一例豬場豬偽狂犬病的控制及處理

彭林壽，段博芳，曾維歡，何俊濤，徐 佳，李紅炳

(1.臨滄市動物疫病預防控制中心，云南 臨滄 677000；2.云南省動物疫病預防控制中心，云南 昆明 650201；3.云南農業大學動物醫學院，云南 昆明 650201；4.金宇保靈生物藥品有限公司，內蒙 呼和浩特 010000；5.云南牧創生物科技有限公司，云南 昆明 650224)

豬 偽 狂 犬 病（Pseudorabies）是由偽狂犬病病毒（Pseudorabies virus,PRV）引起的傳染性疾病，豬是PRV 的貯存宿主之一。臨床癥狀表現為出現神經癥狀的3 周齡內仔豬大量死亡；后期仔豬及育肥豬伴隨呼吸道癥狀；懷孕母豬表現為高流產率和死胎[1]。

gE 基因自然缺失的Bartha-K61株活疫苗[2]在豬場偽狂犬病防控中得到廣泛應用。但2011 年以來，我國偽狂犬病毒野毒發生變化。從我國華東地區開始，越來越多的接種Bartha-K61 株免疫豬場，種豬群gE基因檢測轉陽，各豬群臨床病征凸顯。同時，國內分離的經基因工程方法人工致弱的SA215 株[3]、HB-98[4]、HB-2000[5]及國內分離天然致弱的C 株疫苗[6]在豬場中得到更多地運用。

1 材料與方法

1.1 樣本來源

樣品來源于云南省臨滄市某豬場。該豬場自2016 年8 月開始至2018 年3 月， 母豬月分娩率在71.4% ～78% 之間，月產房死胎、木乃伊胎及畸形胎的占比在16.95% ～31.5% 之間，月產房死淘率在19.4% ～42.8%。保育期正品率94.4% ～95.2%。育肥期正品率95.1 ～95.6%。自2016 年7 月感染發病后，生產數據最差出現在2016年9 月、10 月、11 月、12 月， 而后整場生產成績逐漸好轉。發病主要見于種豬群及產房哺乳豬。2018年3 月，分娩母豬91 窩，窩均總仔數13.19 頭，窩均活仔數10.90 頭。死胎及木乃伊胎占比17.36%。母豬流產3 頭，3 窩均從流產胎兒中檢出PRV 抗原。配種母豬105 頭，返情18 頭。全月死/ 淘產房仔豬58 頭、保育仔豬55 頭、育肥豬46 頭。

1.2 檢測試劑

檢測用試劑盒，由云南牧創生物科技有限公司贊助提供，試劑盒品牌見表1。

1.3 診斷方法

1.3.1 流行病學調查

該豬場于2015 年1 月至2015年4 月有豬傳染性胃腸炎- 流行性腹瀉病史。于2016 年7 月從江蘇某種豬場引進種豬125 頭后，出現豬偽狂犬病感染發病。

1.3.2 臨床癥狀

哺乳仔豬感染后表現為體溫發熱（大于41 ℃）及神經癥狀，震顫、共濟失調及角弓反張。有些病豬因呼吸困難呈犬坐式呼吸，有的轉圈或者側臥做劃水動作，同時伴隨嘔吐及腹瀉。發病斷奶仔豬體溫發熱（大于41 ℃），一般伴有呼吸道癥狀，表現為打噴嚏、呼吸困難及咳嗽，如發生神經癥狀，則病死率大于90%。母豬主要表現為繁殖障礙，分娩率低，死胎、木乃伊胎及弱仔比例高。育肥中、大豬主要表現呼吸道癥狀，部分豬伴隨支原體肺炎、傳染性胸膜肺炎的感染，呼吸道癥狀加重甚至死亡。

1.3.3 剖檢變化

病死哺乳仔豬及斷奶仔豬可見壞死性扁桃體炎，腦可見出血及非化膿性腦炎，肝臟、脾臟及腎臟可見灰白色或黃白色壞死灶。流產胎兒及新生哺乳豬可見肝臟及脾臟的壞死灶，肺臟及扁桃體出血灶。

