慢性丙型肝炎患者血清IL-17A、FGF和IL-7水平與丙型肝炎病毒感染自發清除臨床意義探討*

潘美民，李文娟，蔣芳清，楊麗暉，譚永衛，何 娟，阮建文，蔡春琳

丙型肝炎病毒（HCV）感染是引起慢性肝炎、肝硬化和肝癌的重要原因之一[1]。據世界衛生組織估計，全球約有2億人感染過HCV，感染范圍非常廣，呈世界性分布。在急性HCV感染階段，病毒自發清除率約為15%～45%之間，感染進展為慢性丙型肝炎（CHC）的比例在55%～85%之間[2]。我國屬于HCV感染高發區之一。一旦人體感染HCV后，便很難清除病毒，感染持續將進展成為慢性丙型肝炎[3]。有研究表明，丙型肝炎肝硬化易發展為肝癌[4]。部分急性HCV感染者可通過固有免疫和適應免疫自發清除病毒，但其具體作用機制尚不明確[5]。本研究檢測了HCV感染者血清白細胞介素-17A（interleukin-17A，IL-17A）、成纖維細胞生長因子（fibroblast growth factor，FGF）和IL-7水平，以探討它們與HCV感染自發清除的關系。

1 資料與方法

1.1 一般資料 2017年1月～2018年1月我院診治的HCV感染者70例，符合中華醫學會肝病學分會制定的《丙型肝炎防治指南（2015年更新版）》的標準[6]，其中慢性丙型肝炎患者52例，男性27例，女性25例；平均年齡為（56.2±5.9）歲。HCV感染自發清除者18例，男性10例，女性8例；平均年齡為（57.5±7.0）歲。HCV感染自發清除定義為血清抗-HCV陽性，而血清HCV RNA陰性，血生化指標正常。排除標準：①合并甲型肝炎、乙型肝炎病毒感染；②妊娠、肝腎功能不全、心腦疾病、糖尿病；③有酒精性肝病、自身免疫性肝病。另選擇30名健康人作為對照組，男性17例，女性13例；平均年齡為（56.6±7.8）歲。三組人群在年齡和性別等一般資料方面比較，差異均無統計學意義（P＞0.05），具有可比性。本研究經我院醫學倫理委員會審核通過，受試者簽署書面知情同意書。

1.2 檢測 使用美國貝克曼庫爾特有限公司生產的AU5800全自動生化分析儀檢測ALT和AST；使用美國雅培公司提供的i200全自動電化學發光免疫分析儀檢測外周血抗-HCV；采用RT-PCR法檢測HCV RNA（江萊生物有限公司，T100 PCR儀由美國生命醫學產品有限公司生產）；采用ELISA法檢測血清細胞因子IL-17A、FGF和IL-7水平（HBS-1096A酶標儀為南京德鐵實驗設備有限公司生產）。

1.3 統計學方法 應用SPSS 22.0軟件處理數據，計數資料的比較采用x2檢驗，計量資料以（±s）表示，采用獨立樣本t檢驗，三組間計量資料的比較采用單因素方差分析，P＜0.05為差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 慢性丙型肝炎患者與HCV感染自發清除者一般資料比較 慢性丙型肝炎患者與HCV感染自發清除者性別構成和年齡差異無統計學意義（P＞0.05，表1）；在本組慢性丙型肝炎患者中，感染HCV基因亞型以1b、2a型為主；慢性丙型肝炎患者血清ALT和AST水平顯著高于HCV感染自發清除者（P＜0.05，表2）。

表1 慢性丙型肝炎與HCV感染自發清除人群一般資料[n（%）]比較

2.2 慢性丙型肝炎患者、HCV感染自發清除者與健康人血清細胞因子水平比較 慢性丙型肝炎患者血清IL-17A、FGF和IL-7水平均顯著低于HCV感染自發清除者或健康人（P＜0.05），而HCV感染自發清除者血清IL-17A、FGF和IL-7水平也顯著低于健康人（P＜0.05，表3）。

表2 兩組血生化和病毒學指標（±s）比較

表2 兩組血生化和病毒學指標（±s）比較

與HCV感染自發清除組比，①P＜0.05

例數 HCV RNA（IU/ml） ALT（U/L） AST（U/L）慢性丙型肝炎 52 5.8±1.1 61.1±50.5① 57.0±42.8①感染自發清除 18 - 25.0±14.2 25.5±9.4

表3 三組人群血清細胞因子水平（±s）比較

表3 三組人群血清細胞因子水平（±s）比較

與健康人比，①P＜0.05；與HCV感染自發清除者比，②P＜0.05

例數 IL-17A（ng/L） FGF（ng/L） IL-7（ng/L）慢性丙型肝炎 52 0.25±0.13①② 0.51±0.13①② 0.49±0.12①②感染自發清除 18 0.75±0.14① 0.93±0.11① 0.71±0.10①健康人 30 1.35±0.12 1.49±0.12 0.99±0.12

