血液細(xì)胞培養(yǎng)及血清降鈣素原檢測(cè)對(duì)菌血癥的診斷價(jià)值

羅春偉

既往，臨床上主要是通過體溫、紅細(xì)胞沉降率、C反應(yīng)蛋白以及白細(xì)胞計(jì)數(shù)等傳統(tǒng)診斷指標(biāo)對(duì)菌血癥進(jìn)行診斷，但上述診斷指標(biāo)存在耗時(shí)較長(zhǎng)以及敏感性、特異性較低等缺陷，不利于臨床應(yīng)用［1～3］。此外，由于危重癥患者普遍存在不同程度的全身炎癥反應(yīng)，加上細(xì)菌感染可能與非細(xì)菌感染的臨床表現(xiàn)相似，易相互混淆，在一定程度上增加了傳統(tǒng)診斷指標(biāo)的局限性。因此，尋找一種更有診斷價(jià)值的實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)對(duì)診斷菌血癥具有重要意義。近年來，越來越多的學(xué)者發(fā)現(xiàn)血清降鈣素原（PCT）可能是一具有潛在診斷價(jià)值的指標(biāo)，可作為細(xì)菌性感染疾病的早期診斷和鑒別診斷指標(biāo)［4］。鑒于此，本研究旨在比較血液細(xì)胞培養(yǎng)或血清PCT單獨(dú)及其聯(lián)合檢測(cè)對(duì)菌血癥的診斷價(jià)值，為臨床提供一種有效的診斷菌血癥的方法。

1 資料與方法

1.1一般資料 將2017年8月～2018年8月我院收治的80例菌血癥患者作為試驗(yàn)組。納入標(biāo)準(zhǔn)［5］：①符合菌血癥相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)，年齡≥18歲；②無臨床資料缺失；③入院前已接受相關(guān)治療。排除標(biāo)準(zhǔn)：①因其他原因?qū)е碌捏w溫＞38℃；②伴有心、肝、腎等重要臟器功能不全；③無法正常交流或存在精神疾病；④正參與其他研究者。其中男48例，女32例，年齡21～59（38.52±7.45）歲。

另取我院同期接受體檢的80例健康者作為對(duì)照組。其中男50例，女30例，年齡22～59（38.59±7.48）歲。兩組一般資料比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。具有可比性。所有研究對(duì)象已知情同意，且經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2研究方法 分別采集試驗(yàn)組發(fā)熱24、48、72 h時(shí)，以及同時(shí)點(diǎn)對(duì)照組的靜脈血5 ml，采用雙抗免疫夾心化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)PCT水平，具體操作以試劑盒說明書為準(zhǔn)（試劑為上海酶聯(lián)生物科技有限公司產(chǎn)品）。同時(shí)，使用BacT／ALERT3D分析儀（購(gòu)自法國(guó)生物梅里埃公司）進(jìn)行試驗(yàn)組發(fā)熱24、48、72 h時(shí)血液細(xì)胞培養(yǎng)，采用ATB Expression細(xì)菌鑒定分析儀（購(gòu)自法國(guó)生物梅里埃公司）及其配套試劑進(jìn)行細(xì)菌種類的鑒定；對(duì)所有實(shí)驗(yàn)結(jié)果予以全面質(zhì)量控制，保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確、可靠。

1.3觀察指標(biāo) 分析血液細(xì)胞培養(yǎng)診斷菌血癥的結(jié)果，其標(biāo)準(zhǔn)參照《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》［6］第3版的要求進(jìn)行，即血液細(xì)胞培養(yǎng)鑒定出菌株，且繼續(xù)培養(yǎng)5 d細(xì)胞仍未呈陰性生長(zhǎng)。比較發(fā)熱不同時(shí)點(diǎn)兩組的血清 PCT陽性率，其陽性標(biāo)準(zhǔn)為 PCT＞0.5μg／L［7］。受試者工作特征（ROC）曲線分析血液細(xì)胞培養(yǎng)及血清PCT水平的曲線下面積、敏感度、特異度。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 20.0軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析；計(jì)數(shù)資料以n（%）表示，行χ2檢驗(yàn)；計(jì)量資料以±s）表示，行t檢驗(yàn)；檢測(cè)的能效行ROC曲線分析；P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1血液細(xì)胞培養(yǎng)診斷菌血癥的結(jié)果分析 試驗(yàn)組發(fā)熱24、48、72 h時(shí)陽性率分別為 28.75%（23／80）、57.50%（46／80）、95.00%（76／80），即隨著采血時(shí)點(diǎn)的不斷延遲，其血培養(yǎng)陽性率隨之升高。見表1。

2.2不同時(shí)點(diǎn)兩組血清PCT陽性率比較 實(shí)驗(yàn)組發(fā)熱24、48、72 h時(shí)的血清PCT陽性率分別與同時(shí)點(diǎn)的對(duì)照組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.01）。見表2。

2.3診斷菌血癥的ROC曲線分析 試驗(yàn)組血液細(xì)胞培養(yǎng)聯(lián)合血清PCT水平檢測(cè)診斷菌血癥的曲線下面積、敏感度、特異度與單獨(dú)進(jìn)行血液細(xì)胞培養(yǎng)或血清PCT水平檢測(cè)比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.05）。見表3。