1.3.4 實驗室診斷方案

對各階段豬只血清抗體進行檢測，經產母豬1 ～2 胎齡10 頭，3 ～4胎齡10 頭，5 ～6 胎齡10 頭，大于等于7 胎齡10 頭。公豬全部采樣。自留配前后備豬（35 周齡以上）全部采樣。同時分別對2 周齡、4 周齡、7 周齡、10 周齡、13 周齡、16 周齡、20 周齡、24 周齡和30 周齡商品豬采樣，每組10 頭。抗體檢測項目包括：豬偽狂犬病gE 基因抗體、豬偽狂犬病gB 基因抗體、豬瘟抗體、豬藍耳病抗體、豬圓環病毒病抗體、口蹄疫O 型抗體及口蹄疫A 型抗體。

對一個月內的流產胎兒或臍帶血進行豬瘟、豬藍耳病、豬偽狂犬病、豬圓環病毒病、豬細小病毒病、豬乙型腦炎抗原檢測。對死、淘豬進行豬瘟、豬藍耳病、豬偽狂犬病、豬圓環病毒病抗原檢測。

2 結果

2.1 實驗室診斷結果

通過血樣普檢，經產母豬gE抗體陽性率100%，公豬gE 抗體陽性率53.84%。說明全群經產母豬已被偽狂犬病野毒感染，大部分處于潛伏感染狀態，部分豬只如遇應激因素或其他疾病不穩定的狀態下，偽狂犬病野毒再次活躍致病。各階段死、淘豬中的幾種疑似抗原陽性檢出率見表2。豬偽狂犬病抗原在豬場各階段死、淘商品豬和流產胎兒臍帶血中均有不同比例的檢出，檢出率符合豬偽狂犬病在豬場豬群中的流行病學規律。

2.2 數據分析結果

該豬場防疫意識較強，使用疫苗的生產廠家見表3。從血清普查結果看，口蹄疫、豬瘟、豬細小病毒病、豬乙型腦炎均處于較理想的免疫狀態。該豬場豬藍耳病未做免疫，各階段豬藍耳病S/P 平均值均小于1.5，豬藍耳病抗體陽性率為81.71%。但保育及育肥階段豬只S/P 值變異系數較大。說明各階段豬只出現豬藍耳病不穩定屬于繼發性的不穩定。綜上，豬偽狂犬病仍然是導致豬場各區間不穩定，生產指標低下的主要因素。

3 處理方法

3.1 商品豬偽狂犬病疫苗毒株對比及篩選

疫苗對比試驗共分3 組，選擇連續1 周內分娩的（約20 窩）母豬及該窩仔豬作為試驗組1，免疫SA215 株豬偽狂犬病活疫苗；而下一周分娩的母豬及該窩仔豬作為試驗組2，免疫C 株豬偽狂犬病活疫苗；再下一周分娩的母豬及該窩仔豬作為試驗組3，免疫Bartha-K61株活疫苗。試驗豬只除豬偽狂犬病疫苗程序（見表4）調整外，其他飼養管理按豬場原生產程序執行。疫苗免疫及抽血均安排在周四進行。各組商品豬分別在2 周齡、4周齡、7 周齡、10 周齡、13 周齡、16 周齡、20 周齡、24 周齡時，隨機抽樣20 頭，檢測gE，gB 抗體。各階段死、淘豬只均用實時熒光定量PCR 方法檢測PRV。

表1 檢測用試劑盒

表2 各階段死、淘豬抗原陽性檢出率 %

表3 豬場主要免疫疫苗項目及疫苗廠家

表4 各試驗組免疫程序

記錄各試驗組的分娩時間，母豬耳號，初生總仔數，初生活仔數，木乃伊胎，死胎，斷奶數，保育轉出數，育肥出欄數。死/ 淘豬只PRV 陽性檢出率。理想的疫苗接種后應阻斷效果好、各階段成活率/正品率高。

3.2 種豬凈化方案

免疫程序：經產母豬及公豬每年全群3 次免疫，每4 個月1 次；后備豬配種前2 次免疫，間隔3 周，配種后同經產母豬一同免疫；商品豬出生后0-1 d 滴鼻，6 周一免，9周二免。

gE 抗體陽性公豬一次性淘汰。補充gE 抗體陰性公豬。設置試情專用公豬，配種只使用人工授精，嚴禁本交。

周批次斷奶時，對經產母豬按照種豬淘汰標準進行逐步淘汰。對gE 抗體檢測陰性后備豬才予以留用配種。在控制gE 抗體陽性豬只處于不排毒、不發病的潛伏感染狀態的同時，對商品豬只高密度免疫，產生抗體有效阻斷病毒感染。通過不斷淘汰gE 抗體陽性豬，補充gE抗體陰性后備豬，降低種豬群gE陽性率。

