東莞市中華鱉養(yǎng)殖病害調(diào)查與分析

王曉斌

隨著養(yǎng)鱉業(yè)的發(fā)展，鱉的飼養(yǎng)密度大幅提高，病害逐漸增多，危害日漸增強(qiáng)，疾病的爆發(fā)迅速、傳染性強(qiáng)，病因難明，且缺乏有效的治療措施和預(yù)防手段，給養(yǎng)殖場(chǎng)造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失，病害問(wèn)題已成為限制中華鱉養(yǎng)殖業(yè)健康發(fā)展的主要瓶頸。為了掌握中華鱉病害發(fā)生情況，2018年，筆者在東莞的多個(gè)中華鱉養(yǎng)殖場(chǎng)開展病害調(diào)查工作，并進(jìn)行連續(xù)的監(jiān)測(cè)，得到一些啟發(fā)，本文就2018年中華鱉病害動(dòng)態(tài)情況整理如下：

一、調(diào)查的方法

在虎門、中堂、謝崗幾個(gè)主要養(yǎng)殖場(chǎng)內(nèi)設(shè)置監(jiān)控區(qū)域，采集病鱉樣品進(jìn)行檢測(cè)分析。監(jiān)控養(yǎng)殖面積達(dá)683畝，其中虎門監(jiān)控區(qū)域面積45畝，中堂監(jiān)控區(qū)域面積90畝，謝崗監(jiān)控區(qū)域面積528畝。每個(gè)監(jiān)控區(qū)域有專人負(fù)責(zé)巡撿，記錄養(yǎng)殖水質(zhì)、死亡記錄表。監(jiān)測(cè)時(shí)段為全年，重點(diǎn)是二三四季度（從5月至12月），采集到中華鱉樣品確診病害有9種：腐皮病、穿孔病、白底板病、紅底板病、紅脖子病、出血性敗血癥、白斑病（真菌病）、鐘形蟲病（寄生蟲病）等。

二、調(diào)查的措施

1.實(shí)地跟蹤檢查。監(jiān)測(cè)區(qū)塊每周的養(yǎng)殖水質(zhì)（酸堿度、溶氧、氨氮、水溫、氣溫）以及登記發(fā)病中華鱉的主要癥狀、發(fā)病率、死亡率。

2.采集樣本檢測(cè)。在病害多發(fā)季節(jié)，對(duì)養(yǎng)殖中華鱉每周1檢，病害少發(fā)季節(jié)每?jī)芍? 檢。在養(yǎng)殖基地實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行初檢，然后送市級(jí)實(shí)驗(yàn)室復(fù)檢或省級(jí)研究機(jī)構(gòu)專家鑒定確診。

三、檢測(cè)的方法

主要采用梅里埃細(xì)菌鑒定法。Vitek全自動(dòng)微生物檢測(cè)系統(tǒng)在中華鱉細(xì)菌性疾病的檢測(cè)中起到重要作用。Vitek對(duì)細(xì)菌的鑒定是以每種細(xì)菌的微量生化反應(yīng)為基礎(chǔ)，通過(guò)微生物鑒定系統(tǒng)分析而得出結(jié)果。具體的操作如下：

1.鑒定前的準(zhǔn)備

（1）平板培養(yǎng)基的制做（主要培養(yǎng)病灶細(xì)菌使用）。稱取培養(yǎng)基藥品，放入適當(dāng)大小的錐形瓶中， 用量筒取一定量蒸餾水倒入燒杯中，在放有石棉網(wǎng)的電爐上小火加熱，并用玻棒攪拌，以防液體溢出。待藥品完全溶解后，停止加熱。錐形瓶加好棉塞或試管帽，再包上一層防潮紙，用棉繩系好。

（2）滅菌。上述裝有培養(yǎng)基溶液的錐形瓶及培養(yǎng)皿（若干）按規(guī)定的條件及時(shí)進(jìn)行滅菌。普通培養(yǎng)基為121℃20min，以保證滅菌效果和不損傷培養(yǎng)基的有效成份。

（3）倒平板。將需倒平板的培養(yǎng)基，冷卻到45～50℃，立刻倒平板，待凝固后，取舊報(bào)紙包裝存放，等候使用。

2.培養(yǎng)病原菌。從采集的病鱉樣本中取肝臟、腎臟、腸道、脾臟、體表潰爛處等病灶組織劃板，進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)。劃板時(shí)第一次劃線及以后每次劃線前都要灼燒，第一次灼燒后要冷卻后才能伸入菌液，以后劃線不用沾菌液，但要灼燒，劃線時(shí)第一區(qū)域不能與最后區(qū)域相連，劃線時(shí)力度不能過(guò)大。分離到多種菌株后，還要進(jìn)行病原菌的純培養(yǎng)。

3.對(duì)純培養(yǎng)后的病原菌進(jìn)行革蘭氏染色，確定陰性或陽(yáng)性菌。步驟包括：初染、媒染、脫色、復(fù)染等四個(gè)步驟。染色后細(xì)菌與環(huán)境形成鮮明對(duì)比，可以清楚地觀察到細(xì)菌的形態(tài)、排列及某些結(jié)構(gòu)特征，而用以分類鑒定。未經(jīng)染色之細(xì)菌，由于其與周圍環(huán)境折光率差別甚小，故在顯微鏡下極難觀察陽(yáng)性紫色陰性紅色。

4.將手工分離的待檢菌的純菌落制成符合一定濁度要求的菌懸液，經(jīng)充填機(jī)將菌懸液注入（陰性/陽(yáng)性）試卡內(nèi)，封口后放入鑒定儀讀數(shù)器/恒溫培養(yǎng)箱中，在2-18h即可完成大部分細(xì)菌的鑒定。

