氣相色譜法和氣質(zhì)聯(lián)用法測(cè)定草莓中腐霉利和異菌脲殘留量的方法比對(duì)

張建輝 汪 濱 宋 佳 沈怡婷 馬 軍 吳 婕 陳 悅 高春芳

（上海市青浦區(qū)農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣服務(wù)中心 201700）

腐霉利是內(nèi)吸性殺菌劑，兼有保護(hù)和治療的作用，在低溫高濕條件下使用效果明顯，主要適用于油菜、蘿卜、茄子、黃瓜、白菜、番茄、向日葵、西瓜、草莓、元蔥、桃、櫻桃、花卉、葡萄等作物，可防治灰霉病和菌核病及灰星病、花腐病、褐腐病、蔓枯病等，也可用于防治對(duì)甲基硫菌靈、多菌靈有抗性的原菌。異菌脲是二甲酰亞胺類(lèi)高效廣譜、觸殺型殺菌劑，適用于多種果樹(shù)、蔬菜、瓜果類(lèi)等作物，可防治落葉病、灰霉病、早疫病等；同時(shí)，異菌脲還能抑制蛋白激酶，控制許多細(xì)胞功能的細(xì)胞內(nèi)信號(hào)，包括與碳水化合物結(jié)合進(jìn)入真菌細(xì)胞組分的干擾作用，因此，它既可抑制真菌孢子的萌發(fā)和產(chǎn)生，也可抑制菌絲生長(zhǎng)，即對(duì)病原菌生活史中的各個(gè)發(fā)育階段均有影響。由于腐霉利和異菌脲是草莓生產(chǎn)上防治灰霉病的常用農(nóng)藥，各級(jí)農(nóng)業(yè)監(jiān)管部門(mén)將其列入了農(nóng)藥殘留例行監(jiān)測(cè)范圍，且從統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)來(lái)看，這兩種農(nóng)藥在草莓中的檢出率也較高；而當(dāng)前關(guān)于這兩種農(nóng)藥的常用檢測(cè)方法是NY/T 761-2008中的氣相色譜法和GB 23200.113-2018中的氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法。為此，筆者擬對(duì)這兩種檢測(cè)方法對(duì)草莓中腐霉利和異菌脲殘留量的測(cè)定結(jié)果進(jìn)行比對(duì)，以期選擇出能更快且更準(zhǔn)確地定性、定量測(cè)定草莓中農(nóng)藥殘留的檢測(cè)方法。

1 材料與方法

1.1 主要試劑和耗材

氣相色譜法需要的試劑和耗材有：氯化鈉(5～7 g)、乙腈(50 mL)、正己烷(12 mL)、腐霉利標(biāo)準(zhǔn)溶液、異菌脲標(biāo)準(zhǔn)溶液、弗羅里矽柱。

氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法需要的試劑和耗材有：乙腈(10 mL)、乙酸乙酯（1 mL）、腐霉利標(biāo)準(zhǔn)溶液、異菌脲標(biāo)準(zhǔn)溶液、鹽包（含4 g硫酸鎂、1 g氯化鈉、1 g檸檬酸、0.5 g檸檬酸氫二鈉）、陶瓷均質(zhì)子、凈化包（含900 mg硫酸鎂、150 mg PSA）、0.22 um濾膜。

1.2 主要儀器設(shè)備

氣相色譜法需要的主要儀器設(shè)備有：氣相色譜儀（帶電子捕獲檢測(cè)器）、梅特勒天平、IK攪拌器、漩渦儀、氮吹儀。

氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法需要的主要儀器設(shè)備有：氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀、離心機(jī)、梅特勒天平、漩渦儀、氮吹儀。

1.3 前處理

氣相色譜法和氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法均對(duì)腐霉利和異菌脲做3個(gè)水平的加標(biāo)回收測(cè)定，3個(gè)加標(biāo)水平的含量分別為50、100、500 ug/L，兩種方法前處理的主要步驟見(jiàn)表1。

2 結(jié)果與分析

由表2和表3可知，利用氣相色譜法和氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法測(cè)定草莓中腐霉利、異菌脲殘留量時(shí)，所配制的曲線均能滿足GB/T 27404-2008的標(biāo)準(zhǔn)要求（即應(yīng)描述校準(zhǔn)曲線的數(shù)學(xué)方程式以及校準(zhǔn)曲線的工作范圍，濃度范圍盡可能覆蓋一個(gè)數(shù)量級(jí)，至少要覆蓋5個(gè)點(diǎn)，不包括空白）。對(duì)于篩選方法，線性回歸方程的相關(guān)系數(shù)不應(yīng)低于0.98。對(duì)于確認(rèn)方法，相關(guān)系數(shù)不應(yīng)低于0.99。測(cè)試溶液中被測(cè)組分濃度應(yīng)在校準(zhǔn)曲線的線性范圍內(nèi)）。

表1 前處理主要步驟

表2 不同檢測(cè)方法檢測(cè)腐霉利的標(biāo)準(zhǔn)曲線

表3 不同檢測(cè)方法檢測(cè)異菌脲的標(biāo)準(zhǔn)曲線

由表4可知，兩種檢測(cè)方法分別加標(biāo)3個(gè)濃度的腐霉利，所得到的添加回收率范圍是83.8%～94.1%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差的范圍是2.2%～4.0%。兩種檢測(cè)方法分別加標(biāo)3個(gè)濃度的異菌脲，所得到的添加回收率范圍是82.1%～90.3%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差的范圍是2.8%～5.7%。以上結(jié)果說(shuō)明，兩種檢測(cè)方法均能滿足GB/T 27404-2008的標(biāo)準(zhǔn)要求（即添加量＜100 ug/L時(shí)，回收率為60%～120%；添加量為100～1000 ug/L時(shí)，回收率為80%～110%）。

表4 不同檢測(cè)方法檢測(cè)草莓中腐霉利和異菌脲的加標(biāo)試驗(yàn)結(jié)果

3 結(jié) 論

試驗(yàn)結(jié)果表明，氣相色譜法和氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法均可用于草莓中腐霉利和異菌脲殘留量的檢測(cè)，且檢測(cè)結(jié)果均能滿足GB/T 27404-2008的標(biāo)準(zhǔn)要求。但氣相色譜法檢測(cè)步驟繁瑣，全套檢測(cè)時(shí)長(zhǎng)較氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法多1/3，且所需試劑多50%，說(shuō)明采用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法檢測(cè)草莓中腐霉利和異菌脲殘留，既高效又環(huán)保。因此，在擁有氣質(zhì)設(shè)備的條件下，建議采用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法進(jìn)行草莓農(nóng)藥殘留檢測(cè)。