HPLC法測定柴連口服液中鹽酸麻黃堿的含量

鄭巧云

摘 ?要：本文采用高校液相測定了柴連口服液中鹽酸麻黃堿的含量，固定相為：安捷倫Cl8（4.6mm×250mm，5μm），甲醇-0.092%磷酸溶液（含0.04%三乙胺和0.02%二正丁胺）（1.5∶98.5）為流動相，檢測波長為210nm，流速1.0mL·min-1，柱溫：30℃。鹽酸麻黃堿在10～160μg·mL-1范圍內呈良好的線性關系。鹽酸麻黃堿的平均回收率為99.1%;此方法簡便、準確、重現性好，可用于柴連口服液中鹽酸麻黃堿的含量測定。

關鍵詞：柴連口服液;鹽酸麻黃堿;含量

柴連口服液具有解表宣肺，化濕和中的功效，由麻黃、柴胡、蔗糖、阿司帕坦、聚山梨酯80、廣藿香、肉桂、連翹、桔梗組成。柴連口服液用于感冒屬風寒、風寒挾濕證者。《本草經疏》記載：“表虛自汗，陰虛盜汗;肺虛有熱，多痰咳嗽以致鼻塞;瘡疤熱甚，不因寒邪所郁而自倒靨;虛人傷風，氣虛發喘;陰虛火炎，以致眩暈頭痛;南方中風癱瘓，及平日陽虛腠理不密之人皆禁用。”麻黃含有豐富的生物堿，是提取麻黃堿的主要資源。麻黃已有兩千多年的藥用歷史，用于傷風感冒、咳嗽氣喘、風濕痹痛及陰疽、咳痰等病癥。麻黃及麻黃堿也用于減肥，但對人的身體有極大的害處，甚至致人于死[1]。本文采用高校液相對柴連口服液中鹽酸麻黃堿含量方法進行研究。

1 儀器與試藥

萊伯泰科LC600高效液相色譜儀（北京萊伯泰科儀器股份有限公司）、梅特勒ME204E分析天平（上海楚柏實驗室設備有限公司）、C18保護柱芯（天津琛航科苑科技發展有限公司）、優普杜伯特UP-DBT-II實驗室洗瓶機（杜伯特（北京）科技有限公司）、英國艾德姆衡器AVT減震天平臺（艾德姆衡器（武漢）有限公司）、DC-0506上海汗諾低溫恒溫循環水槽（上海汗諾儀器有限公司）、UPH標準型超純水器（四川優普超純科技有限公司）、通微EasySep-1020高效液相色譜儀（上海通微分析技術有限公司）。乙腈（西安嘉博盈生物科技有限公司）、氨水（西安嘉博盈生物科技有限公司）、甲醇（西安嘉博盈生物科技有限公司）、冰醋酸（西安嘉博盈生物科技有限公司）、三乙胺（德州同威新材料科技有限公司）、磷酸二氫鉀（德州同威新材料科技有限公司）、乙醚（德州同威新材料科技有限公司）、磷酸（上海盈公生物技術有限公司）、乙胺（德州同威新材料科技有限公司）、二正丁胺（德州同威新材料科技有限公司）、醋酸鈉（德州同威新材料科技有限公司）、磷酸二氫銨（德州同威新材料科技有限公司）。

2 含量測定

2.1 色譜條件：依據查閱文獻及考查的結果，確定色譜條件如下[2-6]。色譜柱為安捷倫Cl8規格為（4.6mm×250mm，5μm）;甲醇-0.092%磷酸溶液（含0.04%三乙胺和0.02%二正丁胺）（1.5∶98.5）為流動相;檢測波長為210nm。理論板數按鹽酸麻黃堿峰計算應不得低于2000。

