黃石結腸炎散的制備與臨床應用

管毓向 安艷蘇

（1 云南省曲靖市婦幼保健院 云南 曲靖 655000）

（2 云南省曲靖市食品藥品檢驗檢測中心 云南 曲靖 655000）

黃石結腸炎散（以下簡稱“本品”）系云南省曲靖市婦幼保健院與我市國立中醫醫院聯合研制的純中藥制劑，由川黃連，石榴皮等7味中藥組成。具有清熱燥濕、理氣止痛、收斂止泄之功效。臨床用于治療各類結腸炎取得滿意療效。現將其制法、質量標準、臨床應用報道如下：

1.實驗材料

1.1 實驗儀器

美國安捷倫1260型高效液相色譜儀（包括G1311C系列四元泵，G1314FVWD檢測器，G1316A柱溫箱，G1329B自動進樣器）；KQ-300UDB型雙頻數控超聲清洗器（昆山）；METTLE MS205DU電子天平（上海）。

1.2 材料

硅膠G（山東XX化工有限公司，批號：180425），硅膠GF25（4山東XX化工有限公司，批號：180406）。

1.3 對照品、對照藥材及試劑

鹽酸小檗堿對照品（批號：110713-201212，中國食品藥品檢定研究院）；防風對照藥材（批號：947-201209，中國食品藥品檢定研究院）；乙腈為色譜純；水為重蒸餾水，其余試劑為分析純。

1.4 樣品

“本品”樣品由我市國立中醫醫院生產（批號：20180701，20180902，20181210，20190102，20190218），固腸止瀉丸（藥店購買，西安XX公司）。

2.處方及制法

2.1 處方

川黃連30g，延胡索（醋炙）30g，木香30g，防風10g，石榴皮10g，罌粟殼（蜜炙）10g，椿根皮10g。

2.2 制法

取川黃連、石榴皮等七味中藥材進行凈制，延胡索、罌粟殼按規定方法進行炮制，然后加工成細粉，分裝，每袋6g。

3.質量標準

3.1 性狀

本品應為深黃色至棕黃色的粉末，味苦、澀，具木香特有氣味。

3.2 鑒別

鑒別：（1）取“本品”4g，置具塞錐形瓶中，加丙酮20ml，振搖15分鐘，濾過，濾液水浴蒸干，殘渣加乙醇2ml使溶解，作為“本品”溶液。另取防風對照藥材2g，同法制成對照藥材溶液。照TLC[1]實驗，取“本品”溶液和對照藥材溶液，分別點于同一硅膠GF254薄層板上，點樣量各5μl，展開劑為氯仿-甲醇（8:2），展開，置254nm紫外光下檢視。“本品”色譜中，在與防風色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。（鑒別防風的存在）

（2）取“本品”0.2g，置具塞錐形瓶中，加純化水30ml，超聲處理20分鐘，過濾，濾液用氨試液調節pH值約9.5，加氯仿20ml，振搖提取，提取物加鹽酸-乙醇（1:100）溶液2ml使溶解，作為“本品”溶液。另取鹽酸小檗堿對照品5mg，加甲醇25ml使溶解，作為對照品溶液。照TLC[1]實驗，分別點于同一硅膠G薄層板上，點樣量各5μl，展開劑為正丁醇-冰醋酸-純化水（10:2:2），展開，置365nm紫外光下檢視。“本品”色譜中，在與鹽酸小檗堿色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。（鑒別川黃連的存在）

3.3 檢查

“本品”應符合中國藥典2015年版四部0115[2]之規定。

3.4 含量測定

采用HPLC[3]測定。

3.4.1 色譜條件 色譜柱：美國安捷倫C18色譜反相柱（4.6mm×200mm，3μm）；流動相：乙腈-0.03mol/LKH2PO3溶液（55:45）；流速：1.0ml/min；檢測波長：265nm。

3.4.2 對照品溶液的制備 取鹽酸小檗堿對照品適量，用水制成含鹽酸小檗堿8μg/ml的溶液，經0.45μm微孔濾膜過濾，即得。

圖1 高效液相色譜圖（A-鹽酸小檗堿對照品、B-樣品、C-陰性樣品）

3.4.3 “本品”溶液的制備 取“本品”細粉約0.2g，置200ml燒杯中，加煮沸的純化水適量，攪拌使鹽酸小檗堿溶解，放冷，轉移至200ml容量瓶中，加純化水稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續濾液，經0.45μm微孔濾膜過濾，即得。

