‘煙富8’蘋果雙脫毒苗木防控病毒病技術

王厚臣 丁元振 滕程光 王黎明 隋秀奇

（1 煙臺現代果業科學研究院，煙臺264003；2 山東省諸城市桃林鎮農業綜合服務中心，諸城262222）

目前世界上共發現30 余種可侵染蘋果的病毒， 已經明確可給蘋果造成危害的有16 種。一旦感染病毒病，蘋果樹全身帶有病毒，終生不愈，并且具有傳染性。病毒不但破壞樹體的正常生理機能，還造成果實產量和品質下降，甚至引起果樹死亡， 嚴重影響蘋果優質高產和經濟效益的提高。

1 蘋果病毒病的種類和傳播途徑

蘋果病毒病根據危害特點可分顯性病毒病和潛隱性病毒病。 顯性病毒病有花葉病、綠皺果病、銹果病等，潛隱性病毒病有褪綠葉斑病、蘋果莖溝病、蘋果莖痘病等。

病毒傳播途徑有：通過昆蟲或螨類傳播，通過帶毒植株的汁液傳播， 果樹根系接觸直接傳播，通過嫁接傳播和果園使用工具傳播等。

2 雙脫毒苗木的生產過程

目前國際上尚無良藥、良法防控病毒病，最簡單有效的辦法是使用脫毒苗木。 采用植物組織培養技術，對‘煙富8’蘋果種條和砧木進行病毒脫除，再經過培養繁育獲得雙脫毒苗木。雙脫毒的‘煙富8’蘋果苗木抗逆性強，成花容易，結果早，果品質量高，豐產潛力大。

2.1 取樣與消毒

首先將砧木（如M9T337、M26、八棱海棠）和‘煙富8’接穗的枝條進行消毒處理，放到有營養液的培養瓶內讓其生長發芽， 發芽后采頂芽進行消毒接種。

2.2 剝取莖尖與接種

在超凈工作臺上， 用解剖刀仔細剝離幼葉至裸露的生長點，用刀尖切下帶1～2 個葉原基的生長點，將切下的莖尖轉移至培養基上，培養成無菌瓶苗。

2.3 進行高溫鈍化

將無菌瓶苗放在38～40 ℃的智能人工氣候箱里生長30 d 左右，使蘋果苗內含有的各種病毒在高溫下逐漸鈍化，失去活性。

2.4 進行二次莖尖剝離

經過高溫鈍化的無菌瓶苗已經使病毒失去侵染能力， 對存活的無菌瓶苗進行二次莖尖剝離處理，處理及消毒方法同第1 次，再次剝離，得到0.2～1.0 mm 長的莖尖，可達到無毒狀態。

2.5 無毒莖尖進行接種快速繁殖

經過脫毒的莖尖在無菌接種室內的超凈工作臺上，接種到快繁培養基內進行快速繁殖。擴繁瓶苗培養周期為1 個月，1 個月后再進行分瓶接種。這種繁殖方式是在無菌、密閉的情況下進行，不用擔心外界病毒傳染源的感染。

2.6 進行生根培養

無毒瓶苗繁殖到一定數量后，再把獨立的單株接種到生根培養基上進行生根培養。 生根瓶苗在無菌培養室內培養15～18 d，根生長到1 cm 左右，完成生根培養。

2.7 溫室馴化成穴盤苗

脫毒苗再轉移到溫室進行馴化鍛煉， 瓶苗馴化結束后，將瓶苗移栽到穴盤內，經過一定時間的生長發育，完全適應自然環境。

2.8培養原始1代脫毒砧木、品種接穗，建采穗圃和培育成苗

已適應自然環境的‘煙富8’和M9T337 穴盤苗，直接定植到防蟲網室中，建立原始1 代無毒苗木采穗圃。

經過溫室馴化鍛煉的八棱海棠、M9T337等砧木穴盤苗，直接移栽到苗圃中。在苗圃生長50 d 左右，就可以取防蟲網室中的脫毒‘煙富8’接穗進行嫁接（嫁接工具要消毒），這樣嫁接成活的苗子實現了砧木、接穗雙脫毒的目的。經過精心培養，秋天落葉后出圃。

3 雙脫毒苗木果園管理事項

利用雙脫毒苗木建設的果園， 在整個管理期，要注意修剪等工具專用，使用前工具用酒精浸泡或采用燒烤等方法徹底消毒， 嚴禁與非脫毒苗木串用。因品種改良需要高接換頭的，應選用無病毒接穗， 切不可盲目嫁接來路不明的接穗。同時，注意一次性選好品種，避免多次高接，減少傳染。