2.2 供試品溶液的制備

取柴連口服液，精密量取，用濃氨調pH至9，乙醚提取4次，每次15mL，合并乙醚液，蒸干，殘渣加甲醇適量溶解，濾過，用甲醇定容至5mL量瓶中，搖勻，備用。

2.3 對照品溶液的制備

精密稱取鹽酸麻黃堿對照品約20mg，用流動相溶解并稀釋成每1ml中含20μg的溶液，作為對照溶液。

2.4 準曲線的制備

制備濃度為10、20、40、80、120、160μg·mL-1的對照品溶液，分別精密吸取10μL注入HPLC，記錄色譜圖。以峰面積積分值A（μg）為橫坐標，進樣量為縱坐標，繪制標準曲線，計算回歸方程。試驗表明，鹽酸麻黃堿對照品在10～160μg·mL-1范圍內線性關系良好。

2.5 精密度試驗

依照2.3項下制備對照品溶液，測定峰面積積分值，對照品峰面積積分值的RSD為0.86%。結果表明，本實驗精密度良好。

2.6 重現性試驗

分別稱取同批柴連口服液樣品6份，分別依照2.3項下供試品制0.77%，結果表明，此含量測定方法的重現性良好。

2.7 穩定性試驗

依照2.3項下供試品制備方法制備供試品溶液，分別在0，2，4，6小時精密吸取供試品溶液注入液相色譜儀，進樣測定，供試品鹽酸麻黃堿峰面積積分值的RSD為0.83%。結果表明鹽酸麻黃堿至少在6小時內穩定。

2.8 回收率試驗

采用加樣回收試驗，共測定六份樣品。

2.9 樣品含量測定

依照上述含量測定方法，測定柴連口服液三批樣品。

3 討論

分別考察含水-甲醇-冰醋酸（20∶80∶0.05），0.05mol/L磷酸二氫鉀溶液-乙腈-冰醋酸（70：30：1），水-乙腈-三乙胺（80∶20：0.01），甲醇-0.092%磷酸溶液（含0.04%三乙胺和0.02%二正丁胺）（5∶95），乙腈-0.02mol·L-1磷酸二氫鉀溶液（含0.2%三乙胺和0.1%磷酸）（30∶70），不同比例的流動相，結果以甲醇-0.092%磷酸溶液（含0.04%三乙胺和0.02%二正丁胺）（1.5∶98.5）為流動相，供試品各峰分離效果最好，故選用甲醇-0.092%磷酸溶液（含0.04%三乙胺和0.02%二正丁胺）（1.5∶98.5）為流動相。此方法簡便、準確、重現性好，可用于柴連口服液中鹽酸麻黃堿的含量測定。

參考文獻

[1]麻黃及麻黃堿在減肥和提高競技水平方面的臨床效果及其副作用[J].Paul Shekelle，Mary Hardy，Sally C.Morton，Margaret Maglione，Marika Suttorp，Elizabeth，Roth Lara Jungrig，Walter A.Mojica，James Gagné，Eileen Mekinnon，袁芳.中國循證醫學雜志，2004（09）.

[2]衛平，鄭芳昊，霍慧靈，陳飛龍，羅佳波.不同配伍比例對麻黃-甘草藥對中麻黃類生物堿成分血漿藥動學的影響[J].中國實驗方劑學雜志，2016（07）.

[3]劉睿，王寧，劉志輝.RP-HPLC同時測定宣肺止咳口服液中鹽酸麻黃堿、鹽酸偽麻黃堿及苦杏仁苷含量[J].中國實驗方劑學雜志，2011（16）.

[4]曾永長，張莉，曾曉燕，陳藝文.HPLC法測定馥感啉口服液中鹽酸麻黃堿和鹽酸偽麻黃堿的含量[J].中藥新藥與臨床藥理，2015（02）.

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[6]金麗，康娟娟，伍小勇，杭娟，張心悅，張曉丹.高效液相色譜法同時測定呋麻滴鼻液中鹽酸麻黃堿和呋喃西林含量[J].中南藥學，2017（12）.