納米硒和大蒜油對(duì)公兔生長(zhǎng)、養(yǎng)分消化和精液品質(zhì)的影響

隨著我國(guó)家兔產(chǎn)業(yè)迅速發(fā)展，急需在應(yīng)用研究方面得到相應(yīng)突破。隨著納米技術(shù)的應(yīng)用，納米顆粒可以作為日糧中微量礦物質(zhì)的補(bǔ)充來(lái)源，這些微量礦物質(zhì)具有一些不同于普通礦物質(zhì)的新特性（張南南等，2017）。硒是動(dòng)物生長(zhǎng)、繁殖、激素生成、生理參數(shù)和代謝及體內(nèi)外器官必不可少的微量元素。硒可以以有機(jī)、無(wú)機(jī)或納米顆粒的形式進(jìn)行補(bǔ)充，但硒納米粒子與其他硒源相比具有效率相當(dāng)、生物利用度高、催化效率高、吸附能力強(qiáng)、毒性低等特點(diǎn)（付學(xué)鋒等，2008）。硒可以提高動(dòng)物生產(chǎn)性能和抗氧化狀態(tài)，大蒜油具有促進(jìn)生長(zhǎng)、繁殖、激素分泌和動(dòng)物新陳代謝的功能。飼糧中添加0.5 g/kg大蒜油對(duì)家兔睪丸重量、抗氧化狀態(tài)和睪酮激素有積極影響（El-Desoky N等，2017）。大蒜油還可以改善家兔免疫反應(yīng)，降低血脂和肝臟的脂質(zhì)過(guò)氧化，增加肝臟抗氧化活性。家兔日糧硒水平具有很大差異，添加水平從0.05～0.4 mg/kg（Amer等，2019）。關(guān)于硒在雄性家兔營(yíng)養(yǎng)中的生物學(xué)價(jià)值有待進(jìn)一步研究。本研究主要比較了納米硒或大蒜油及二者組合對(duì)雄性家兔營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化率、精液質(zhì)量、睪酮和血液代謝物的影響，以期為其在雄性家兔中的應(yīng)用提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)動(dòng)物、日糧和飼養(yǎng)管理 將160只新西蘭白兔（120日齡、雄性、普通級(jí)）隨機(jī)分為4組，每組40只（10只/重復(fù)）。試驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)許可證：SCXK（魯）20150001，試驗(yàn)動(dòng)物質(zhì)量合格證：0002026。對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)日糧，大蒜油組在基礎(chǔ)日糧中添加600 mg/kg大蒜油，納米硒組在基礎(chǔ)日糧中添加0.4 mg/kg納米硒，大蒜油+納米硒組在基礎(chǔ)日糧中添加0.4 mg/kg納米硒和600 mg/kg大蒜油，試驗(yàn)從家兔120日齡開(kāi)展到180日齡。日糧配方及營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表1。采用不銹鋼代謝籠（寬×長(zhǎng)×高：44 cm×50 cm×35 cm），配置自動(dòng)飲水器和手動(dòng)喂料機(jī)，在整個(gè)試驗(yàn)期間，試驗(yàn)環(huán)境每天光照12 h，黑暗12 h，室內(nèi)自然通風(fēng)，室內(nèi)溫度26～31℃，相對(duì)濕度為45%～65%。在試驗(yàn)周期內(nèi)，每周稱量一次家兔體重，記錄每周飼料用量，試驗(yàn)結(jié)束后計(jì)算日增重、日采食量和料重比。

表1 日糧原料組成及營(yíng)養(yǎng)成分

1.2 養(yǎng)分消化試驗(yàn) 試驗(yàn)結(jié)束前4 d開(kāi)展消化試驗(yàn)，每組選擇20只兔子隨機(jī)單獨(dú)在代謝籠中飼養(yǎng)，糞便和尿液分離。4 d內(nèi)每天記錄采食量，并收集每個(gè)代謝籠兔子的糞便，匯總、稱重，-20℃保存。糞便樣品在60℃干燥48 h，同時(shí)收集飼料樣品。飼料和糞樣用于分析常規(guī)養(yǎng)分。