運(yùn)用Vitek手段，在病鱉體內(nèi)鑒定到有：產(chǎn)氣腸桿菌、嗜水氣單胞菌、嗜水/豚鼠氣胞菌、弗氏檸檬酸桿菌、少動(dòng)鞘氨醇單胞菌、陰溝腸桿菌復(fù)合菌、嗜麥芽窄食單胞菌、星座鏈球菌咽炎滅種、松鼠葡萄菌、溫和氣單胞菌、大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌肺炎亞種等多種細(xì)菌。此類細(xì)菌可引起腐皮病、穿孔病、紅脖子病、紅底板病、出血性敗血病等，同時(shí)還可能會(huì)與其它病原作用形成并發(fā)癥。

四、分析與結(jié)論

在對(duì)中華鱉病害長(zhǎng)達(dá)12個(gè)月的連續(xù)監(jiān)測(cè)中：1-3月，水溫低，中華鱉處于冬眠狀態(tài)，病害較少，造成危害相對(duì)較小。4月，親本從冬眠中蘇醒，體質(zhì)較差，開春后易感染疾病，主要是患冬眠蘇醒癥。外塘鱉病害主要集中在5-10月，隨著氣溫的升高，細(xì)菌等病原微生物活動(dòng)增強(qiáng)，發(fā)病程度有所提高，溫室養(yǎng)殖由于放養(yǎng)密度相對(duì)較高，更易相互撕咬，且投喂集中、水質(zhì)易惡化，極易感染細(xì)菌而發(fā)病，發(fā)病最多的月份是八月，病鱉采集較多。

對(duì)導(dǎo)致中華鱉發(fā)病的因素可歸為環(huán)境因素（溫度、水質(zhì)等）、人為操作環(huán)素（密度、飼料管理和損傷）、外在生物因素（病原）和內(nèi)在因素（機(jī)體免疫力）。造成中華鱉病害的原因有：1.養(yǎng)殖環(huán)境惡化，如水質(zhì)中氨氮偏高;2.氣候反常，如雷暴天氣對(duì)養(yǎng)殖鱉造成驚嚇，而產(chǎn)生應(yīng)激;3.養(yǎng)殖品種種質(zhì)退化等，稚鱉出現(xiàn)畸形，免疫力下降。4.造成各種病害的致病菌有以下數(shù)種：

（1）腐皮病病原：出氣單胞菌（ Aeromonas SP。）、假單胞菌（ P send om onas SP。）和無(wú)色桿菌（ A chrom obacttr）。

（2）穿孔病病原：產(chǎn)氣單胞桿菌（ Aeromona8）和產(chǎn)堿菌（ A lcalig emessp.）。

（3）紅脖子病病原：嗜水產(chǎn)氣單胞桿菌單胞亞種（Aeromonashydoplila subsp hydroplila）。

（4）紅底板（赤斑病）病原：點(diǎn)狀產(chǎn)氣單胞桿菌長(zhǎng)狀亞種（Ammotata subsp， punctate）。

（5）出血病病原可能是病毒。但從病鱉分離到的強(qiáng)毒力的產(chǎn)氣單胞桿。

（6）疥瘡病病原：點(diǎn)狀產(chǎn)氣單胞桿菌點(diǎn)狀亞種（ Aeromonas punctata sub， punctata）。

五、對(duì)策

鱉病具有潛伏期長(zhǎng)、并發(fā)癥多、繼發(fā)性感染普遍和治愈率低等特點(diǎn)。在生產(chǎn)中，往往還存在一病多癥或一癥多病的復(fù)雜情況，病因難以判斷，在治療的過(guò)程中，由于細(xì)菌對(duì)于抗菌藥物作用的耐受性，藥物的化療作用會(huì)明顯下降，再加大用量或改變藥物，病菌再異變成超級(jí)細(xì)菌，形成一個(gè)惡性循環(huán)，給病害防治工作帶來(lái)難度。

中華鱉病害防治，目前的主要趨勢(shì)是以免疫預(yù)防為主體，構(gòu)建生態(tài)和綜合預(yù)防措施相互結(jié)合的病害預(yù)防與控制體系，堅(jiān)持以“防為主、防治結(jié)合、防重于治”的原則，才能收到較好的效果。

1.營(yíng)造自然生態(tài)環(huán)境。遵循中華鱉習(xí)性，因地制宜，因勢(shì)利導(dǎo)，養(yǎng)殖場(chǎng)建設(shè)布局要科學(xué)、合理。（1）排灌渠道獨(dú)立分開，自成系統(tǒng);（2）池塘建得齊整劃一，都是長(zhǎng)方形;（3）池塘設(shè)置曬臺(tái)，以供鱉休憩、覓食和嬉戲。

2.加強(qiáng)投食管理。注意調(diào)理腸胃，投喂天然優(yōu)質(zhì)飼料。提高中華鱉的體能、活力和免疫力，以起到防治養(yǎng)殖病害的作用。

3.注重現(xiàn)代技術(shù)研究，提升養(yǎng)殖質(zhì)量。做好有關(guān)生態(tài)養(yǎng)殖研究，讓養(yǎng)殖贏在技術(shù)革新上。隨著生活水平的提高，消費(fèi)觀念正發(fā)生轉(zhuǎn)變。綠色、有機(jī)、健康的食品成為當(dāng)下市場(chǎng)消費(fèi)需求。科學(xué)合理的進(jìn)行防治，盡量減少對(duì)周圍環(huán)境的污染，在整個(gè)生態(tài)養(yǎng)殖的過(guò)程將避免很多問(wèn)題的產(chǎn)生，同時(shí)也提高了效率以及收益。