原發免疫性血小板減少癥患者Th1、Th17和Treg細胞的檢驗及其臨床價值

郭煜　馮紅梅　鐘惠英　湯穎思

【摘要】 目的：探討原發免疫性血小板減少癥患者Th1、Th17和Treg細胞的檢驗及其臨床應用價值。方法：隨機選取2016年12月-2018年12月筆者所在醫院接收的30例原發免疫性血小板減少癥患者，作為觀察組。選取同時期于筆者所在醫院行健康體檢者30例，作為對照組。對所有患者實施血清檢測。觀察比較兩組外周血Th1、Th17和Treg細胞表達情況及白細胞介素-17和γ干擾素的表達情況。結果：兩組外周血中Th17表達水平比較，差異無統計意義（P>0.05）。觀察組外周血中Th1細胞表達水平高于對照組，Treg細胞表達水平低于對照組，差異均有統計學意義（P<0.05）。兩組白細胞介素-17表達水平比較差異無統計學意義（P>0.05）。觀察組γ干擾素表達水平高于對照組，差異有統計學意義（P<0.05）。

結論：Th1和Treg細胞能夠作為疾病評估指標，為原發免疫性血小板減少癥疾病的治療提供臨床依據。

【關鍵詞】 原發免疫性血小板減少癥; Th1; Th17; Treg細胞; 檢驗; 價值

doi：10.14033/j.cnki.cfmr.2019.22.026 文獻標識碼 B 文章編號 1674-6805（2019）22-00-03

【Abstract】 Objective：To investigate the clinical application value of Th1，Th17 and Treg cells in patients with primary immune thrombocytopenia.Method：A total of 30 patients with primary immune thrombocytopenia admitted in our hospital from December 2016 to December 2018 were randomly selected as the observation group.30 patients who underwent physical examination in our hospital at the same time were selected as the control group.Serum tests were performed on all patients.Serum tests were performed on all patients.The expression of Th1，Th17 and Treg cells in peripheral blood of the two groups and the expression of interleukin-17 and gamma interferon were observed and compared.Result：There was no statistically significant difference in the expression of Th17 in the peripheral blood between the two groups（P>0.05）.The expression of Th1 cells in peripheral blood of the observation group was higher than that of the control group，and the expression of Treg cells was lower than that of the control group，the differences were statistically significant（P<0.05）.The was no statistically significant in the expression of interleukin-17 between of the two groups（P>0.05）.The expression of interferon gamma in observation group was higher than that in control group，the difference was statistically significant（P<0.05）.Conclusion：Th1 and Treg cells can be used as disease evaluation indicators to provide clinical basis for the treatment of primary immune thrombocytopenia.

【Key words】 Primary immune thrombocytopenia; Th1; Th17; Treg cells; Inspection; Value

First-authors address：First Affiliated Hospital of Guangdong Pharmaceutical University，Guangzhou 510080，China

近年來，人們生活方式轉變，原發免疫性血小板減少癥發病率上升[1]。根據對該疾病的分析，發現其作為起病較為隱襲性疾病，發病特征不是十分明顯。因此，采用血清檢測相關指標的方式，實現對疾病的評估極為重要。臨床認為Th1、Th17和Treg細胞的檢驗可實現對原發免疫性血小板減少癥的評估，為疾病治療提供依據[2-3]。為此，本次研究展開對原發免疫性血小板減少癥患者Th1、Th17和Treg細胞檢驗的分析，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

隨機選取2016年12月-2018年12月筆者所在醫院接收的30例原發免疫性血小板減少癥患者，將其作為觀察組。選取同時期于筆者所在醫院行健康體檢者30例，將其作為對照組。納入標準：（1）觀察組所有患者均為原發免疫性血小板減少癥疾病;（2）觀察組所有患者均為初次治療;（3）所有研究對象在采集標本前均未接受過免疫治療與糖皮質激素治療。排除標準：（1）嚴重內分泌系統疾病患者;（2）嚴重肝腎功能障礙、精神障礙的患者。其中，觀察組男16例，女14例;年齡16～74歲，平均（45.23±0.57）歲;病程1～8個月，平均（4.86±0.25）周。對照組男17例，女13例;年齡15歲～75歲，平均（45.63±0.27）歲。兩組患者年齡、性別等一般資料比較，差異無統計學意義（P>0.05），有可比性。所有研究對象均自愿參與本次研究，本次研究經過筆者所在醫院倫理委員會批準同意。

1.2 方法

對所有患者實施血清檢測。

檢測儀器與試劑：采用型號為Epics-xl的流式細胞儀（美國GE公司）、型號為Sunrise的酶標儀儀器（德國西門子）。試劑包括異硫氰酸熒光素標記-抗人CD3單克隆體、抗人CD4單克隆體，藻紅蛋白青色素標記-抗人CD4單克隆體等。

標本的采集與處理。向所有研究對象講述標本采集的流程及注意事項，提高研究對象的認知水平。于入院后第2日清晨保持空腹，抽取靜脈血容量6 ml，將靜脈血抽至肝素抗凝管中，送往檢驗室進行檢驗。采用密度梯度離心法，將外周血單個核細胞分離，用于檢測Th1、Th17;直接選取1 ml靜脈血檢測Treg細胞。分離的血漿要放置于-20 ℃中冷凍保存，將其應用于細胞因子的檢測中。所有血液標本均無溶血現象。分別采用流式細胞儀和酶聯免疫吸附試驗法，對患者血清中的Th1、Th17、Treg細胞、白細胞介素-17和γ干擾素進行檢驗。

