血清殼多糖酶3樣蛋白1和甲胎蛋白聯合檢測對不同肝臟疾病的診斷價值

曾光群，魏世剛，楊 成，阮 麟

(四川省彭州市人民醫院 a.檢驗科，b.消化內科，四川 成都 611930)

我國是乙肝大國，乙肝病毒是引起肝纖維化、肝硬化、肝癌等肝臟疾病的主要致死因素之一，及時對肝臟進行有效的監測非常重要，有助于早發現、早干預。肝組織活檢是檢測肝損傷的金標準，但因為是創傷性檢測方法，不利于臨床推廣應用，尋找無創的檢測技術或檢測指標就顯得更為迫切[1]。目前，臨床上主要采用甲胎蛋白(AFP)、甲胎蛋白異質體(AFP-L3)、血清透明質酸(HA)、Ⅲ型前膠原N端肽(PⅢNP)等指標分別監測肝癌、肝硬化、肝纖維化，這些指標對不同程度的肝損情況的特異性并不理想，多數患者往往需要同時檢測多種指標，從而造成一定的經濟負擔。近年來，血清殼多糖酶3樣蛋白1(CHI3L1)在不同肝臟疾病中的特異性表達備受關注[2]，有望成為檢測肝損的新指標。本研究對乙肝感染的肝纖維化、肝硬化、肝癌患者采用AFP與CHI3L1的聯合檢測，探討兩者聯合應用在不同肝臟疾病診斷中的意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料2017年3月至2018年12月我院就診的乙肝病毒感染患者147例，均符合《慢性乙型肝炎防治指南(2015年版)》[3]和《肝纖維化中西醫結合診療共識意見(2017年)》[4]或《中國臨床腫瘤學會(CSCO)原發性肝癌診療指南》[5]，且無其他嚴重器質性或免疫性、血液系統疾病、精神或認知障礙疾病。按照病情分為肝纖維化組43例，男24例，女19例，年齡(53.1±9.7)歲；肝硬化組38例，男21例，女17例，年齡(55.4±8.3)歲；肝癌組30例，男17例，女13例，年齡(56.8±9.2)歲；肝功正常組36例，男21例，女15例，年齡(53.6±10.4)歲。

1.2 方法空腹采集四組患者靜脈血5 ml，3000 r/min離心10 min，分離血清并進行檢測。雅培I2000配套試劑檢測AFP，杭州普望有限公司CHI3L1試劑盒及帝肯酶標儀檢測血清中CHI3L1的含量。操作嚴格按照SOP進行。

1.3 觀察指標檢測四組血清AFP、CHI3L1水平，單獨及聯合檢測陽性率以及對肝纖維化、肝硬化、肝癌診斷的特異性、敏感性和準確性。

1.4 統計學方法采用SPSS 22.0統計軟件分析數據。計數資料比較采用χ2檢驗。計量資料以M(Q1，Q3)表示，組間比較采用Mann-WhitnetU檢驗。診斷價值采用ROC曲線描述。P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 各組血清AFP、CHI3L1水平比較由表1可見，肝纖維化組、肝硬化組、肝癌組AFP水平均高于正常組(U分別為7.52、7.41、6.97，P<0.05)；肝硬化組與肝纖維化組AFP水平比較差異無統計學意義(U=1.97，P> 0.05)，肝癌組AFP水平高于肝纖維化組和肝硬化組(U分別為7.23、7.04，P<0.05)。肝纖維化組、肝硬化組、肝癌組CHI3L1水平均高于正常組(U分別為7.53、7.40、6.96，P<0.05)；肝硬化組、肝癌組CHI3L1水平高于肝纖維化組(U分別為7.73、7.23，P<0.05)；肝癌組CHI3L1水平高于肝硬化組(U=6.98，P<0.05)。

2.2 AFP、CHI3L1單獨與聯合檢測對不同肝臟疾病的陽性情況表2顯示，AFP+CHI3L1聯合檢測肝纖維化的陽性率高于單獨AFP(χ2=20.73，P<0.05)，聯合檢測肝癌的陽性率高于單獨CHI3L1(χ2=7.94，P<0.05)。

2.3 AFP、CHI3L1單獨與聯合檢測對不同肝臟疾病的診斷價值在肝纖維化中，AFP+CHI3L1檢測的曲線下面積(AUC)值優于AFP(Z=3.64，P<0.05)，但與CHI3L1檢測差異無統計學意義(P> 0.05)。在肝硬化中，AFP+CHI3L1檢測的AUC值優于CHI3L1(Z=2.51，P<0.05)，但與AFP檢測差異無統計學意義(P> 0.05)。在肝癌中，AFP+CHI3L1檢測的AUC值優于CHI3L1(Z=3.16，P<0.05)，但與AFP檢測差異無統計學意義(P> 0.05)。AFP、CHI3L1和AFP+CHI3L1診斷不同肝臟疾病的AUC、敏感性、特異性、準確性、陽性預測值及陰性預測值見表3和圖1。

