食源性致病菌的檢驗檢測

在世界范圍食源性疾病問題都普遍存在，這其中很大程度上都與食源性致病菌有關系。因此，針對食源性致病菌的檢驗檢測對于提高人們的健康水平有著至關重要的作用。而現代檢測技術在不斷發展的過程也形成了一套相對較為完整的食源性致病菌的檢驗檢測體系。本文基于此開展研究，對食源性致病菌最新檢測技術及其研究進展進行簡述。

傳統的細菌培養技術

在我國國標中，傳統的細菌培養技術仍然是占有重要地位。其檢驗檢測的原理主要是對樣品中的微生物進行增殖，然后利用劃線分離，實施選擇性培養，進而觀察菌落特征，實現檢測目標。隨著生物技術的不斷發展，靈敏度高、特異性強顯色培養基投入到檢測過程，有效提高了篩選效率。在后續的生化鑒定過程中，全自動微生物鑒定分析系統的使用可以簡化試驗步驟、縮短試驗周期，并且能更高效地得出試驗結果。但是，該方法的弊端就在于操作繁瑣，檢測周期長，在一些應急情況下無法滿足檢測要求。

免疫學技術

ELISA技術。ELISA技術是基于免疫學抗原-抗體特異性結合的檢測方法。對于沙門氏菌檢測有著較好的檢測范圍和靈敏度。使用該方法進行沙門氏菌的檢測也需要對于食品中的微生物進行增殖。很多學者利用該方法針對多種細菌進行檢測，發現WLISA技術可以在24小時內實現對多種食源性致病菌。例如，應用ELISA原理生產出的mini- Vidas全自動免疫分析儀可在2天內完成對沙門氏菌、大腸埃希氏菌、單核細胞增生李斯特菌和空腸彎曲菌等細菌的篩選。

免疫熒光標記。該方法屬于食源性致病菌檢測中的一類新型免疫學檢測法，原理上主要是基于特異性抗體敏化的免疫色譜卡片。在具體操作中，僅需要將實現進行增殖后的樣品滴加到免疫色譜卡上，就能夠用肉眼直接觀察結果。該方法在操作上十分便捷，無需其他設備輔助，具有較好的適應性。雖然同ELISA法一樣需要進行樣品的增殖，但增殖后的操作時間大概僅有10分鐘。

PCR技術

PCR法是基于核酸的一類檢測方法，任何一類生物都有特異性的核酸片段，它們通過含有探針的補體核酸片段來進行檢測，通常探針都是含有放射性同位素。該方法在沙門氏菌的檢測中優點在于簡便、快速、敏感性高和特異性強。近年來，用PCR技術在食源性致病菌領域發展很好，且具體應用方法也出現了多元化發展，包括實時熒光定量PCR、逆轉錄PCR和電化學發光PCR等，并成為一些食源性致病菌的行業檢測標準。

代謝學檢測技術

電阻抗技術。電阻抗法測定法是新型的生物學檢測技術，目前在食品微生物檢測的領域也有了較好的應用。其原理是細菌在繁殖的過程中，其代謝過程和代謝產物會導致培養基的阻抗發生變化，通過對這種變化的檢測就能夠實現對于相關微生物的判斷。目前，電阻抗法已被AOAC接收，適用于檢測食品中細菌總數、大腸桿菌和沙門氏菌等。

ATP生物發光法。ATP是細胞內必需的一種代謝產物，使用熒光蟲素和熒光蟲素酶可使之釋放出能量，產生磷光。而在特定環境下，細菌細胞內的ATP含量是相對固定的。因此，通過對該磷光的強度檢測實現對于細菌菌落總數的判定。由于該方法主要是對菌落總數進行檢測，因此通常用于反映食品受污染的嚴重程度，具有簡便、省時、快速等特點，還可以被用于大量食品樣本中菌污染情況檢測和食品現場快速檢測等。但是，若樣品中含有大量非細胞性ATP，則檢測結果可受干擾。

綜上，不同的檢測技術都有不同的優勢和劣勢。在食源性致病菌的檢測中，要根據檢測需要、食品性質，以及已有的檢測條件科學進行選擇。但是，隨著各項檢測技術的不斷進步，未來不同技術之間的聯合檢測將會得到更好的發展，這將極大的提高檢測范圍和靈敏度，從而為防控食源性疾病作出貢獻。

作者簡介：

杭婧（1987-），女，漢，江蘇淮安人，本科，檢驗師（中級），食品藥品微生物。