柚皮素治療高脂血癥的系統評價

徐 楠，馮 健，鄒坪益

0 引言

柚皮素(Naringenin，NAR)一般以柚皮苷形式存在于自然界薔薇科、蕓香科、柑橘屬植物中，藥效學研究表明，柚皮素具有抗氧化、抗腫瘤、抗炎癥損傷等多種藥理學活性[1]。高脂血癥指血漿中血清總膽固醇(Total cholesterol，TC)、三酰甘油(Triglyceride，TG)、低密度脂蛋白膽固醇(Low-density lipoprotein cholesterol，LDL-C)過高或高密度脂蛋白膽固醇(High-density lipoprotein cholesterol，HDL-C)過低，是動脈粥樣硬化、冠心病等疾病的高危因素。楊穎等[2]對高脂飲食后模型進行柚皮素干預后，認為相對模型組，柚皮素對血脂無明顯影響，而孫勝亮[3]、Chtourou等[4]認為,柚皮素干預后相對模型組血脂水平明顯下降，并認為其通過調節血脂達到抗動脈粥樣硬化作用。所以本研究通過全面收集柚皮素干預實驗的國內外文獻資料，系統評價柚皮素對血脂水平的影響，為臨床治療提供循證醫學證據。

1 對象與方法

1.1 納入標準 ①研究類型：實驗性研究，中文或英文報道。②研究對象：動物或細胞。③干預措施：實驗組，柚皮素干預組；對照組，動脈粥樣硬化模型組。④評價指標：TG、TC、LDL-C、HDL-C。

1.2 文獻篩選與數據提取 檢索中國生物醫學數據庫、中國知網、維普數據庫、萬方數據庫、PubMed、EMbase、Springer、Cochrane、Web of Science，查找柚皮素干預動物實驗的文獻，檢索時限均為從建庫至2018年12月16日，由2位研究者按照文獻納入排除標準獨立篩選文獻，按照指定內容提取資料，包括：①文獻基本信息，包括題目、摘要、第一作者、發表時間和發表雜志；②實驗組、對照組基本數據資料，包括樣本量、均數及標準差；③柚皮素的干預方式和劑量；④測量指標及測量方法。2名人員交叉核對納入文獻的數據提取結果，但結果不一致或存在分歧時請相關專家指導核實。

1.3 質量評價 對納入的文獻按照Cochrane協作網推薦的質量評估方法，用RevMan 5.3軟件進行質量評估。

1.4 統計分析 由2名評價員將各研究試驗組與對照組的均值及標準差獨立輸入RevMan 5.3軟件進行Meta分析。用I2評估異質性大小，I2≤25%表明異質性較小，25%50%表明研究結果間存在高度異質性。若研究間無異質性，采用固定效應模型進行合并分析；若存在異質性，而這些研究具有臨床同質性，則用隨機效應模型進行Meta分析，進行敏感性分析，尋找異質性來源，并驗證Meta分析穩定性。計算各個合并指標的標準化均數差SMD和95%可信區間(95%CI)，用森林圖分析各指標合并效應，并對不同劑量柚皮素干預的實驗組進行亞組分析。

2 結果

2.1 文獻檢索結果 在上述數據庫中檢索到相關文獻共462篇，按照納入排除標準共篩選到文獻16篇[2-17]，其中中文3篇，英文13篇。

2.2 納入研究的質量評估結果 根據Risk of bias對納入的16篇文獻進行質量評估，結果見圖1、圖2。

2.3 合并效應的Meta分析

2.3.1 TC水平改變 15項研究(299個動物模型)定量報道了TC各研究間有統計學異質性(P<0.01，I2=86%)，采用隨機效應模型對合并效應量進行分析，結果顯示，柚皮素干預組TC高于模型組，且差異有統計學意義(SMD=-1.42，95%CI：-2.16～-0.68)]。見圖3。

2.3.2 TG水平改變 16項研究(311個動物模型)定量報道了TG各研究間有統計學異質性(P<0.01，I2=84%)，采用隨機效應模型對合并效應量進行分析，結果顯示，柚皮素干預組TG顯著高于模型組，且差異有統計學意義(SMD=-1.37，95%CI：-2.05～-0.68)。見圖4。