表1 四組血清AFP、CHI3L1水平比較

a與正常組比較，P<0.05；b與肝纖維化組比較，P<0.05；c與肝硬化組比較，P<0.05

表2 AFP、CHI3L1單獨檢測與聯合檢測對不同肝臟疾病的陽性情況 [n(%)]

a與AFP+CHI3L1比較，P<0.05

表3 AFP、CHI3L1單獨與聯合檢測的診斷效能評估

圖1 三種方法檢測不同肝臟疾病的ROC曲線分析 a：肝纖維化；b：肝硬化；c：肝癌

3 討論

病毒感染、酒精等化學物質的刺激等均可引起慢性肝損傷，從而使肝內纖維組織異常增生，導致肝臟纖維化。如不及早發現進行控制，就會使肝臟出現假小葉和結節，從而引起肝硬化甚至肝癌[6，7]。由于肝損傷多具有隱匿性，易造成漏診，致使錯失早期干預的機會。肝組織穿刺活檢雖然是檢測肝損傷的金標準，但由于其創傷性并不能得到廣泛的應用；血清標志物檢測因其無創且特異性好可進行動態檢測，為目前肝損的常用檢測方法。

aFP是最常見的肝癌標志物之一。但有研究顯示[8，9]，病毒性肝炎患者隨著肝臟炎癥的逐漸加重，AFP水平會相應的升高；此外，還有部分肝癌患者的AFP水平較低甚至是陰性，從而會影響肝癌診斷的特異性。在慢性肝炎患者中，HA、PⅢNP、LN、Ⅳ-col與肝損情況呈正相關，主要用于檢測肝纖維化程度，對于肝硬化、肝癌的敏感性與特異性較差[10]。由于肝損的隱匿性，很多患者對于肝臟受損程度的判斷往往需要多項指標同時檢測才能保證其結果的準確性，這無疑給患者造成一定的經濟負擔。因此，對于尋找簡便、特異性與敏感性強的指標變得尤為重要。

CHI3L1是一種由巨噬細胞、中性粒細胞、腫瘤細胞等分泌的糖蛋白，在炎癥和組織重塑中起著重要的作用，而且其在肝臟中的表達水平遠高于其他組織[11]。據報道[12]，血清CHI3L1水平會隨著肝臟炎癥的加重而逐步升高，可作為鑒別診斷肝癌與肝硬化的標志物。目前對于AFP、CHI3L1在不同肝臟疾病的檢測敏感性、特異性等的研究較少，本研究通過聯合檢測AFP和CHI3L1來評估其在不同肝臟疾病中的應用價值。

肝纖維化組、肝硬化組與肝癌組的AFP水平高于正常組，肝纖維化組與肝硬化組的AFP水平差異無統計學意義，而肝癌組的AFP水平均高于肝纖維化組與肝硬化組。表明AFP水平可用于鑒別診斷肝癌，但是對于肝纖維化與肝硬化并無明確的區分。血清CHI3L1的結果顯示，隨著肝損由肝纖維化到肝硬化到肝癌的逐步發展，CHI3L1的指標均升高，與之前[1，12]的研究結果一致，提示了血清CHI3L1檢測可作為鑒別診斷肝纖維化、肝硬化與肝癌的潛在指標。

為了進一步評估AFP、CHI3L1、AFP+ CHI3L1檢測對不同肝損的診斷價值，本研究評估了不同檢測方法的陽性率、AUC值、特異性、敏感性等。結果顯示，AFP+CHI3L1聯合檢測的總陽性率高于AFP、CHI3L1單獨檢測，但對于不同疾病的陽性率存在差異，提示聯合檢測對于不同肝損的鑒別率較高，具有一定的臨床應用價值。對肝纖維化患者，AFP+CHI3L1檢測的AUC值優于AFP檢測，但與CHI3L1檢測并無明顯差異；在肝硬化組和肝癌組，AFP+CHI3L1檢測的AUC值優于CHI3L1檢測，但與AFP檢測并無明顯差異，提示AFP+CHI3L1的聯合檢測對不同肝臟疾病的診斷價值優于AFP和CHI3L1單獨檢測，尤其要優于CHI3L1單獨檢測。從表2中可以看出，CHI3L1單項檢測在肝纖維化中比較有意義，而在肝硬化、肝癌中CHI3L1的陽性率、敏感性、特異性等均明顯降低，這可能是由于隨著肝癌的發生，體內會產生大量的巨噬細胞與中性粒細胞，而這相應的會增加CHI3L1的分泌，從而導致CHI3L1診斷效能的下降[13]。通過對AFP、CHI3L1、AFP+CHI3L1檢測不同肝臟疾病的敏感性、特異性等進行進一步的評估，發現AFP+CHI3L1聯合檢測的敏感性、特異性均要高于CHI3L1和AFP單指標檢測。該結果顯示AFP+CHI3L1聯合檢測對不同的肝損具有較高的敏感性和特異性，提示了AFP+CHI3L1聯合檢測對于鑒別診斷不同的肝損情況具有潛在的應用價值。

綜上所述，在肝纖維化、肝硬化、肝癌患者中，血清AFP、CHI3L1的表達水平均要顯著高于健康人群。結果顯示，當AFP與CHI3L1進行聯合檢測時，其診斷不同肝臟疾病的效能要略優于AFP單項檢測，而CHI3L1單項檢測不同肝臟疾病的臨床價值有待于進一步的研究。