照組基本一致，高劑量組首粒黑便時間與模型對照組有極顯著性差異（p＜0.01），與空白對照組無顯著性差異。同時，高、中、低劑量組與模型對照組相比小腸推進率有極顯著性差異的（p＜0.01），與空白對照組相比無顯著性差異，且高劑量組小腸推進率比模型對照組增加32.27%，與空白對照組和陽性對照組持平，綜合來看，復方海藻粥可以達到改善便秘，潤腸通便的作用，且高劑量組效果最佳。

綜合實驗結果可以說明，復方地芬諾酯片可以成功構建小鼠便秘模型。服用研制的復方海藻粥可以有效增加排便質量，提高糞便含水量，減少首粒黑便排出時間，增加小腸推進率，因此具有明顯的潤腸通便的作用，且從高、中、低3 個劑量組結果對比來看，高劑量組對小腸蠕動功能改善效果明顯，說明海帶具有良好的通便作用，復方海藻粥組合中其他食材芋頭、無花果、低聚果糖、大棗、牛磺酸各食材均有潤腸通便的作用，幾種食材相互組合與海帶協同發揮作用。雖然與陽性對照相比，潤腸通便效果稍差，但是作為無不良反應的食物使用，且可以長期食用，因此仍具有良好的應用和開發前景。