基于紫外分光光度法測定乳制品中三聚氰胺殘留分析

摘?要：本文主要研究當前基于紫外分光光度法測定乳制品中三聚氰胺殘留相關問題。文章從檢測材料和方法入手，分別對顯色劑濃度、顯色時間、顯示溫度等相關影響因素進行控制。通過實踐測定最大吸收波長、最佳顯色試劑、最適宜的顯色時間以及溫度，以期促進乳制品中三聚氰胺殘留檢測研究的深入發展。

關鍵詞：紫外分光光度法;乳制品檢測;三聚氰胺殘留

一、 檢測材料和方法

（一）三聚氰胺及檢測概述

圖1所示為三聚氰胺的分子結構式，三聚氰胺簡稱為三胺或密胺，作為一種三嗪類含氮雜環有機化合物廣泛地應用于木材、塑料、涂料、造紙等輕工業的生產領域。在常溫常壓條件下，三聚氰胺為純白色的單斜棱晶體，無味，能夠溶于熱水、甲醇、甲醛、乙酸等化學試劑，不溶于乙醚和苯等化學試劑。但是在食品和飼料工藝生產的過程中，三聚氰胺被一些不法分子用作食品添加劑針對蛋白質含量檢測，在乳制品中添加三聚氰胺能夠提升蛋白質的含量。三聚氰胺毒奶粉事件的發生沖擊了整個國內乳制品行業的誠信度，通過毒理學研究發現，動物長期攝入三聚氰胺會損害泌尿系統，導致膀胱和腎結石的問題，嚴重時甚至會誘發膀胱癌。因此針對乳制品添加三聚氰胺的違法操作，必須要通過科學有效的手段切實加大三聚氰胺的檢測力度，真正保障食品安全。當前在對食品中的三聚氰胺進行檢測的過程中常見的方法主要有以下幾種，分別為高效液相色譜法、高效液相色譜-質譜法、毛細管電泳法等以及試劑盒檢測法等技術，在檢測結果方面具有很高的檢測精度，檢測限制較低，運行方法也比較穩定。但是上述幾種檢測技術在實際操作的過程中檢測儀器較為昂貴，由于操作煩瑣并且樣品前處理較為復雜，因此很難將這幾種檢測方法進行推廣和普及。針對三聚氰胺的分子結構特點，本文研究如何采用茜素紅與三聚氰胺進行反應，借助紫外分光光度法對反應物的吸光度值進行測定的原理，檢測乳制品中是否具有三聚氰胺的殘留。

（二）檢測過程

在進行實驗檢測過程當中主要應用的材料包括三聚氰胺、乙腈、茜素紅以及試驗用奶粉。奶粉是從附近超市中購買的上架產品，實驗過程中所使用的水均為純水。除此之外，實驗器材為美國生產的25UV型紫外可見分光光度計和北京生產的電子分析天平。在進行奶粉檢測之前，首先對實驗溶液進行配制，實驗人員通過天平精確的稱取了一定質量的茜素紅粉末并將其溶于純水中，根據實驗需求配置了不同百分比濃度的茜素紅溶液。之后對三聚氰胺溶液進行配制，稱取了0.1g的三聚氰胺標準品溶于20mL的熱水之中進行實驗備用。針對受試樣品的奶粉也需要進行預處理，將1mL的奶粉與25μg的三聚氰胺的標準品相混合，之后溶于25mL的熱水內。等到溶液完全冷卻之后添加75mL的乙腈，在室溫條件下放置30min做實驗備用。等到樣品溶液中的蛋白得到充分沉淀之后對沉淀進行去除。最后對其進行震蕩提取十分鐘并將上清液作為測試樣品。

在進行最佳顯色劑濃度測試時，將茜素紅溶液調合成0.001%、0.002%、0.004%、0.008%、0.016%和0.032%等不同濃度進行實驗測試，分別在室溫反應下放置10min，利用25UV型紫外可見分光光度計進行測試。實驗時以純水作為對照，在最佳吸收波長處對吸光度值進行測定。而針對最佳顯色時間和溫度的選擇與顯色劑濃度選擇實驗相符。分別取5mL樣品與最佳濃度的茜素紅溶液進行混合反應，在控制室溫的條件下分別放置10min、20min、30min等不同時長，并以純水作為對照測定吸光度值從而確定最佳顯色時間。另外取5mL樣品于最佳濃度的茜素紅溶液進行混合處理，并在相同的反應時間內調整不同的溫度進行吸光度值測試，最后獲得最佳的顯色溫度。

二、 檢測結果與分析

圖2所示為不同濃度茜素紅溶液對絡合物吸光度的影響。在相同的室溫和反應時長條件下，于335nm波長下對反應物的吸光度值進行測試。當茜素紅溶液濃度小于0.008%時，茜素紅溶液濃度越大絡合物的吸光度越大，而當茜素紅溶液濃度大于0.008%時，絡合物的吸光度逐漸保持穩定，即使茜素紅溶液濃度繼續提升也基本不再發生變化。通過實驗發現茜素紅溶液的濃度對于檢測實驗的測定結果有著比較重要的影響，為了切實提升三聚氰胺檢測的質量和效率，應該盡可能采用0.08%的茜素紅溶液作為檢測用顯色劑。

針對顯色時間和顯色溫度的實驗與測定茜素紅溶液最佳濃度實驗測試方法相同。在335nm波長下控制相同的室溫和茜素紅溶液濃度從而分析顯色時間對于絡合物吸光度的影響。實驗發現顯色時間對于反應絡合物的吸光度并沒有產生明顯的影響，為了保證實驗的準確性和快捷性，因此在實際檢測的過程當中推薦最佳的顯色時間為10min。同理，在固定335nm波長下使0.008%的茜素紅溶液與實驗樣品在不同的顯色溫度下進行反應，并且將反應時間控制在10min。通過實驗檢測發現，調整顯色溫度之后，反應絡合物的吸光度沒有明顯的變化，因此基本可以判定不同顯色溫度對于反應絡合物的吸光度沒有明顯影響，實驗時為了方便起見可以將25℃或室溫作為實際檢測的顯色溫度。

三、 小結

綜上所述，通過實驗檢測發現為了切實提升乳制品中三聚氰胺檢測質量和效率，需要對顯色劑、顯色時間等相關因素進行科學控制，其中利用紫外分光光度法進行檢測時最佳的檢測條件是茜素紅溶液濃度控制在0.008%，溫度控制在25℃，時間控制在10min內，通過紫外分光光度法對乳制品進行檢測能夠有效提高檢測效率，具有操作便捷簡單、檢測精度高的應用優勢。

參考文獻：

[1]曾維才，張曾，高鴻，等.紫外分光光度法快速檢測乳制品中三聚氰胺殘留的研究[J].食品與發酵科技，2011，47（2）：103-106.

[2]宋旭.乳制品中三聚氰胺快速檢測方法的研究[D].上海：上海師范大學，2012.

作者簡介：楊陽，國家輕工業食品質量監督檢測南京站。