圖1 偏倚風險評估結果圖

圖2 偏倚風險評估匯總

2.3.3 HDL-C水平改變 10項研究(219個動物模型)定量報道了HDL-C各研究間不具有統計學異質性(SMD=0.63，95%CI：-0.02～1.28)，P=0.06。見圖5。

2.3.4 LDL-C水平改變 5項研究(113個動物模型)定量報道了LDL-C各研究間不具有統計學異質性(SMD=-0.18，95%CI：-0.90～0.54)，P=0.62，見圖6。

2.4 發表偏倚 對本次納入的16篇文獻進行發表偏倚分析，結果提示可能存在一定發表偏倚。見圖7～圖10。

2.5 亞組分析 對不同劑量柚皮素干預的研究進行亞組分析。亞組分析結果顯示，增大劑量后，柚皮素的干預作用無顯著性改變，結果見圖11～圖14。

2.6 敏感性分析 各指標均圍繞合并效應分布，結果穩定。

圖3 柚皮素對高脂喂養模型TC的影響

圖4 柚皮素對高脂喂養模型TG的影響

圖5 柚皮素對高脂喂養模型HDL-C的影響

圖6 柚皮素對高脂喂養模型LDL-C的影響

圖11 不同劑量柚皮素干預對TG影響的亞組分析

圖12 不同劑量柚皮素干預對TC影響的亞組分析

圖13 不同劑量柚皮素干預對HDL-C影響的亞組分析

圖14 不同劑量柚皮素干預對LDL-C影響的亞組分析

3 討論

動物實驗是基礎研究和臨床實驗的橋梁，通過動物實驗初步驗證某一干預措施的有效性和安全性，可以為某一治療措施或新藥是否進入臨床階段提供證據[18]。理論上講，通過嚴格控制實驗條件的動物實驗結果應該是可重復的。但是由于實驗條件及動物種屬不一致、隨機性較差、干預措施不一致、藥物干預劑量有差異、結局指標等不統一、樣本量小等缺陷，降低了動物實驗結果的可重復性和說服力。同時，因為各個實驗設計及研究觀念不統一，結論存在爭議。Meta分析客觀評價結局指標，通過系統的評價干預結果為臨床實驗方向提供更可靠的循證依據。

自膳食柚皮素對高膽固醇喂養大鼠具有降低膽固醇的作用被報道后[17]，不斷有學者探究柚皮素與血脂水平之間的關系，但沒有統一結論。何文鳳等[5]對高脂飲食喂養后形成的大鼠模型進行研究，發現柚皮素干預使血脂明顯降低，且大鼠粥樣硬化斑塊穩定性升高。然而，Chanet等[6]研究認為，柚皮素不能改變血脂水平，而是通過其他機制對動脈粥樣硬化產生了積極影響。Kim等[17]認為，柚皮素干預3周內對血脂無影響，6周后才存在降脂作用。本次系統評價發現，柚皮素干預下，實驗組的TC、TG水平較模型組明顯下降，HDL-C、LDL-C水平無明顯影響，結果表明，柚皮素具有降血脂作用，可以治療高脂血癥。但是亞組分析結果顯示，增大柚皮素劑量不會明顯改變降脂效果，這可能是納入研究中對柚皮素劑量與療效探索的研究過少，對柚皮素有效劑量把握不明，也可能是由于柚皮素對降脂作用的有效劑量閾值低，因此，改變劑量對降脂效果無明顯影響，總之，需要大量細化的研究對其進行闡述。

隨著心血管疾病發病率和死亡率的上升，高脂血癥作為心血管疾病的高危因素，也逐漸成為基礎與臨床都需要關注的焦點。此外，Devan等[14]研究表明，脂質合成異常或脂質降解不良與包括膠質瘤在內的癌癥疾病有關，而柚皮素干預后能明顯改善這一病理環境。本研究對柚皮素在衛生保健行業的應用提供了理論支持基礎。但本文納入研究中對柚皮素的純度、聚合量等未做詳細描述，使結果可能存在一定偏差；對于不同劑量干預的模型，未對其量效關系進行深入探究，不能為研究提供更準確的生物有效劑量數據。期待今后有更大樣本、更精細、更深入的研究揭示柚皮素對高脂血癥的影響，并對其機制進行深入探索。