22.4%螺蟲乙酯·氯噻啉懸浮劑的高效液相色譜分析

杜 輝，陸雪芳，朱艷梅

（南通江山農藥化工股份有限公司，江蘇南通 226017）

螺蟲乙酯是拜耳公司研發的一種季酮酸類殺蟲殺螨劑，殺蟲譜廣、持效期長[1]。氯噻啉是南通江山農藥化工股份有限公司研發的、具有自主知識產權的一種用于防治蚜蟲、飛虱等害蟲的新煙堿類殺蟲劑，具有強內吸性、不受溫度高低限制、無抗性、低毒廣譜、成本低等優勢。螺蟲乙酯與氯噻啉復配懸浮劑產品，由兩種不同作用機制的有效成分組成，具有明顯的協同增效作用，防治效果優于單劑單獨使用，同時減少了農藥使用量，可降低農藥在農作物上的殘留，減輕對環境的污染，延緩病蟲害抗藥性的產生[2]。螺蟲乙酯、氯噻啉單劑或與其他藥劑復配制劑的分析方法已有報道[1，3-4]，但螺蟲乙酯與氯噻啉復配制劑的兩種有效成分在同一色譜條件下進行同柱分析的方法尚未見公開報道。

筆者采用C18反相色譜柱和紫外可調波長檢測器檢測復配制劑中的螺蟲乙酯和氯噻啉，探討這兩種有效成分在同一色譜條件下進行同柱分析的方法。

1 實驗部分

1.1 儀器與試劑

Agilent 1260高效液相色譜儀（配有紫外檢測器、自動進樣器及色譜工作站），美國安捷倫公司；Sartorius BP 211D十萬分之一電子天平；北京歷元UPW-30S超純水器；過濾器（濾膜孔徑0.45 μm）；乙腈（色譜純），美國天地公司；超純水（電阻率：25℃，18.2 MΩ·cm）；螺蟲乙酯標準品（質量分數98.0%），沈陽化工研究院；氯噻啉標準品（質量分數98.0%）、22.4%螺蟲乙酯·氯噻啉懸浮劑，南通江山農藥化工股份有限公司。

1.2 實驗方法

1.2.1 色譜操作條件

液相色譜柱：Agilent Zorbax Eclipse C18；不銹鋼柱（4.6 mm×250 mm，5 μm）；柱溫：室溫；檢測波長：254 nm；流動相采用梯度洗脫（表1），進樣體積：5 μL；氯噻啉保留時間約為4.0 min，螺蟲乙酯保留時間約為9.3 min。

表1 梯度洗脫參數

螺蟲乙酯和氯噻啉標樣和試樣的典型液相色譜圖見圖1和圖2。

圖1 標樣中螺蟲乙酯和氯噻啉液相色譜圖

圖2 22.4%螺蟲乙酯·氯噻啉懸浮劑液相色譜圖

1.2.2 測定步驟

（1）標準溶液配制。稱取螺蟲乙酯標準品約0.05 g（精確至0.000 02 g）于100 mL容量瓶中，同時稱取氯噻啉標樣約0.015 g（精確至0.000 02 g）于此瓶中，用流動相稀釋至刻度，超聲溶解，冷卻至室溫，搖勻備用。

（2）試樣溶液的配制。稱取約含螺蟲乙酯0.05g的22.4%螺蟲乙酯·氯噻啉懸浮劑試樣（精確至0.000 02 g）于100 mL容量瓶中，用流動相稀釋至刻度，超聲溶解，搖勻備用。

（3）測定。在上述操作條件下，待分析條件滿足后，按照標樣溶液、試樣溶液、試樣溶液、標樣溶液的順序進行測定。

（4）結果與計算。螺蟲乙酯（氯噻啉）的質量分數w（%）按下列公式計算。

式中：A1為標樣溶液中螺蟲乙酯（或氯噻啉）峰面積的平均值，mAU；A2為試樣溶液中螺蟲乙酯（或氯噻啉）峰面積的平均值，mAU；m1為螺蟲乙酯（或氯噻啉）標樣的質量，g；m2為試樣的質量，g；P為標樣中螺蟲乙酯（或氯噻啉）的質量分數，%。

2 結果與分析

2.1 溶劑和流動相的選擇

根據螺蟲乙酯和氯噻啉的性質，螺蟲乙酯和氯噻啉在乙腈中溶解性較好且比較穩定。筆者測試了不同比例的流動相（乙腈∶水），當乙腈比例增加時，氯噻啉出峰比較早，雜質得不到有效分開；而采用梯度洗脫，試樣中的有效成分和雜質既得到有效分離，又能保證兩個有效成分的保留時間比較適中。

2.2 檢驗波長的選擇

通過Agilent 1260高效液相色譜儀的光譜數據采集功能，對配成一定濃度的螺蟲乙酯和氯噻啉溶液進行紫外波長掃描，發現在254 nm處，氯噻啉的靈敏度比較高，螺蟲乙酯也有一定的吸收，且產品中各雜質在該波長時不影響產品的測定，故選擇254 nm作為本方法的最適檢測波長。

2.3 樣品前處理

稱取一定量的試樣，單獨用乙腈或水溶解，會出現不溶或有一定量渾濁的現象；而用流動相溶解試樣，樣品能溶解，但不透明，用0.45 μm濾膜過濾試液澄清后進樣。

2.4 分析方法的線性相關性測定

依據上述液譜條件，按照螺蟲乙酯和氯噻啉有效成分含量配成5個不同濃度的標準溶液，在前述操作條件下進樣，得出5個相應的峰面積（表2）。以質量濃度為橫坐標，峰面積為縱坐標分別作螺蟲乙酯和氯噻啉的線性關系圖（圖3和圖4）。螺蟲乙酯和氯噻啉線性回歸方程分別為y=3 531.1 x＋38.802和y=23324x-942.94；相關系數分別為0.9995和0.9994。

表2 分析方法的線性相關性測定結果

圖3 螺蟲乙酯線性關系圖

圖4 氯噻啉線性關系圖

2.5 方法的精密度測定

稱取同一個22.4%螺蟲乙酯和氯噻啉試樣，在上述條件下進行5次平均測定樣分析，結果見表3，螺蟲乙酯和氯噻啉的標準偏差分別為0.059和0.047，變異系數分別為0.35%和0.83%。

表3 精密度測定結果

2.6 方法的準確度測定

準確稱取5個22.4%螺蟲乙酯·氯噻啉懸浮劑試樣，加入一定量的螺蟲乙酯和氯噻啉標準品，按上述處理辦法和相同的操作條件進行測定，測得螺蟲乙酯和氯噻啉的平均回收率分別為99.72%和99.59%（表4）。

表4 準確度測定結果

3 結論

結果表明，本方法在保證良好分離度的前提下，線性關系良好，精密度和準確度高，一根柱子能夠同時測定試樣中兩種有效成分，不僅減少了流動相試劑消耗，而且為日常檢測節省了時間，提高了工作效率。