3.4.4 陰性樣品溶液的制備 取去川黃連的“本品”處方，按“本品”制法制備陰性樣品，按“3.4.3”項下制備待測定溶液，即得。

3.4.5 測定方法 按上述色譜條件，進樣量10μl，以峰面積按外標法計算，即得。

3.4.6 系統適用性實驗與專屬性考察 在篩選的色譜條件下，取“3.4.4”項下溶液、“3.4.2”項下溶液與“本品”溶液各10μl進樣，記錄色譜圖，陰性樣品溶液在與鹽酸小檗堿對照品峰處未見色譜峰出現，說明該方法專屬性良好。高效液相色譜圖見圖1。

3.4.7 線性關系考察 精密吸取“3.4.2”項下的溶液5μl，10μl，15μl，20μl，25μl，分別測定色譜峰面積。以鹽酸小檗堿進樣量（W，μg）為橫坐標、峰面積（A）為縱坐標進行線性回歸，回歸方程為A=1.37×103W+37.44，r=0.9996。鹽酸小檗堿濃度在0.04～0.2mg·ml-1之間線性關系良好。結果見表1。

3.4.8 進樣精密度實驗 精密吸取“3.4.2”項下的溶液，連續進樣6次，其峰面積的RSD為0.72%（n=6），說明進樣精密度良好。

3.4.9 重復性實驗 取“本品”，研成細粉，取約0.2g，共5份，精密稱定，按“3.4.12”項下的方法測定，其結果的RSD為0.94%，說明重復性良好。

3.4.10 樣品溶液穩定性實驗 取樣品溶液，考察其穩定性，實驗結果表明樣品溶液在制備后8h內測定穩定，能滿足測定需要。

表1 鹽酸小檗堿線性關系考察結果

3.4.11 回收率實驗 取“本品”按“3.4.3”項下制備樣品溶液，按“3.4.5”項下方法測定鹽酸小檗堿含量為7.98mg·g-1（批號201860701），約0.1g，精密稱定，精密加入鹽酸小檗堿對照品溶液（50μg·mL-1）2ml，按“3.4.2與3.4.3”項下的方法分別制備對照品溶液與樣品溶液，按“3.4.5”項下方法測定，計算，平均回收率為100.21%，RSD=0.49%（n=5）。結果見表2。

表2 加標回收率實驗結果

3.4.12 本品中鹽酸小檗堿的含量測定 取5個批號的“本品”，按“3.4.3”項下制備樣品溶液，按“3.4.5”項下制備對照品溶液，進樣量各10μl，以峰面積按外標法定量，結果見表3.

表3 樣品測定結果（n=3）

4.臨床應用

選取臨床上確診的結腸炎患者298例，隨機分為治療組、對照組，其中治療組200例，用“本品”作治療，對照組98例，用固腸止瀉丸作對照治療。

4.1 給藥方法治療組“本品”劑量每次6克，每日2次，飯后口服。對照組固腸止瀉丸劑量每次4克，每日3次，口服。

4.2 療效標準用藥一周大便次數明顯減少、腹痛、腹瀉及其它伴隨癥狀及體征消失或明顯減輕為有效，以上癥狀無明顯改善或加重為無效。

4.3 結果見表4。治療組總有效率為97.5%，對照組總有效率90.8%，經統計學檢驗，χ2=5.17，療效治療組優于對照組，差異有顯著性（P＜0.05）。

表4 黃石結腸炎散治療組與固腸止瀉丸對照組療效比較

5.結論

“本品”合理運用中醫標本兼治、治標固本、固腸止瀉之理論，具有清熱燥濕、理氣止痛、收斂止泄之功效。臨床用于治療各種結腸炎（包括慢性非特異性結腸炎、過敏性結腸炎、息肉性結腸炎）。“本品”制法簡單，質量容易控制、療效肯定，在結腸炎治療中效果滿意。