養(yǎng)分消化率%=（養(yǎng)分?jǐn)z入量-糞養(yǎng)分含量）/養(yǎng)分?jǐn)z入量×100。

1.3 精液質(zhì)量與血液指標(biāo) 試驗(yàn)結(jié)束時(shí)采用假陰道收集家兔精液，記錄體積，用伊紅美藍(lán)染色法對(duì)200個(gè)精子細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)，評(píng)估活精子、死精子和異常精子占比。完整或部分紫紅色的精子細(xì)胞判定為死精，沒(méi)有染色的精子細(xì)胞判定為活精。采用光學(xué)顯微鏡，在100×放大倍數(shù)下，對(duì)精液標(biāo)本在多個(gè)視野下進(jìn)行直線運(yùn)動(dòng)精子百分率的判定。每個(gè)重復(fù)選擇10只家兔耳緣靜脈采血10 mL，分離血清，樣品用于測(cè)定尿素氮、尿素、肌酸酐和睪酮水平以及谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）活力。

1.4 統(tǒng)計(jì)分析 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析采用2×2方差分析的方法，試驗(yàn)中兩個(gè)主因素是納米硒和大蒜油，利用SAS軟件一般線性模型分析納米硒、大蒜油的主要作用，以及納米硒與大蒜油之間的相互作用。用Ducan’s法進(jìn)行多重比較，P＜0.05表示差異顯著，0.05＜P＜0.1表示有差異顯著趨勢(shì)。

2 結(jié)果與分析

2.1 生長(zhǎng)性能 由表2可知，在整個(gè)試驗(yàn)期間，動(dòng)物沒(méi)有死亡，總體健康狀況良好，與不添加硒組相比，添加納米硒組動(dòng)物的末重和日增重均顯著增加（P＜0.05）。各處理組對(duì)采食量無(wú)顯著影響（P＞0.05），但與不添加硒組相比，添加納米硒組的料重比得到顯著改善（P＜0.05）。

2.2 養(yǎng)分消化 在試驗(yàn)周期內(nèi)（120～180 d），日糧添加納米硒、大蒜油或其組合對(duì)公兔的干物質(zhì)、有機(jī)物、粗蛋白質(zhì)和粗纖維消化率均有影響（表3）。日糧單獨(dú)添加納米硒顯著提高粗脂肪消化率（P＜0.05），增加干物質(zhì)、有機(jī)物、粗蛋白質(zhì)和粗纖維的消化率，但與不添加硒組相比，這些項(xiàng)目的影響均不顯著（P＞0.05）。日糧單獨(dú)添加大蒜油與未添加組相比顯著提高干物質(zhì)、有機(jī)物、粗蛋白質(zhì)、粗脂肪、粗纖維消化率（P＜0.05）。此外，納米硒與大蒜油對(duì)干物質(zhì)、有機(jī)物、粗蛋白質(zhì)、粗脂肪和粗纖維消化率的影響具有顯著交互作用（P＜ 0.05）。

表2 納米硒和大蒜油對(duì)公兔生長(zhǎng)性能的影響

2.3 精液質(zhì)量 由表4可知，在試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，日糧添加納米硒、大蒜油或其組合均顯著增加兔子的精液量、精子存活率和精子活力（P＜0.05）。納米硒與大蒜油對(duì)精液量有顯著影響（P＜0.05），但對(duì)精子存活率無(wú)顯著影響（P＞0.05）。納米硒、大蒜油及其組合對(duì)精液pH無(wú)顯著影響（P＞0.05）。與不添加硒和大蒜油的雄性家兔相比，添加硒和大蒜油的雄性家兔精子異常率顯著降低（P＜0.05）。但納米硒與大蒜油對(duì)雄性家兔精子異常率具有顯著交互作用趨勢(shì)（P=0.06）。

2.4 血液生化指標(biāo) 由表5可知，飼喂納米硒或大蒜油或兩者混合飼料的兔子，與未添加組相比，血清ALT和AST活性顯著降低（P＜0.05）。與未添加硒組相比，添加納米硒、大蒜油或其組合對(duì)家兔血清尿素氮、尿素和肌酸酐均顯著降低（P＜0.05）。另一方面，大蒜油和納米硒對(duì)血清肌酸酐水平的影響無(wú)顯著交互效應(yīng)（P＞0.05）。日糧同時(shí)添加大蒜油和納米硒較單獨(dú)添加這兩種物質(zhì)顯著提高了血清睪酮水平（P＜0.05），同時(shí)大蒜油和納米硒對(duì)血清睪酮水平的影響具有顯著交互效應(yīng)（P＜0.05）。

