573例女性不孕癥患者血清AsAb、AEmAb、AZpAb、AhCGAb、ACPAb、ATAb檢測(cè)結(jié)果分析

王小花，俞巖，葉文嬌，王茹，鐘桂蘭

(海南省婦女兒童醫(yī)學(xué)中心 海南省婦幼保健院，海口570206)

不孕癥是一種特殊的生殖健康缺陷，其醫(yī)學(xué)定義為在結(jié)婚至少1年內(nèi)未采取任何避孕措施，且性生活正常(1周≥2次)而未懷孕的情況[1]。根據(jù)曾經(jīng)是否有受孕的情況，不孕癥主要分為原發(fā)性不孕(從未受過(guò)孕)和繼發(fā)性不孕(曾經(jīng)受過(guò)孕[2])。據(jù)WHO調(diào)查結(jié)果顯示，我國(guó)有10%～15%的已婚夫婦存在不孕不育，其中女性不孕占25%～36%[3]。排卵障礙、輸卵管堵塞、子宮內(nèi)膜異常以及宮頸狹窄等是導(dǎo)致女性不孕的常見(jiàn)因素[4]。此外，近幾年生殖免疫導(dǎo)致女性不孕的情況越來(lái)越多，逐漸受到臨床專家的關(guān)注[5]。抗精子抗體(AsAb)、抗子宮內(nèi)膜抗體(AEmAb)、抗心磷脂抗體(ACPAb)、抗透明帶抗體(AZpAb)、抗人絨毛膜促性腺激素抗體(AhCGAb)及抗滋養(yǎng)層抗體(ATAb)是與不孕有關(guān)的器官特異性自身抗體[6]。所以，本研究擬通過(guò)分析573例女性不孕患者血清中這6種抗生殖免疫抗體檢測(cè)結(jié)果，了解抗生殖免疫抗體的檢測(cè)能否為女性不孕的臨床診斷及治療提供幫助。現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 經(jīng)海南省婦幼保健院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)后，選取2017年1月～2019年2月在本源就診的女性不孕癥患者。納入標(biāo)準(zhǔn)：①原發(fā)或繼發(fā)不孕，不孕期>2年；②符合《婦產(chǎn)科學(xué)》中不孕的診斷標(biāo)準(zhǔn)；③夫妻性生活正常，丈夫精液正常；④患者及家屬知情同意。排除標(biāo)準(zhǔn)：①有肝腎功能障礙、惡性腫瘤、自身免疫性疾病等；②近3個(gè)月內(nèi)有激素治療史。共收集女性不孕癥患者573例(不孕組)，年齡(29.75±8.15)歲，BMI(22.80±2.60)kg/m2，其中原發(fā)性不孕370例、繼發(fā)性不孕203例。同時(shí)選取有正常妊娠史婦女200例作為對(duì)照組，年齡(30.10±6.43)歲，BMI(22.97±2.43)kg/m2。兩組年齡、BMI具有可比性。

1.2 6種抗生殖免疫抗體檢測(cè)方法 在研究對(duì)象清早空腹時(shí)，分別抽取外周靜脈血4 mL；自然凝集后，以3 000 r/min離心15 min，分離上清液，于-60 ℃冰箱中凍存?zhèn)溆谩２捎瞄g接ELISA法檢測(cè)血清AsAb、AEmAb、AZpAb、AhCGAb、ACPAb、ATAb，所用試劑盒均購(gòu)于中美合資北京貝爾生物工程有限公司，操作過(guò)程嚴(yán)格按照說(shuō)明書步驟進(jìn)行[7]。應(yīng)用雷杜RaytoRT-2100C酶標(biāo)分析儀(上海艾研生物科技有限公司)檢測(cè)6種抗體在波長(zhǎng)450 nm時(shí)的吸光度(OD)值，凡樣品孔OD值﹥1即為陽(yáng)性。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)軟件。計(jì)數(shù)資料以百分率表示，組間比較行χ2檢驗(yàn)。P≤0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 不孕組和對(duì)照組6種血清抗生殖免疫抗體比較 不孕組血清AsAb、AEmAb、AZpAb、AhCGAb、ACPAb、ATAb陽(yáng)性率均高于對(duì)照組(P均<0.05)，見(jiàn)表1。

表1 不孕組和對(duì)照組6種血清抗生殖免疫抗體陽(yáng)性率比較(%)

注：與對(duì)照組比較，*P<0.05。

2.2 不孕組不同年齡患者6種血清抗生殖免疫抗體比較 見(jiàn)表2。

表2 不孕組不同年齡患者6種血清抗生殖免疫抗體比較(%)

注：與年齡≥30歲者比較，P均﹥0.05。

2.3 不孕組原發(fā)性和繼發(fā)性患者6種血清抗生殖免疫抗體比較 見(jiàn)表3。

表3 不孕組原發(fā)性和繼發(fā)性患者6種血清抗生殖免疫抗體比較(%)

