利用pH梯度萃取法提取中藥大黃中的游離蒽醌組分

付寶慧

摘 要：目的：利用課堂教材上的經典提取方法-pH梯度萃取法，提取中藥大黃中的游離蒽醌組分（大黃酸、大黃素、蘆薈大黃素、大黃酚、大黃素甲醚），并計算其含量，考察課堂教學實驗中提取大黃游離蒽醌中各組分總含量是否符合中國藥典規定。方法：利用pH梯度萃取法提取并計算各組分含量。結果：大黃酸0.018%、大黃素0.48%、蘆薈大黃素0.38%、大黃酚0.76%、大黃素甲醚0.38%，結論：大黃游離蒽醌組分的總含量為2.02%，符合中國藥典不低于1.5%的規定。

關鍵詞：大黃;pH梯度萃取法;游離蒽醌;大黃酸;大黃素

大黃為蓼科植物掌葉大黃Rheum palmatum L.、唐古特大黃Rheum tanguticum Maxim.ex Balf.或藥用大黃Rheum officinale Baill.的干燥根及根莖。具有瀉下攻積，清熱瀉火，涼血解毒，逐淤通經，利濕退黃等功效。大黃中含有多種游離羥基蒽醌組分及其苷類成分，已知的游離羥基蒽醌主要有大黃酸、大黃素、蘆薈大黃素、大黃素甲醚和大黃酚。pH梯度萃取法是提取中藥大黃中游離蒽醌的經典方法，也是學校實驗室中常用方法，其原理是改變溶劑系統pH，進而改變組分的存在狀態，也就是改變了組分在溶劑系統中的分配系數。根據蒽醌中各組分酸性的大小，使用不同pH值的堿液依次從有機溶劑中萃取出蒽醌類組分，再分別酸化堿液，蒽醌類成分即可析出沉淀。本實驗旨在考察課堂實驗中的中藥大黃提取產物中的游離蒽醌總量是否符合中國藥典的規定。本次實驗由本校三年制中專學生來完成，中專學生有如下特點：知識基礎相對薄弱，掌握的知識點不牢固;思維敏捷，動手能力強，愿意完成實驗類項目的“挑戰”;愿意接受新事物、新現象，尋求創新。

1 實驗儀器

水浴鍋、抽濾瓶、布氏漏斗、真空泵、燒杯、玻璃棒、三角瓶、試管、pH試紙、毛細管、色譜柱。

2 實驗材料

大黃粗粉、20%硫酸水溶液、氯仿、5%氫氧化鈉溶液、濃鹽酸、pH為8的緩沖溶液（自制）、pH9.9的緩沖溶液（自制）、5%碳酸鈉-5%氫氧化鈉（9：1）緩沖溶液（自制）、5%氫氧化鈉溶液（自制）、蒸餾水（校實訓車間提供）。

3 實驗方法

3.1 緩沖液的配制

（1）pH8緩沖溶液的配制。精密稱取Na2HPO4·12H2O（0.2 mol/L）35.3200 g，加入到500 ml蒸餾水中，使之溶解，得到溶液①。精密稱取枸櫞酸·1 H2O（0.1 mol/L）10.5050 g，加入到500 ml蒸餾水中，使之溶解，得到溶液②。精密量取溶液①389 ml，精密量取溶液②11 ml，混勻即得到pH8緩沖溶液。

（2）pH9.9緩沖溶液的配制。稱取Na2CO3 2.12 g，加入到200 ml蒸餾水中，使之溶解，得到溶液①。稱取NaHCO3 1.68 g，加入到200 ml蒸餾水中，使之溶解，得到溶液②。溶液①和溶液②直接混合，即得到pH99緩沖溶液。

3.2 提取工藝流程圖

pH梯度萃取法提取中藥大黃中的游離蒽醌組分流程圖

3.3 大黃酚和大黃素甲醚的柱層析分離

5 討論

從表2中可以看出，實驗課堂中的3個小組在大黃酸、大黃素提取上的平行性不好，有可能是因為萃取時乳化層混入，而在蘆薈大黃素、大黃酚和大黃素甲醚的提取上差異較小，組2中的大黃酸未提取成功，可能是因為在做第一步萃取的過程中，緩沖液配制未完全溶解，致使大黃酸提取的量為痕量。大黃游離蒽醌中的大黃酸、大黃素、蘆薈大黃素、大黃素甲醚和大黃酚五個組分的總量為2.02%，符合中國藥典中不低于1.50%的規定。下次帶其他班級再做大黃游離蒽醌組分分離的時候，要注意以下幾點：其一，要充分考慮到如何在萃取時消除乳化層;其二，緩沖液的配制要現用現配，防止有沉淀析出，有沉淀析出后會導致緩沖液的pH值不準確，給后續實驗帶來影響。