雙唑草腈原藥氣相色譜分析方法研究

萬宏劍，曹慶亮，王洪雷

（江蘇省農藥研究所股份有限公司，南京 210046）

雙唑草腈（pyraclonil）是由德國拜耳公司發現的雙吡唑類除草劑，屬原卟林原氧化酶（PPO）抑制劑，對稗草、螢藺、牛毛氈、雨久花、陌上菜、野慈姑等雜草均具有較好的防效，而且能夠有效防除對磺酰脲類除草劑產生抗性的雜草。其開發代號為AEB 172391，化學名稱為1-(3-氯-4,5,6,7-四氫吡唑并[1,5-a]吡啶-2-基)-5-[甲基(丙-2-炔基)氨基]吡唑-4-腈，分子式為C15H15ClN6，相對分子質量為314.77，CAS登錄號為［158353-15-2］，結構式見圖1[1-4]。

圖1 雙唑草腈的結構式

本研究采用氣相色譜法對雙唑草腈原藥進行定量分析，操作方便、快速、準確，雜質分離度較好，可為企業生產過程中的質量控制和檢驗檢測提供參考。

1 實驗部分

1.1 儀器與試劑

氣相色譜：Agilent GC 7890B配7693 Auto Sampler自動進樣器，帶氫火焰離子化檢測器（FID），Agilent OpenLAB色譜處理工作軟件，色譜柱：Agilent DB-5毛細管柱（30 m×0.25 mm，0.25 μm）。

99.0%雙唑草腈標準品，和光純藥工業株式會社；97%雙唑草腈原藥，江蘇南方農藥研究中心；三氯甲烷（分析純）。內標物：癸二酸二辛酯（無干擾分析雜質）。內標物溶液的配制：稱取癸二酸二辛酯1.25 g于250 mL容量瓶中，加入200 mL三氯甲烷超聲溶解后，冷卻至室溫，定容至刻度，搖勻后備用。

1.2 氣相色譜操作條件

色譜操作條件：色譜柱溫度250℃，進樣器溫度280℃，檢測器溫度280℃；載氣流速：1.8 mL/min；氫氣流速：30 mL/min；空氣流速：300 mL/min；分流比：39∶1；進樣量：1 μL；保留時間：雙唑草腈約為6.2 min，內標物約為8.1 min。上述色譜條件是典型色譜條件，可根據操作條件做適當調整，以獲得最佳分離效果。雙唑草腈標樣和試樣色譜圖見圖2和圖3。

圖2 雙唑草腈標樣氣相色譜圖

圖3 雙唑草腈試樣氣相色譜圖

1.3 測定步驟

1.3.1 標準溶液的配制

稱取雙唑草腈標準品0.06 g（精確至0.000 2 g），置于25 mL容量瓶中，用10 mL移液管準確加入10 mL內標物溶液，超聲溶解并冷卻后，用三氯甲烷定容至刻度，搖勻過濾后備用。

1.3.2 試樣溶液的配制

稱取試樣0.06 g（精確至0.000 2 g），置于25 mL容量瓶中，加入10 mL內標物溶液，超聲溶解并冷卻后，用三氯甲烷定容至刻度，搖勻過濾后備用。

1.3.3 測定

在上述測定條件下，待儀器穩定后，連續注入數針標樣溶液，直至相鄰2針雙唑草腈標樣的峰面積相對變化小于1.0%。按照標樣溶液、試樣溶液、試樣溶液、標樣溶液的順序進行測定。

1.3.4 計算

將測量的兩針試樣溶液以及試樣前后兩針標樣溶液中的雙唑草腈的峰面積與內標物的峰面積比進行平均，雙唑草腈的質量分數w（%）按下式計算。

式中：A1為標樣溶液中雙唑草腈與內標物峰面積比的平均值；A2為試樣溶液中雙唑草腈與內標物峰面積比的平均值；m1為標樣的質量，g；m2為試樣的質量，g；P為標樣中雙唑草腈的質量分數，%。

2 結果與分析

2.1 內標物的選擇

為了快速準確測定雙唑草腈的質量分數，需要選擇合適的內標物。選用癸二酸二丁酯、磷酸三苯酯、癸二酸二辛酯等多種內標物進行試驗。結果表明，癸二酸二丁酯、磷酸三苯酯出峰在試樣前，干擾物較多；癸二酸二辛酯出峰在試樣后，與各組分雜質干擾少，分離效果較好，峰形對稱且重復性好。故采用癸二酸二辛酯為內標物。

2.2 分析方法的線性相關性

分別稱取雙唑草腈標準品0.015 41、0.030 22、0.060 56、0.091 28、0.123 52 g于25 mL容量瓶中，用移液管準確加入10 mL內標物溶液，超聲溶解并冷卻后，加入三氯甲烷定容至刻度，搖勻過濾后進樣，在上述氣相色譜操作條件下進行測定。分別以雙唑草腈與內標物的質量比為橫坐標，雙唑草腈與內標物的峰面積比為縱坐標繪制線性關系圖，得線性回歸方程y=0.756 3 x＋0.003 8，R=0.999 8，見圖4。

圖4 雙唑草腈線性關系圖

2.3 方法的精密度測定

分別稱取6份雙唑草腈試樣于25 mL容量瓶中，在上述氣相色譜操作條件下進行測定，結果見表1。測得雙唑草腈標準偏差為0.33，變異系數為0.34%。

2.4 方法的準確度測定

分別稱取5份雙唑草腈試樣于25 mL容量瓶中，分別加入不同質量的雙唑草腈標樣，并加入10 mL內標物溶液，超聲溶解并冷卻后，加入三氯甲烷定容至刻度，搖勻過濾后進樣，在上述氣相色譜操作條件下進行測定，測得平均回收率為100.20%，見表2。

表1 分析方法的精密度測定結果

表2 分析方法的準確度測定結果

3 結論

本文以三氯甲烷為溶劑，癸二酸二辛酯為內標物，使用毛細管色譜柱和氫火焰離子化檢測器氣相色譜法測定雙唑草腈的質量分數。本定量檢測方法的線性關系、精密度良好，準確度高，操作簡便快速，是一種較為實用的分析方法，可以滿足日常產品檢驗的需要。