表3 納米硒和大蒜油對(duì)雄性家兔養(yǎng)分消化率的影響

表4 納米硒和大蒜油對(duì)雄性家兔精液質(zhì)量的影響

表5 納米硒和大蒜油對(duì)雄性家兔血液生化指標(biāo)的影響

3 討論

硒具有重要的生物學(xué)功能，是正常動(dòng)物生長(zhǎng)繁殖所必需的元素，可以調(diào)控機(jī)體能量、蛋白質(zhì)合成、代謝及氧化應(yīng)激。目前關(guān)于家兔對(duì)硒的需要量推薦標(biāo)準(zhǔn)不一，如De Blas報(bào)道，在家兔飼料中添加少量硒（0.05 mg/kg）是可行的，而Strucklec等（1994）報(bào)道，在雌性新西蘭白兔日糧中添加0.1和0.3 mg/kg的硒可以促進(jìn)生長(zhǎng)，提高繁殖性能。本研究中，在日糧中添加0.4 mg/kg納米硒再補(bǔ)充大蒜油可以提高公兔的體重，這種作用可能與納米硒單獨(dú)或與大蒜油聯(lián)合使用可提高營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化率的能力有關(guān)。硒和植物源添加劑可體現(xiàn)出抗氧化活性，改善了日糧營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化和吸收（Mahima等，2012），從而提高本研究中家兔的生長(zhǎng)性能和生產(chǎn)效率。

關(guān)于納米硒或硒源對(duì)家兔營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化率的影響，目前相關(guān)試驗(yàn)研究還很有限。日糧添加0.4 mg/kg納米硒可以顯著改善雄性家兔干物質(zhì)、有機(jī)物、粗蛋白質(zhì)、粗脂肪的消化率，其原因可能與硒提高家兔抗熱應(yīng)激能力有關(guān)。此外，Saleh等（2013）的研究顯示，與對(duì)照組相比，在家兔日糧中添加亞麻仁油和0.3 mg/kg硒可顯著提高蛋白質(zhì)消化率和能量利用率，分別達(dá)到20%和11%。但與本研究中沒(méi)有添加大蒜油的處理組比較，添加大蒜油也可以提高家兔養(yǎng)分消化率，同時(shí)納米硒與大蒜油對(duì)養(yǎng)分消化率的影響具有交互效應(yīng)。

在試驗(yàn)結(jié)束時(shí)收集的精液中，納米硒組在精液量、精子存活率和精子活力各方面均有顯著提高。硒通過(guò)提高精子質(zhì)量和數(shù)量來(lái)改善繁殖性能和 抗氧化應(yīng)激（Abdulrashid 和 Juniper，2016）。與熱應(yīng)激條件下的對(duì)照組相比，添加硒后公兔的精液量、運(yùn)動(dòng)性、精子濃度、活精子數(shù)和正常精子數(shù)均顯著增加（Kamel，2012）。在本研究中，與未添加大蒜油組相比，在60 d的試驗(yàn)日糧中添加大蒜油可以增加精液量、精子存活率和精子活力。大蒜油對(duì)精液量和精子質(zhì)量的積極影響可能是通過(guò)抗氧化防御機(jī)制，如調(diào)節(jié)細(xì)胞色素P450酶（Ghalehkandi，2014）。

此外，日糧添加納米硒顯著降低了血清尿素、肌酸酐、尿素氮、谷丙轉(zhuǎn)氨酶和谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性，并提高血清睪酮水平，這些結(jié)果表明，納米硒可以改善家兔的肝腎功能，從而減輕環(huán)境高溫的不利影響，這與Kamel（2012）的結(jié)果一致。

4 結(jié)論

日糧單獨(dú)添加0.4 mg/kg納米硒或600 mg/kg大蒜油或其混合物可以提高公兔營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化率、改善肝臟和腎臟功能及精液質(zhì)量，大蒜油和納米硒對(duì)上述指標(biāo)的改善作用具有交互效應(yīng)。