丹參注射液輔助常規療法治療口腔黏膜下纖維性變的效果及對SFRP1 水平的影響

肖艷波 譚 勁 張 琳 李 群 左巧娟

湖南中醫藥大學第一附屬醫院口腔科，湖南長沙 410000

口腔黏膜下纖維性變（oral submucous fibrosis，OSF）已被世界衛生組織列為癌前病變，是一種慢性、隱匿性疾病，具有癌變的可能。研究提示OSF 的主要病理特征為上皮炎性反應引起固有層膠原纖維變性和堆積[1]。OSF 主要由于黏膜固有層的纖維組織出現上皮萎縮和變性誘發黏膜硬化，進而導致牙關緊閉，造成口腔多種功能障礙，并具有發展為癌的可能性。局部注射糖皮質激素是現代治療OSF 的主要方法，單純的糖皮質激素雖然可以一直預防局部炎性反應，但無法逆轉纖維化，復發率較高，且常伴有多種毒副作用[2]。研究發現[3]，丹參能有效改善微循環，具有活血化瘀的功效，并兼具抗氧化和抗纖維化的作用，減少膠原纖維堆積，但關于OSF 的臨床療效尚待考量。研究顯示，Wnt/β-連環蛋白信號的持續活化參與人體皮膚、肺和腎等器官纖維紊亂的病理過程，因此Wnt/β-連環蛋白可能參與了OSF 的發生發展過程。而分泌型卷曲相關蛋白1（secreted frizzled related protein 1，SFRP1）屬于SFRP 基因家族，能夠通過與Wnt 反應或直接與卷曲蛋白反應而抑制Wnt 信號的傳導，減少纖維化標志因子表達，抑制纖維化進程[4]。為探尋臨床治療OSF的有效方法，本研究深入探討了丹參注射液輔助常規療法治療OSF 的效果及對SFRP1 的影響。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2016 年4 月～2018 年3 月湖南中醫藥大學第一附屬醫院（以下簡稱“我院”）收治的68 例OSF 患者，采用隨機數字表法將其分為單藥組和聯合組，各34 例。單藥組患者年齡24～65 歲，平均（40.2±12.2）歲；男22 例，女12 例；病程1～6 年，平均（2.8±1.5）年。聯合組患者年齡22～65 歲，平均（38.9±14.1）歲；男25 例，女9 例；病程1～8 年，平均（3.0±1.4）年。兩組患者年齡、性別、病程比較差異無統計學意義（P ＞0.05），具有可比性。本研究經我院醫學倫理委員會批準，所有患者均知情同意并簽署知情同意書。

納入標準：①OSF 患者的診斷標準參考《口腔黏膜病學》[5]第4 版中的診斷標準；②年齡18～65 歲；③均為首診患者；④患者表現為張口受限、口腔黏膜疼痛感。

排除標準：①精神疾病、認知功能障礙；②血液系統疾病；③肝腎疾病；④近3 個月使用免疫調節劑、激素類藥物；⑤伴有其他系統或部位的嚴重感染性疾病。

1.2 治療方法

單藥組給予曲安奈德治療，將1 mL 曲安奈德注射液（40 mg/mL，昆明積大制藥股份有限公司，生產批號：20160123）于口腔黏膜病變區兩側多量注射，每周1 次；聯合組在單藥組基礎上聯合丹參注射液（四川升和藥業股份有限公司，批號：20160112）治療，4 mL丹參注射液患者口腔黏膜病變區進行兩側多量注射，每周1 次，所有患者均持續治療3 個月。

1.3 觀察指標

檢測比較兩組患者治療前后的張口度、口腔黏膜病損面積、視覺模擬評分（VAS）、臨床效果；酶聯免疫吸附測定法（ELISA）檢測齦溝液及唾液中SFRP1、血清白細胞介素-6（IL-6）、轉化生長因子-β1（TGF-β1）水平；ELISA 試劑盒均購于默沙克公司，貨號：69-76215，批號：20160121。

VAS 總分0～10 分，0 分為無痛，10 分為難以忍受的疼痛，分值越大，其疼痛越明顯。臨床效果依據《口腔黏膜下纖維性變的診斷標準（試行稿）》[6]中的標準來制訂，顯效：治療后患者的口腔黏膜僵硬感、刺激疼痛感基本消失，張口度較治療前提高至少1 cm；有效：治療后患者的口腔黏膜僵硬感、刺激疼痛感顯著改善，張口度較治療前提高不足1 cm；無效：治療后，患者的張口度、疼痛感、口腔黏膜僵硬感均未明顯改善。

1.4 統計學方法

采用SPSS 16.0 統計軟件進行分析，計量資料用均數±標準差（±s）表示，組內比較采用配對t 檢驗，組間比較采用獨立樣本t 檢驗；計數資料采用χ2檢驗，等級資料比較采用秩和檢驗。以P ＜0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組患者治療前后張口度、口腔黏膜病損面積、VAS 評分比較

治療前，兩組患者張口度、口腔黏膜病損面積、VAS 評分比較，差異無統計學意義（P ＞0.05）；治療后，兩組患者口腔黏膜病損面積、VAS 評分較治療前降低，張口度較治療前顯著升高（均P ＜0.05）；治療后，聯合組口腔黏膜病損面積、VAS 評分顯著低于單藥組，張口度高于單藥組（均P ＜0.05）。見表1。