每年4 月及11 月進行血清抗體普查，其中1-2 胎母豬按30% 采樣。其他胎齡經產母豬按10% 采樣，公豬全檢。持續約3 年時間。

待全群gE 抗體陽性率降到10% 以下時，進行全群種豬gE 抗體全群檢測，一次性淘汰gE 抗體陽性豬只，從而達到豬場種豬豬偽狂犬病凈化的目的。

4 處理效果及分析

4.1 不同毒株豬偽狂犬病疫苗免疫效果對比

在商品豬偽狂犬病疫苗效果對比過程中，gE 抗體檢測結果見表5。試驗組2 在16 周齡及24 周齡出現0% 的陽性率，說明雖然母豬是感染陽性，但Bartha-K61 疫苗免疫產生的抗體有一定阻斷作用，病毒并未垂直傳播，gE 抗體陽性的母豬可以生下gE 抗體陰性的個體。且出現死胎、死胎檢出豬偽狂犬病抗原陽性的仔豬也不一定該窩豬整窩都被感染。如果疫苗毒株與發病野毒毒株匹配，疫苗抗體能有效阻斷豬只后期感染。讓同場自留后備豬篩選gE 陰性后，進行種群更新成為可能。而不匹配毒株免疫后，抗體并不能有效阻止野毒的感染。但gE轉陽并不等同發病，但從各生產車間的正品率對比看，gE 抗體陽性的豬群發病風險明顯大于gE 抗體陰性的豬群。

從gB 抗體的陽性率（ 見表6）及抗體滴度平均值（見表7）看出，母豬免疫后，母源抗體持續保護仔豬到4 周以上，7 周檢測值為疫苗抗體，但試驗組1 在第10 周， 試驗組3 在第13 周，可發現抗體滴度值快速升高，說明在相應時期，不僅有疫苗產生的疫苗保護抗體，也同時有野毒感染產生的抗體。而同樣滴鼻后兩次免疫的試驗組2，后期豬群沒有抗體滴度值的突然升高，說明試驗組2 選用的疫苗免疫程序能成功阻斷后期野毒的感染。gB 抗體檢測結果與gE 抗體檢測結果相對應。各組生產數據對比（見表8），試驗組2 的各階段正品率優于其他兩組。 說明試驗組2 選用的C 株疫苗，阻斷效果或保護力從抗體血檢指標及實際生產指標均優于Bartha-K61 及SA215 毒株疫苗。

表5 豬偽狂犬病gE 抗體陽性率 %

表6 豬偽狂犬病gB 抗體陽性率 %

4.2 種豬凈化方案及執行效果

豬場2018 年9 月27 日、2018年10 月25 日、2019 年2 月28 日進行經產母豬群及公豬的全群C 株偽狂犬疫苗免疫。2019 年4 月12日血清普檢豬偽狂犬病抗體數據（見表9）。疫苗高密度免疫后，能有效阻斷病毒在后期的感染，母源gE 陽性抗體衰減較以前提前，可能說明gE 抗體陽性母豬注射疫苗能降低野毒在體內的活躍度，緩解癥狀。新補充的一胎母豬gE 抗體無轉陽。種豬陽性率持續下降符合預期。2019 年4 月， 不正常胎兒比例5.22%，產房正品率95.67%,保育正品率98.48%。 結果說明，豬場凈化方案及實施效果達到了預期的目的。

5 總結

1) 豬場引種仍然是導致新野毒進入的主要途徑。引種前應充分做好疫病篩查。引種后進行隔離馴化。

2) 選擇合適的合作實驗室是必要的，精準的實驗室數據為豬場重大事項正確決策、疫病早期預警，快速控制及清除提供依據。

3) 同種病毒不同毒株間的差異有大有小。差異較大的如口蹄疫、豬藍耳病、豬偽狂犬病等。選擇和發病野毒親緣性較近的毒株疫苗免疫，效果比親緣性較遠的毒株疫苗效果好。選擇何種疫苗以 “試用” 的臨床數據對比結果為準。

4）豬場疫病防控是個持續、繁雜、系統的工程。詳細準確的生產報表，持續性的實驗室檢測檔案的建立也是必要的。數據能作為預估疫病風險、快速確診、制定方案及評估方案效果的最直接依據。

表7 豬偽狂犬病gB 抗體滴度平均值

表8 各試驗組豬生產數據 頭

表9 2019 年4 月豬偽狂犬病抗體數據