用山銀花與金銀花制備雙黃連口服液質(zhì)量比較研究

吳若溪

摘 ?要：本實(shí)驗(yàn)對(duì)用山銀花與金銀花制備雙黃連口服液質(zhì)量比較研究。含量測(cè)定方法：采用迪馬C18鉆石色譜柱（220mm×4.6mm，5μm），流動(dòng)相：（A）0.3%的甲酸水溶液、（B）乙腈;線性梯度洗脫，檢測(cè)波長(zhǎng)：280nm（綠原酸），324nm（黃芩苷），277nm（連翹苷），流速為1.0ml/min，柱溫為30℃。黃芩苷在0.08～0.4mg·mL-1，連翹苷在0.04～0.2mg·mL-1，綠原酸在0.008～0.04mg·mL-1范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。結(jié)論：用山銀花與金銀花制備雙黃連口服液綠原酸、黃芩苷、連翹苷含量均符合藥典標(biāo)準(zhǔn)。

關(guān)鍵詞：雙黃連口服液;質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn);研究

雙黃連口服具有疏風(fēng)解表，清熱解毒的功效。雙黃連口服液具有抗炎、抗氧化、抑制病毒的作用[1-2]。雙黃連口服液常用于呼吸道合胞病毒所致急性下呼吸道感染、小兒支原體肺炎、上呼吸道感染等治療[3-5]。《中國(guó)藥典》于2005年版之前的28年間，忍冬與灰氈毛忍冬在中醫(yī)藥臨床應(yīng)用與中醫(yī)藥劑中一直同作金銀花應(yīng)用。2010年版《中國(guó)藥典》對(duì)忍冬與灰氈毛忍冬進(jìn)行分列，其中忍冬被列為金銀花唯一的藥源植物，而灰氈毛忍冬收藏在山銀花中。山銀花是忍冬科植物灰氈毛忍冬、紅腺忍冬、華南忍冬或黃褐毛忍冬的干燥花蕾或帶初開(kāi)的花。金銀花為忍冬科植物忍冬的花蕾或帶初開(kāi)的花。山銀花與金銀花功效均為清熱解毒，疏散風(fēng)熱。山銀花與金銀花功效均用于癰腫療瘡，熱毒血痢，風(fēng)熱感冒，喉痹，丹毒，溫?zé)岚l(fā)病。本實(shí)驗(yàn)對(duì)山銀花與金銀花制備雙黃連口服液質(zhì)量進(jìn)行比較研究。

1 儀器與試藥

1.1 儀器：梅特勒ME204E分析天平（上海楚柏實(shí)驗(yàn)室設(shè)備有限公司）;LC-100（梯度）數(shù)字化電腦智能控制高效液相色譜儀（上海伍豐科學(xué)儀器有限公司）;EasySepTM-1010高效液相色譜儀（徐州華納精密儀器有限公司）;英國(guó)艾德姆衡器AVT減震天平臺(tái)（艾德姆衡器（武漢）有限公司）。

1.2 色譜柱：迪馬C18鉆石色譜柱（220mm×4.6mm，5μm）。

1.3 對(duì)照品：綠原酸

1.4 試劑：甲醇（四川華源盛泰生物科技有限公司）、乙腈（四川華源盛泰生物科技有限公司）、甲酸（四川華源盛泰生物科技有限公司）。

1.5 試藥：雙黃連口服液（自制）

2 測(cè)定方法確定

2.1 色譜條件

依據(jù)查閱文獻(xiàn)及考查的結(jié)果，確定色譜條件如下。流動(dòng)相：（A）0.3%的甲酸水溶液、（B）乙腈;線性梯度洗脫依次為14%～20%/0～12min，20%～30%/12～13min，30%～65%/13～25min和65%/25～35min;柱溫：30℃;流速：1.0mL/min[6]。檢測(cè)波長(zhǎng)：280nm（綠原酸），324nm（黃芩苷），277nm（連翹苷），流速：1.0m·min-1。柱溫：30℃。理論板數(shù)按綠原酸峰計(jì)算應(yīng)不得低于2000。

