熒光定量技術檢測牛奶中四環素類藥物殘留準確性的研究與探討

文/賈 濤 方 芳 鄭君杰 孫志偉 盧春香

（北京市飼料監察所）

四環素類藥物包含四環素、金霉素、土霉素、強力霉素，為廣譜抗生素，主要用于治療奶牛立克次氏體、衣原體、支原體等致病微生物感染病癥，多為添加在飼料和飲用水中使用或注射使用。奶牛用藥后，四環素類藥物會殘留在牛奶中，對人類健康造成危害，尤其是對嬰幼兒的身體健康危害更為突出，其危害主要表現在對嬰幼兒的肝臟、腎臟、牙齒與骨骼等方面的影響。因此，牛奶中四環素類藥物的快速檢測尤為重要，本試驗利用熒光定量技術檢測牛奶中四環素類藥物殘留，并與儀器法比較，以研究其準確性。

1 材料與儀器

1.1 試驗材料

四環素類熒光定量檢測卡。

1.2 儀器

移液器（移液槍）、計時器、熒光免疫定量分析儀（型號：FQ-S1）。

2 檢測方法

2.1 檢測原理

采用競爭性免疫熒光層析法檢測目標物的殘留濃度，熒光標記的抗體預先包被在釋放墊上。當待測樣品滴加在加樣區時，樣品中的目標物在毛細滲移的過程中，與熒光標記的特異性單克隆抗體結合，抑制了抗體與T區包被抗原的結合，使T區熒光減弱，利用免疫熒光定量分析儀讀取T線與C線位置的熒光強度，通過儀器內置的標準曲線即可計算出樣品中靶標物質的含量。

2.2 樣品制備

空白樣品：生鮮乳（牛奶），在檢測時提前恢復至室溫，并充分搖勻樣品（奶樣不能有結塊、酸味或沉淀等性狀）。

添加樣品：向空白樣品加入四環素類標準品至所需濃度。

2.3 最低檢測限的測定

取20 份空白生鮮乳樣品，打開鋁箔袋，取所需量的金標微孔和試紙條，做好標記，并置于桌面上（取出所需微孔和檢測卡，立即密封鋁箔袋，以防受潮）；……