HPLC法測定柴連口服液中鹽酸麻黃堿的含量

鄭巧云

摘 ?要：本文采用高校液相測定了柴連口服液中鹽酸麻黃堿的含量，固定相為：安捷倫Cl8（4.6mm×250mm，5μm），甲醇-0.092%磷酸溶液（含0.04%三乙胺和0.02%二正丁胺）（1.5∶98.5）為流動相，檢測波長為210nm，流速1.0mL·min-1，柱溫：30℃。鹽酸麻黃堿在10～160μg·mL-1范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。鹽酸麻黃堿的平均回收率為99.1%;此方法簡便、準(zhǔn)確、重現(xiàn)性好，可用于柴連口服液中鹽酸麻黃堿的含量測定。

關(guān)鍵詞：柴連口服液;鹽酸麻黃堿;含量

柴連口服液具有解表宣肺，化濕和中的功效，由麻黃、柴胡、蔗糖、阿司帕坦、聚山梨酯80、廣藿香、肉桂、連翹、桔梗組成。柴連口服液用于感冒屬風(fēng)寒、風(fēng)寒挾濕證者。《本草經(jīng)疏》記載：“表虛自汗，陰虛盜汗;肺虛有熱，多痰咳嗽以致鼻塞;瘡疤熱甚，不因寒邪所郁而自倒靨;虛人傷風(fēng)，氣虛發(fā)喘;陰虛火炎，以致眩暈頭痛;南方中風(fēng)癱瘓，及平日陽虛腠理不密之人皆禁用。”麻黃含有豐富的生物堿，是提取麻黃堿的主要資源。麻黃已有兩千多年的藥用歷史，用于傷風(fēng)感冒、咳嗽氣喘、風(fēng)濕痹痛及陰疽、咳痰等病癥。麻黃及麻黃堿也用于減肥，但對人的身體有極大的害處，甚至致人于死[1]。本文采用高校液相對柴連口服液中鹽酸麻黃堿含量方法進(jìn)行研究。

1 儀器與試藥

萊伯泰科LC600高效液相色譜儀（北京萊伯泰科儀器股份有限公司）、梅特勒ME204E分析天平（上海楚柏實驗室設(shè)備有限公司）、C18保護(hù)柱芯（天津琛航科苑科技發(fā)展有限公司）、優(yōu)普杜伯特UP-DBT-II實驗室洗瓶機（杜伯特（北京）科技有限公司）、英國艾德姆衡器AVT減震天平臺（艾德姆衡器（武漢）有限公司）、DC-0506上海汗諾低溫恒溫循環(huán)水槽（上海汗諾儀器有限公司）、UPH標(biāo)準(zhǔn)型超純水器（四川優(yōu)普超純科技有限公司）、通微EasySep-1020高效液相色譜儀（上海通微分析技術(shù)有限公司）。乙腈（西安嘉博盈生物科技有限公司）、氨水（西安嘉博盈生物科技有限公司）、甲醇（西安嘉博盈生物科技有限公司）、冰醋酸（西安嘉博盈生物科技有限公司）、三乙胺（德州同威新材料科技有限公司）、磷酸二氫鉀（德州同威新材料科技有限公司）、乙醚（德州同威新材料科技有限公司）、磷酸（上海盈公生物技術(shù)有限公司）、乙胺（德州同威新材料科技有限公司）、二正丁胺（德州同威新材料科技有限公司）、醋酸鈉（德州同威新材料科技有限公司）、磷酸二氫銨（德州同威新材料科技有限公司）。

2 含量測定

2.1 色譜條件：依據(jù)查閱文獻(xiàn)及考查的結(jié)果，確定色譜條件如下[2-6]。色譜柱為安捷倫Cl8規(guī)格為（4.6mm×250mm，5μm）;甲醇-0.092%磷酸溶液（含0.04%三乙胺和0.02%二正丁胺）（1.5∶98.5）為流動相;檢測波長為210nm。理論板數(shù)按鹽酸麻黃堿峰計算應(yīng)不得低于2000。

2.2 供試品溶液的制備

取柴連口服液，精密量取，用濃氨調(diào)pH至9，乙醚提取4次，每次15mL，合并乙醚液，蒸干，殘渣加甲醇適量溶解，濾過，用甲醇定容至5mL量瓶中，搖勻，備用。

2.3 對照品溶液的制備

精密稱取鹽酸麻黃堿對照品約20mg，用流動相溶解并稀釋成每1ml中含20μg的溶液，作為對照溶液。

2.4 準(zhǔn)曲線的制備

制備濃度為10、20、40、80、120、160μg·mL-1的對照品溶液，分別精密吸取10μL注入HPLC，記錄色譜圖。以峰面積積分值A(chǔ)（μg）為橫坐標(biāo)，進(jìn)樣量為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，計算回歸方程。試驗表明，鹽酸麻黃堿對照品在10～160μg·mL-1范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

2.5 精密度試驗

依照2.3項下制備對照品溶液，測定峰面積積分值，對照品峰面積積分值的RSD為0.86%。結(jié)果表明，本實驗精密度良好。

2.6 重現(xiàn)性試驗

分別稱取同批柴連口服液樣品6份，分別依照2.3項下供試品制0.77%，結(jié)果表明，此含量測定方法的重現(xiàn)性良好。

2.7 穩(wěn)定性試驗

依照2.3項下供試品制備方法制備供試品溶液，分別在0，2，4，6小時精密吸取供試品溶液注入液相色譜儀，進(jìn)樣測定，供試品鹽酸麻黃堿峰面積積分值的RSD為0.83%。結(jié)果表明鹽酸麻黃堿至少在6小時內(nèi)穩(wěn)定。

2.8 回收率試驗

采用加樣回收試驗，共測定六份樣品。

2.9 樣品含量測定

依照上述含量測定方法，測定柴連口服液三批樣品。

3 討論

分別考察含水-甲醇-冰醋酸（20∶80∶0.05），0.05mol/L磷酸二氫鉀溶液-乙腈-冰醋酸（70：30：1），水-乙腈-三乙胺（80∶20：0.01），甲醇-0.092%磷酸溶液（含0.04%三乙胺和0.02%二正丁胺）（5∶95），乙腈-0.02mol·L-1磷酸二氫鉀溶液（含0.2%三乙胺和0.1%磷酸）（30∶70），不同比例的流動相，結(jié)果以甲醇-0.092%磷酸溶液（含0.04%三乙胺和0.02%二正丁胺）（1.5∶98.5）為流動相，供試品各峰分離效果最好，故選用甲醇-0.092%磷酸溶液（含0.04%三乙胺和0.02%二正丁胺）（1.5∶98.5）為流動相。此方法簡便、準(zhǔn)確、重現(xiàn)性好，可用于柴連口服液中鹽酸麻黃堿的含量測定。

參考文獻(xiàn)

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