2.2 兩組患者治療前后齦溝液及唾液中SFRP1 比較

治療前，兩組患者齦溝液及唾液中SFRP1 水平比較，差異無統計學意義（P ＞0.05）；治療后，兩組患者齦溝液及唾液中SFRP1 水平均較治療前顯著升高（P ＜0.05），且聯合組齦溝液及唾液中SFRP1 均高于單藥組（P ＜0.05）。見表2。

表1 兩組患者治療前后張口度、口腔黏膜病損面積、VAS 評分比較（±s）

注：VAS：視覺模擬評分

表2 兩組患者治療前后齦溝液及唾液中SFRP1 比較（±s）

注：SFRP1：分泌型卷曲相關蛋白1

2.3 兩組患者治療前后血清IL-6、TGF-β1 比較

治療前，兩組患者血清IL-6、TGF-β1 水平比較，差異無統計學意義（P ＞0.05）；治療后，兩組患者血清IL-6、TGF-β1 水平均較治療前顯著降低（P ＜0.05）；治療后，聯合組血清IL-6、TGF-β1 均低于單藥組（P ＜0.05）。見表3。

2.4 兩組患者臨床療效比較

聯合組的治療效果顯著優于單藥組，差異有統計學意義（P ＜0.05）。見表4。

表3 兩組患者治療前后血清IL-6、TGF-β1 比較（±s）

表3 兩組患者治療前后血清IL-6、TGF-β1 比較（±s）

注：IL-6：白細胞介素-6；TGF-β1：轉化生長因子-β1

表4 兩組患者臨床療效比較[例（%）]

3 討論

OSF 患者口腔黏膜纖維下層膠原出現堆積和變性，纖維變性后常出現上皮組織異常增生或萎縮，到最后微血管擴張，患者后期多出現微血管堵塞[7-8]。故而，OSF 治療時需要首先注意防止纖維下層膠原聚合并分解已堆積的膠原，減輕病灶部位的炎性反應，進而促進損傷血管修復及病變區域血管生成，達到改善顏色、減輕疼痛及縮小病變區域的治療目的[9-10]。

曲安奈德屬于長效糖皮質激素，可持久地抑制纖維化和發揮抗炎作用[11]，但研究提示曲安奈德長期使用可導致局部黏膜萎縮、代謝紊亂及真菌感染等副作用[12-13]，因而臨床應用受到了一定限制。文獻提示OSF的主要病理特征是微血管病變[14]，故而，擴張血管、活血化瘀的針對性治療對提高OSF 的治療效果具有重要意義。

本研究結果顯示，治療后，聯合組口腔黏膜病損面積、VAS 評分顯著低于單藥組，張口度高于單藥組；聯合組患者的治療效果顯著優于單藥組。上述結果提示丹參注射液輔助曲安奈德治療OSF 能夠顯著降低患者的口腔黏膜病損面積及疼痛感，提高張口度，具有更佳的治療效果。本研究采用局部注射的方式治療，在減輕患者疼痛的同時，直接作用于病變部位，進而有效阻止膠原合成和聚集，修復患者病變區域的毛細血管。現代藥理學研究發現，丹參能夠減少血小板聚集，降低血液黏稠度，改善微循環及血液流變學；亦可促進成纖維細胞凋亡，抑制成纖維細胞增殖促進膠原降解，誘導新生毛細血管形成及維持血管內皮細胞胞膜完整性[15-16]。

研究發現[17-18]，牙周炎的嚴重程度與Wnt/β-連環蛋白通路抑制劑SFRP1 在慢性牙周炎患者中的表達水平具有明顯正相關性；Wnt/β-連環蛋白信號通路參與了多種疾病器官纖維紊亂的病理進程，故而本研究推測OSF 的發病與Wnt/β-連環蛋白通路具有密切聯系。本研究結果顯示，治療前，兩組患者齦溝液及唾液中SFRP1 水平差異無統計學意義（P ＞0.05）；治療后，聯合組的齦溝液及唾液中SFRP1 均高于單藥組（P ＜0.05）。上述結果提示丹參注射液輔助曲安奈德治療OSF 能夠有效抑制Wnt/β-連環蛋白信號通路活化，并可能通過調節相關通路發揮抗纖維化的作用。

TGF-β1 可參與促進纖維母細胞趨化、加快細胞分化、抑制上皮細胞增殖、促使血管生成及改變細胞黏附功能等多種纖維化疾病的發生發展過程[19-21]。IL-6可介導急性炎性反應，誘導T、B 細胞成熟，促進成纖維細胞增殖，增加膠原蛋白聚集，進而促使纖維化形成[22-23]。本研究結果顯示，治療前，兩組患者血清IL-6、TGF-β1 水平差異無統計學意義（P ＞0.05）；治療后，聯合組血清IL-6、TGF-β1 均低于單藥組（P ＜0.05）。上述結果提示丹參注射液輔助曲安奈德治療OSF 能夠更有效地降低血清IL-6、TGF-β1 水平，發揮抗纖維化及抗炎的作用，促進膠原纖維的吸收及分解，提高治療效果。

綜上所述，丹參注射液輔助曲安奈德治療OSF的效果優于單用曲安奈德，能有效降低齦溝液及唾液中SFRP1 水平，延緩口腔黏膜下纖維性變的發展進程。但本研究未對丹參注射液輔助曲安奈德治療OSF進行安全性及并發癥研究，還需要進一研究探討其安全性才可在臨床范圍內推廣應用。