1.3 觀察指標

觀察兩組外周血中的Th1、Th17和Treg細胞表達情況，并觀察兩組白細胞介素-17和γ干擾素的表達，詳細記錄檢測結果，并對比分析。

1.4 統計學處理

本研究數據采用SPSS 19.0統計學軟件進行分析和處理，計量資料以（x±s）表示，采用t檢驗，計數資料以率（%）表示，采用字2檢驗，P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組外周血中Th1、Th17和Treg細胞的表達情況對比

兩組外周血中Th17表達水平比較，差異無統計學意義（P>0.05）;觀察組外周血中Th1細胞表達水平高于對照組，Treg細胞表達水平低于對照組，差異均有統計學意義（P<0.05），見表1。

2.2 兩組白細胞介素-17和γ干擾素的表達對比

兩組白細胞介素-17表達水平比較，差異無統計學意義（P>0.05）;觀察組γ干擾素表達水平高于對照組，差異有統計學意義（P<0.05），見表2。

3 討論

原發免疫性血小板減少癥是臨床常見病，發病原因較為廣泛。根據對該疾病的分析，其屬于獲得性出血疾病，原因不明確[4-5]。疾病主要特征為，骨髓巨核細胞正常或增多，血小板減少等。流行病學顯示，原發免疫性血小板減少癥的發病率為8.6%[（5～10）/10萬]，男性與女性的發病比例差異不大[6-7]。一般情況下，依據疾病的持續性時間，可將該疾病分為新診斷疾病、持續性疾病、慢性疾病，疾病持續時間依次延長。該病起病隱襲，臨床癥狀不明顯。為此，采用科學的方式，實現對疾病的診斷和病情評估，是極為重要的。曾有研究指出，血清檢測方式下的Th1、Th17和Treg細胞表達水平，可實現對原發免疫性血小板減少癥的評估[8-9]。基于該研究成果的論述，本次研究重點分析了Th1、Th17和Treg細胞檢驗對于原發免疫性血小板減少癥的價值。

在本次研究中，通過分析原發免疫性血小板減少癥患者Th1、Th17和Treg細胞的檢驗及其臨床價值，從比較全面的角度上明確了Th1、Th17和Treg細胞，對于該疾病的影響。一般而言，調節T細胞與臨床自身免疫性疾病具有較為密切的關系[10-11]。臨床實踐證實，T淋巴細胞亞群積極參與了原發免疫性血小板減少癥免疫應答的誘導，尤其是T淋巴細胞的活化，導致了免疫細胞的損傷。因此，Treg細胞作為來自胸腺的天然性細胞，能夠有效實現對病原Th1和Th17細胞增殖的抑制，實現對外周免疫耐受的維持。由此，充分避免其自身免疫及組織的損傷。然而，在系列性的自身免疫系統紊亂中，T淋巴細胞比例若存在失調的現象，Treg細胞的功能將會受損，致使T細胞打破了正常的免疫性平衡，使免疫系統呈現出促使炎性細胞發展的傾向[12-13]。本研究結果顯示，觀察組Treg細胞為（3.62±0.27）%，對照組Treg細胞為（6.12±0.48）%。與對照組健康體檢者相比，患有原發免疫性血小板減少癥疾病的患者，其體內存在Treg細胞減少的現象。該研究結果也能夠充分證實原發免疫性血小板減少癥疾病患者調節T淋巴細胞，多出現功能異常的現象。在此種情況下，T淋巴細胞減少，能夠發揮免疫機制的細胞減少，機體免疫功能下降，耐受水平降低，使得自身免疫性反應T淋巴細胞激活，產生大量的炎癥效應因子。此外，本次研究結果顯示，觀察組γ干擾素為（19.67±5.34）ng/L，對照組γ干擾素為（10.35±2.42）ng/L，觀察組患者與對照組健康體檢者的γ干擾素比較，差異有統計學意義（P<0.05）。有研究指出，Th17可實現對Th1的抑制，促使γ干擾素的產生[14-15]。分析原因，Th17在應答局部細胞因子的影響下，會在不同程度上產生白介素細胞-2或是腫瘤因子等，此種現象表明Th17細胞在逐漸向Th1細胞轉化，白細胞介素-17與γ干擾素的相互調節，可在原發免疫性血小板減少癥自身免疫耐受中發揮較大的作用。同時，由于γ干擾素的升高，會阻抑Th17的相關誘導因子，從而降低其表達，而Th17細胞是一類產生白細胞介素-17的Th細胞亞群，其表達低導致白細胞介素-17降低。本研究結果中兩組Th17與白細胞介素-17比較，差異均無統計學意義（P>0.05）。

綜上所述，在原發免疫性血小板減少癥患者中，Th1、Th17和Treg及其細胞因子的表達，存在明顯的差異，提示Th1、Th17和Treg細胞可在原發免疫性血小板減少癥疾病中發揮不同的作用。其中，Th1和Treg細胞能夠作為疾病評估指標，為原發免疫性血小板減少癥疾病的治療提供臨床依據。

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（收稿日期：2019-06-21） （本文編輯：桑茹南）