細胞DNA定量分析聯合宮頸細胞涂片在宮頸癌篩查中的應用價值

徐 琭 崇慶國 單錦妹

我國每年新增大約13萬的宮頸癌患者，且有約5萬例患者死于宮頸癌[1]。對宮頸上皮內瘤變進行早期診斷以及治療是防治宮頸浸潤癌的重要環節。近年來，宮頸細胞學檢測技術得到迅速的發展，特別是在制片以及取材方法上獲得了較大的進步，如用液基涂片取代常規的直接細胞涂片，用宮頸刷來取代常規的宮頸刮板[2-3]。本研究對細胞DNA定量分析聯合宮頸細胞涂片在宮頸癌篩查中的應用價值進行了分析。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2015年10月至2018年10月我院進行宮頸癌篩查且有活檢結果的3294例患者，患者無任何自覺癥狀或者出現接觸性出血、白帶異常、陰道流血癥狀?；颊吣挲g19 ～ 65歲，平均 (39.72 ± 6.41) 歲；所有患者在就診時均未處于妊娠狀態，并且均未行子宮切除手術。

1.2 方法

每位患者均同時制2張宮頸細胞涂片，其中一張采取 Feulgen 染色法，并進行細胞 DNA定量，具體方法如下：采用貝克曼z2全自動細胞像分析儀對宮頸細胞涂片進行掃描，選取大約 8000個細胞核。每個細胞核可以產生超過100個參數的特征值。全自動細胞分析儀通過分析這些細胞核的特征值，可以自動的實施分類處理。標準：①可疑：增生細胞數量占所有檢測到細胞總數量的5%～10%，或發現DNA指數≥2.5 的倍體異常細胞1～2個，應當建議患者半年后開展復查。②陰性：所有檢測到細胞中主要為正常的二倍體細胞，DNA 指數小于2.5，未發現任何倍體異常的細胞，增生細胞數量占所有檢測到細胞總數量的5%以下，建議患者定期進行宮頸癌篩查。③陽性：增生細胞數量占所有檢測到細胞總數量的10%以上，或發現超過3個的DNA指數≥2.5的倍體異常細胞，建議患者開展進一步的臨床活檢或陰道鏡檢查。另外一張采取巴氏染色進行常規的細胞學 TBS檢測，TBS 的分類標準如下：意義不明的不典型鱗狀上皮細胞(ASCUS)；正常范圍，未發現上皮內病變或者惡性病變(NILM)；低度鱗狀上皮內病變(LSIL)；非典型腺細胞(AGC)；高度鱗狀上皮內病變(HSIL)；非典型腺細胞和鱗狀細胞癌(SCC)等。

對細胞學檢查陽性或者臨床可疑的女性均開展陰道鏡檢查，且對宮頸的可疑部位采取病理活檢，病理報告分為浸潤癌、宮頸炎、CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ/原位癌。

特異性=真陰性/(真陰性+假陽性)，敏感性=真陽性/(真陽性+假陰性)，陰性預測值=真陰性/(真陰性+假陰性)，陽性預測值=真陽性/(真陽性+假陽性)。

1.3 統計學分析

2 結果

2.1 2種檢查方法與病理學結果的對照

以病理學結果作為診斷的金標準，3294例中共有慢性宮頸炎3177例，宮頸癌7例，67例CINⅠ，22例CINⅡ，21例CINⅢ。細胞學 TBS檢測對 15例宮頸癌、CINⅡ、CINⅢ患者診斷為 ASCUS，可能會由于建議復查而推遲病理學檢查，導致病情貽誤。細胞 DNA 定量分析對40例宮頸癌、CINⅡ、CINⅢ患者均檢測為陽性，3例CINⅠ患者判定結果為可疑。細胞學 TBS聯合細胞DNA 定量分析，除了2例 CINⅠ患者判定為可疑外，其余的癌前病變患者均可以被檢出，見表1。

表1 2種檢查方法與病理學結果的對照/例

2.2 細胞DNA定量分析與細胞學TBS診斷的準確性比較

細胞學 TBS診斷的特異性為65.85%，敏感性為82.56%；細胞DNA定量分析的特異性為68.75%，敏感性為88.23%；聯合檢測的敏感性和陰性預測值均為100.00%，見表2。

表2 細胞 DNA 定量分析與細胞學 TBS診斷效能的比較/%

3 討論

定期篩查是預防宮頸癌的有效方法。宮頸癌早期的癥狀普遍不典型，當患者由于身體出現不適而到醫院檢查時常常病情已發展至中晚期，而近年來宮頸癌的發病率迅速升高，嚴重威脅著女性的健康[4]。宮頸癌患者的疾病發展過程中可逆轉且有較長時間的癌前病變期，需要 5 ～ 15 年的時間，為早發現和早治療宮頸癌患者創造了有利的時機[5-6]。降低以及預防宮頸癌發生的關鍵在于對宮頸上皮內瘤樣病變患者的早期診斷。宮頸細胞學檢測、巴氏涂片、陰道鏡檢查以及人乳頭瘤病毒-DNA檢測是早期篩查宮頸癌的常用手段。

細胞學檢測是篩查及診斷宮頸病變的第一步，在診斷宮頸癌的過程中發揮著較為重要的作用。但是細胞學檢測主要根據細胞的形態學進行診斷，技術人員必須具備極為豐富的操作經驗，否則可能會造成敏感性降低、假陽性及假陰性發生率升高[7]。經細胞DNA定量分析技術通過檢測機體中的DNA水平，從而可以了解和掌握患者腫瘤細胞相關的遺傳基因發生變異的過程。在較高級別的HSIL和宮頸鱗狀細胞癌患者中，均可以發現DNA倍體異常的細胞[8-9]。細胞癌變的本質在于細胞快速出現無限的轉移以及增殖，檢測細胞核的DNA含量，能有效診斷惡性腫瘤。如果機體內出現異倍體細胞，則表明染色體的數量以及結構發生率異常的改變，并且也可以作為細胞發生癌變的早期臨床特征，異倍體細胞的數量越多，表明腫瘤細胞的惡性度越高，分化程度越低[10]。本研究發現，細胞學 TBS診斷的特異性為92.83%，敏感性為 53.19%；細胞 DNA 定量分析的特異性為98.69%，敏感性為100.00%；聯合檢測的敏感性和陰性預測值均為100.00%。表明細胞DNA定量分析技術的敏感性明顯高于細胞學TBS診斷，若能把兩種檢測方法聯合使用，則可以將敏感性提高至100.00%。因此，將細胞DNA定量分析方法應用于宮頸癌的篩查之中，能有效提高敏感性，避免漏診。細胞 DNA定量分析方法對臨床醫師掌握技術的要求程度較低，操作較為簡單，通過短時間的培訓后，臨床醫師就能開展操作，因此與常規的細胞學 TBS診斷相比較，更適合用于臨床宮頸癌的篩查。

綜上所述，在常規的宮頸細胞涂片細胞學檢查中聯合采取細胞 DNA 定量分析技術在宮頸癌篩查中具有較高的應用價值。