注：與繼發(fā)性不孕者比較，*P<0.05。

3 討論

對(duì)育齡婦女而言, 不孕癥是臨床常見(jiàn)的疾病。隨著生活節(jié)奏的加快以及人們生活方式的改變，女性不孕的發(fā)病率呈逐年上升趨勢(shì)，不僅降低了女性的生活質(zhì)量，還影響了婚后家庭和睦[8]。據(jù)統(tǒng)計(jì)[9]，不明原因造成的不孕患者依然占10%～20%。有研究表明，患者自身生殖免疫情況與不明原因?qū)е碌牟辉邪Y之間存在密切聯(lián)系[10]。生殖免疫抗體可通過(guò)多種途徑干預(yù)正常的妊娠過(guò)程，如降低精子活性、阻礙精卵結(jié)合、阻礙受精卵著床、抑制胚胎發(fā)育等；在體內(nèi)逐漸增多的生殖免疫抗體不僅會(huì)造成不孕,還會(huì)導(dǎo)致不良妊娠結(jié)局,對(duì)患者與胎兒的生命健康造成極大的威脅[11]。

AsAb是最常見(jiàn)的抗生殖免疫抗體，由于免疫耐受和女性生理屏障等因素，女性一般不產(chǎn)生AsAb。但如果性生活發(fā)生在女性生殖道黏膜破損時(shí)，精子抗原極易穿過(guò)破損的黏膜上皮屏障，刺激B淋巴細(xì)胞產(chǎn)生AsAb[12]。AsAb可從多個(gè)途徑造成不孕和流產(chǎn)，如影響精子的運(yùn)送、降低精子活性，抑制精子穿透宮頸黏液、放射冠和透明帶，阻礙精卵結(jié)合等[13]。AEmAb是一種自身抗體，通過(guò)與子宮內(nèi)膜中的抗原結(jié)合發(fā)生一系列免疫病理反應(yīng)。例如：激活補(bǔ)體系統(tǒng)來(lái)?yè)p傷子宮內(nèi)膜腺體功能，降低糖原的分泌等，從而使胚胎獲得營(yíng)養(yǎng)不足，受精卵著床和胚囊發(fā)育受阻，最終造成不孕及早期流產(chǎn)[14,15]。hCG是一種由胎盤合體滋養(yǎng)細(xì)胞分泌的、用來(lái)維持早期妊娠的糖蛋白激素。AhCGAb則干擾hCG對(duì)胎兒的生理保護(hù)，致使流產(chǎn)的發(fā)生[16]。AZpAb是女性體內(nèi)針對(duì)自身透明帶組織產(chǎn)生的抗體，可以阻礙精子穿過(guò)透明帶與卵子結(jié)合，從而影響受精和受精卵著床[17]。反復(fù)和習(xí)慣性流產(chǎn)的患者中ACPAb陽(yáng)性率較高，可見(jiàn)ACPAb與流產(chǎn)密切相關(guān)，其損傷機(jī)制主要有激活血小板凝集系統(tǒng)促胎盤供血凝集、收縮血管、降低胎盤血流量等[18]。

本研究結(jié)果顯示，不孕組血清AsAb、AEmAb、AZpAb、AhCGAb、ACPAb、ATAb陽(yáng)性率均高于對(duì)照組，說(shuō)明血清生殖免疫抗體升高是導(dǎo)致女性不孕的因素之一；不孕組年齡<30歲與≥30歲患者血清AsAb、AEmAb、AZpAb、AhCGAb、ACPAb、ATAb陽(yáng)性率比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，提示生殖免疫抗體作為檢測(cè)女性不孕指標(biāo)時(shí)不受年齡的影響。繼發(fā)性不孕患者血清AEmAb、AhCGAb、ACPAb陽(yáng)性率高于原發(fā)性不孕患者，血清AsAb、AZpAb、ATAb陽(yáng)性率比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。這表明在繼發(fā)性不孕進(jìn)展中，AEmAb、AhCGAb和ACPAb可能發(fā)揮著較大的作用；其原因可能是子宮內(nèi)膜受損能促進(jìn)AEmAb、AhCGAb 的產(chǎn)生，而造成子宮內(nèi)膜受損最常見(jiàn)的原因就是患者流產(chǎn)，所以繼發(fā)性不孕者體的AEmAb、AhCGAb陽(yáng)性率高；而ACPAb陽(yáng)性的孕婦在妊娠早期易反復(fù)流產(chǎn)，后期易導(dǎo)致胎兒宮內(nèi)死亡，所以繼發(fā)性不孕患者ACPAb陽(yáng)性檢出率高于原發(fā)性不孕患者。由此可見(jiàn)，生殖免疫抗體在女性不孕的過(guò)程中有較高的陽(yáng)性表達(dá)率，是影響生殖的重要免疫因素，且部分生殖免疫抗體對(duì)區(qū)別原發(fā)性和繼發(fā)性不孕癥也有一定的臨床價(jià)值。