3 討論

自HCV被發現以來，全世界已有3%人感染HCV，而其中大約15%～45%感染者在急性期可自發的清除病毒，大部分的HCV感染者將轉變為慢性丙型肝炎[7]。慢性丙型肝炎患者肝臟發生纖維化，進而轉變為肝硬化的比率大約有10%～20%，而在如此多的肝硬化患者中，每年發生肝細胞癌的患者大約有1%～5%，發生肝功能失代償的患者大約有3%～6%[8]。HCV感染的病程可由于患者自身情況的不同而不同，細胞因子的多樣性不僅影響著HCV感染的自然史，還影響了患者對病毒的自發清除。在急性HCV感染階段，患者可通過固有免疫和適應免疫自發地清除病毒，而其具體作用機制尚不明確。因此，目前如何清除病毒、防止病毒復制和傳染、控制病毒的傳播，成為降低全球HCV感染率的首要問題，不僅對提升感染者生活質量，延長感染者壽命有著十分重要的意義[9，10]，也對降低全球人群HCV感染率有重要意義。

細胞因子是細胞間信號傳遞的分子，主要通過結合相應受體來調控免疫應答、調節細胞生長、分化與效應發揮，介導炎性反應等[11]。IL-17A是由Th17、Tc17和B淋巴細胞等多種細胞分泌的炎性因子，其可誘導IL-6和TNF-α等細胞因子生成，而且IL-17A能夠產生較強的致炎效應[12]。IL-17A是Th17分泌的細胞因子，而Th17很可能在感染的早期階段誘發組織炎癥，并通過IL-17A的誘導，連接先天免疫與適應性免疫，吸引其他T細胞向感染部位聚集。有研究顯示，HCV感染者體內IL-17A有明顯下降，可能與白細胞介素和干擾素等作用有關[13]。本研究發現，慢性丙型肝炎患者、HCV感染清除者IL-17A水平較健康人明顯降低，差異具有統計學意義，說明HCV感染可引起IL-17A的變化，且以下調IL-17A水平變化為主，這可能影響了患者的抗病毒免疫功能。

本研究對堿性FGF（bFGF）進行了研究，bFGF是成纖維細胞生長因子蛋白中的一員。bFGF是人體內十分微量的一種活性物質，而且由于其擁有較廣泛的生理功能和具有十分重要的臨床應用價值，使得國內外學者高度重視對其的研究[14]。bFGF對新生血管的產生具有刺激作用，參與胚胎組織的發育、分化，對創傷愈合、組織再生具有促進作用[15]。有報道發現，bFGF能夠通過影響免疫細胞的活性，調節免疫功能，還擁有促進造血功能和調節內分泌功能的生物活性作用[16]。也有研究顯示，bFGF介導的信號轉導通路與腫瘤生長和浸潤轉移相關[17]。本研究結果顯示，健康人血清bFGF水平明顯高于慢性丙型肝炎患者或HCV感染清除者，差異具有統計學意義，而且其他細胞因子水平也同步降低，說明bFGF水平能夠對HCV的自發清除產生影響，并且能夠抑制肝臟炎癥的反應，但具體作用機制尚不明確，需要大量的實驗研究來繼續探討其復雜的作用網絡規律。

IL-7是一種多效性細胞因子，而且具有較為廣泛的免疫效應，還參與T細胞的生長、分化以及存活，同時還參與單核細胞參與的炎癥反應，對調節機體免疫防御功能具有重要的作用，并在慢性病毒性疾病的發病、病毒耐藥、慢性化過程等發揮著重要的作用[18，19]。有研究發現，在慢性病毒性感染性疾病中有一種高表達的細胞因子SOCS3，經由IL-7治療后，該細胞因子水平明顯下降，更進一步的研究表明，IL-7能夠提高IL-17A等細胞因子水平來清除病毒，對于免疫系統功能的恢復具有非常重要的作用[20-22]。本研究結果表明，健康人血清IL-7水平明顯高于慢性丙型肝炎患者和HCV自發清除者，差異具有統計學意義，說明慢性丙型肝炎患者IL-7水平下降，可能使得HCV感染患者的細胞免疫功能急劇下降而不能清除病毒，造成感染持續。

綜上所述，在HCV感染自發清除者，血清細胞因子，如IL-17A、bFGF何IL-7水平明顯高于慢性丙型肝炎患者，可見細胞因子IL-17A、bFGF和IL-7水平將影響HCV感染的自發清除過程。正常的細胞因子分泌能清除病毒，抑制肝臟炎癥反應，肝功能恢復正常。但由于本研究樣本病例較少，需要進一步擴大樣本量，以繼續后續對具體機制的深入研究。由于本研究只以血生化指標正常和血清HCV RNA陰性為HCV感染自發清除的依據，未進行肝組織學檢查，不能肯定這些人群肝病真正痊愈或根本就沒有發生肝炎。同時，對這些所謂的HCV感染自發清除病毒人群的長期隨訪也非常必要，了解他們在以后漫長的生活中肝臟情況的變化規律，如是否再發肝炎，會不會發生肝纖維化或肝硬化，甚至肝癌，都是非常重要的。