2.2 對(duì)照品溶液的制備

精密稱取綠原酸、黃芩苷、連翹苷對(duì)照品適量，置容量瓶中，加甲醇制成每1mL含0.2mg（黃芩苷）、0.02mg（綠原酸）、0.1mg（連翹苷）的溶液，即得。

2.3 供試品溶液的制備

精密量取雙黃連口服液，用5甲醇溶解超聲溶解，并轉(zhuǎn)入25mL量瓶中，定容，搖勻，過(guò)0.45μm微孔濾膜，濾液作為供試品溶液。

2.4 精密度試驗(yàn)

取對(duì)照品溶液按上述色譜條件，精密吸取20μl，連續(xù)進(jìn)樣6次，記錄峰面積。結(jié)果，RSD=0.72%，RSD=0.69%，RSD=0.66%，表明本方法精密度良好。

2.5 對(duì)照品的線性考察

精密稱取綠原酸、黃芩苷、連翹苷對(duì)照品適量，置容量瓶中，加甲醇制成每1mL含2mg（黃芩苷）、0.2mg（綠原酸）、1mg（連翹苷）的溶液，分別取1、2、3、4、5毫升，置于25毫升容量瓶中，加甲醇定容。分別精密上述溶液吸取20μL，注人液相色譜儀，依照2.1項(xiàng)下的色譜條件測(cè)定，記錄色譜峰。以峰面積（Y）為縱坐標(biāo)，對(duì)照品進(jìn)樣量（X）為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。結(jié)果表明，黃芩苷在0.08～0.4mg·mL-1，連翹苷在0.04～0.2mg·mL-1，綠原酸在0.008～0.04mg·mL-1范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。

2.6 重現(xiàn)性試驗(yàn)

稱取同一批的雙黃連口服液樣品6份，按測(cè)定方法項(xiàng)下的方法制備供試品溶液，測(cè)定含量，并計(jì)算樣品的RSD值，結(jié)果RSD為0.78%、0.65%、0.81%，結(jié)果表明此方法的重現(xiàn)性良好。

2.7 樣品含量測(cè)定

依照上述含量測(cè)定方法，分別測(cè)定山銀花和金銀花制備雙黃連口服液三批樣品。

3 結(jié)論

本實(shí)驗(yàn)對(duì)山銀花與金銀花制備雙黃連口服液質(zhì)量進(jìn)行比較研究。本實(shí)驗(yàn)采用山銀花和金銀花分別自制了6批雙黃連口服液.用山銀花和金銀花制備雙黃連口服液綠原酸、黃芩苷、連翹苷含量均符合藥典標(biāo)準(zhǔn)。

參考文獻(xiàn)

[1]Yuan Gao，Lei Fang，Runlan Cai，Chuanjie Zong，Xi Chen，Juan Lu，Yun Qi.Shuang-Huang-Lian exerts anti-inflammatory and anti-oxidative activities in lipopolysaccharide-stimulated murine alveolar macrophages[J]. Phytomedicine.2013.

[2]莫紅纓，賴克方，江永南，謝建屏，譚亞夏，鐘南山.雙黃連對(duì)呼吸道合胞病毒感染的氣道上皮細(xì)胞炎癥因子釋放的影響[J].廣州醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)， 2005（02）.

[3]孔曉棠，江載芳，照日格圖，顧岑，江沁波，王樹(shù)欣，申昆玲，王雪蓮，買(mǎi)穎，閻靜.雙黃連霧化吸入治療呼吸道合胞病毒所致急性下呼吸道感染[J].中華兒科雜志，1996（01）.

[4]樊樹(shù)華，賀一新.雙黃連口服液（兒童型）聯(lián)合阿奇霉素治療小兒支原體肺炎的臨床研究[J].中國(guó)實(shí)用醫(yī)藥，2017（15）.

[5]史曉娟，賀一新.雙黃連口服液（兒童型）聯(lián)合西藥治療兒童上呼吸道感染的臨床效果觀察[J].海峽藥學(xué)，2017（02）.

[6]杜英峰，張?zhí)m桐，靳怡然，許慧君，劉靜榮，張立段.多波長(zhǎng)RP-HPLC法測(cè)定雙黃連口服液中黃芩苷、綠原酸和連翹苷[J].中成藥，2009（09）.