表1 試驗(yàn)組血液細(xì)胞培養(yǎng)診斷菌血癥的結(jié)果分析

表2 兩組不同時(shí)點(diǎn)血清PCT陽性率比較／n（%）

表3 單獨(dú)或聯(lián)合檢測(cè)診斷菌血癥的ROC曲線分析

3 討論

血培養(yǎng)是目前國(guó)內(nèi)外公認(rèn)的診斷菌血癥的金標(biāo)準(zhǔn)，但該診斷方式所需的時(shí)間較長(zhǎng)，且受外界多種因素影響，難以達(dá)到早期、快速診斷疾病的要求［8］。特別是菌血癥患者的臨床癥狀往往不明顯，且進(jìn)展迅速，大部分患者在實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)尚未出現(xiàn)陽性結(jié)果時(shí)，病情已經(jīng)惡化，從而失去最佳搶救時(shí)機(jī)，不利于患者預(yù)后。目前，我國(guó)大多數(shù)醫(yī)療機(jī)構(gòu)開始實(shí)施全自動(dòng)血培養(yǎng)儀進(jìn)行血培養(yǎng)，但隨著臨床醫(yī)生對(duì)首次確診率的要求逐漸升高，單純的血培養(yǎng)已無法滿足臨床需求。因此，尋找一種更加快速、準(zhǔn)確、有效的診斷方式顯得至關(guān)重要。PCT屬于一種糖蛋白，亦是降鈣素的前體，由116個(gè)氨基酸組成，本身無激素活性，在正常狀態(tài)下主要是由甲狀腺濾泡旁細(xì)胞內(nèi)合成，其可在蛋白酶的作用下裂解成為由57個(gè)氨基酸組成的氨基PCT、32個(gè)氨基酸的降鈣素及21個(gè)氨基酸的降鈣蛋白。不少研究報(bào)道證實(shí)，PCT可作為全身細(xì)菌感染的有效標(biāo)志物之一。

本研究血液細(xì)胞培養(yǎng)診斷結(jié)果顯示，發(fā)熱24 h時(shí)陽性率為28.75%，48 h時(shí)為57.50%，72 h時(shí)為95.00%，即隨著采血時(shí)間的延遲，其血培養(yǎng)陽性率隨之升高。這說明血液細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)用于菌血癥的診斷中具有一定的價(jià)值，但首次陽性率較低，其主要原因有：①采血時(shí)間不合理（應(yīng)以急性發(fā)病期或抗生素使用前作為最佳的采血時(shí)間）；②血培養(yǎng)瓶質(zhì)量低下和（或）血培養(yǎng)儀的靈敏度較低；③采血量較少或（和）接種至培養(yǎng)瓶過程中菌株暴露死亡［9］。由此可知，改進(jìn)上述問題可提高陽性率。本研究血清PCT檢測(cè)顯示，發(fā)熱24、48、72 h時(shí)的血清PCT陽性率分別比對(duì)照組高（均P＜0.05），這表明血清PCT水平檢測(cè)對(duì)診斷菌血癥具有較高的價(jià)值。究其原因，PCT屬于11號(hào)染色體上降鈣素1基因（CALC-1）表達(dá)產(chǎn)物之一，其在正常生理狀態(tài)下，由于甲狀腺外CALC-1的表達(dá)受到抑制，因此血清中幾乎無法檢測(cè)到PCT，一旦機(jī)體處于細(xì)菌感染狀態(tài)時(shí)，會(huì)誘導(dǎo)全身多種組織的多種類型細(xì)胞的CALC-1表達(dá)，促進(jìn)了PCT的連續(xù)性釋放，導(dǎo)致PCT濃度的急劇增加。另外，在室溫條件下體內(nèi)外的PCT穩(wěn)定性較好，不易被降解，且不會(huì)受機(jī)體內(nèi)激素水平的影響，可于短時(shí)間內(nèi)被檢測(cè)到。因此，PCT可作為一項(xiàng)有效評(píng)估細(xì)菌感染的敏感指標(biāo)，可在細(xì)菌感染性發(fā)熱以及非細(xì)菌感染發(fā)熱中發(fā)揮顯著的作用［10］。此外，本研究還顯示，血液細(xì)胞培養(yǎng)聯(lián)合血清PCT水平檢測(cè)診斷菌血癥的ROC曲線下面積、敏感度、特異度比各自單獨(dú)檢測(cè)診斷價(jià)值更高。這說明血液細(xì)胞培養(yǎng)聯(lián)合血清PCT水平檢測(cè)可有效提高早期診斷菌血癥的敏感度、特異度。其主要原因可能與上述兩種診斷方式具有協(xié)同作用有關(guān)。

綜上所述，血液細(xì)胞培養(yǎng)與血清PCT水平檢測(cè)均可單獨(dú)作為菌血癥的診斷指標(biāo)，但兩項(xiàng)聯(lián)合檢測(cè)對(duì)診斷菌血癥尤具價(jià)值。