不同固定液對冷凍組織病理切片HE染色質量比較

黃榮

（海門市第四人民醫院 江蘇 海門 226141）

近年臨床上可使用的固定液較多，但均存在一定的局限性，同時HE染色的質量也存在不同，故而本次研究中采用不同固定液對280例冷凍組織病理切片做HE染色，旨在比較其HE染色質量以及相關情況。

1.資料與方法

1.1 一般資料

選擇的280例組織主要源自甲狀腺和胃、乳腺以及腸、肺、腦、子宮、平滑肌等，均是患者活檢、術后遺留的組織；資料源自我院2016年1月—2018年12月檢測的280例冷凍組織病理切片，隨機將280例對象分成對照組和觀察組各140例：對照組男性患者83例和女性患者57例，年齡19～63歲、平均（35.8±5.6）歲；觀察組男性患者81例和女性患者59例，年齡21～62歲、平均（35.2±5.4）歲。兩組一般資料比較無差異，P＞0.05，有可比性。

1.2 方法

對照組：常規試劑采用的是二甲苯和無水乙醇、分化液、含汞蘇木素以及伊紅等，HE染色根據規定步驟進行。

觀察組：新型試劑采用的是環保試劑，把140例患者的病理組織切片后，將其用無苯切片脫蠟液I和Ⅱ各處理5min，隨后再用Ⅲ號脫蠟液將其處理10min；采用無水乙醇I將其處理1min，并用Ⅱ號再處理1min，隨后以95%和85%的乙醇將其處理10s；將病理組織放在自來水龍頭下將其緩流清洗1min，之后采用蘇木素穩定劑將其再處理30s，再者是用蘇木素染色液將其處理9min，用自來水將其再進行緩流沖洗1min；隨即用0.5%分化液將其處理2s，并再次用自來水緩流清洗1min；再用返藍染色液將其處理5s，并用自來水對其緩流清洗1min；用伊紅染色液將其處理2min，再用自來水緩流清洗5s；以85%的乙醇將其處理5s，并用95%的乙醇將其再處理10s；隨后再用無水乙醇I和Ⅱ對標本各處理10s；隨后再用無苯切片透明液I對其進行20s的處理，Ⅱ號液體再處理1min，Ⅲ號液體再處理2min；上述各項操作完成后則將標本濕封。

1.3 觀察指標和評價標準

選取的280例患者病理組織標本均采用LED型光學顯微鏡進行觀察，用MRNN型高清數字顯微鏡相機對CCD圖像進行采集，觀察病理組織的色彩顏色及其滲透性、對比度和組織結構等情況。HE染色質量等級劃分標準參照[1]。

1.4 統計學方法

統計學軟件選擇SPSS24.0，性別占比和HE染色I級、Ⅱ級以及Ⅲ級資料用（%）表示，行χ2檢驗；年齡資料用（±s）表示，行t檢驗；P＜0.05時，表示差異有統計學意義。

2.結果

相較于對照組的HE染色質量，觀察組的色彩、對比度和滲透力以及圖像呈現速度比較無差異（P＞0.05）；但觀察組的HE染色圖像清晰度與對照組比較有差異，I級率和Ⅱ級率均比對照組高，差異顯著（P＜0.05）。

表 兩組冷凍組織病理切片HE染色質量比較 （例）

3.討論

冷凍切片的質量與切片的固定有關，常用的固定液中主要含有乙醇、貢等物質，乙醇雖然能夠去除切片上的水分，對切片的組織結構保存有效，但會導致組織切片中的球蛋白和白蛋白等物質沉淀，這時核蛋白沉淀并會溶解在水中，造成著色異常或者不佳；貢會對人體組織造成較大的破壞，極易造成切片組織出現黃色的氧化汞，從而影響組織病理診斷[2]。

本次采用的新型環保固定液中不含汞，切片組織可以在短時間內著色，進行分化后則用流水沖洗，促使組織切片快速返藍，縮短了組織著色時間。由于是采用無汞固定液，病理組織不會被破壞，固定液的穩定性得到加強，消除了常規固定液的一些不足，確保了病理組織的著色質量，同時新試劑更換時無需再做相關處理。固定液的改良，使得其中的有害物質均被分離，不會出現大量揮發或者生物降解的問題，亦不會造成病理組織標本異常收縮，可以獲得色彩良好且對比度佳的圖像[3]。

綜上所述，新型試劑HR染色色彩對比度和滲透力以及圖像呈現速度與常規試劑無較大差異，但其染色圖像清晰度較高，這對病理組織的快速診斷有著積極作用。