LC-MS/MS法測定玉米植株和土壤中磺酰磺隆殘留量

高宗軍，李瑞娟，戴 爭，李如美

（山東省農業科學院植物保護研究所山東省植物病毒學重點實驗室，濟南 250100）

磺酰磺隆（sulfosulfuron）是美國孟山都公司和日本武田公司共同開發的磺酰脲類除草劑，于1997年上市，2002年在歐盟獲得登記[1-2]。其作用靶標是乙酰乳酸合成酶（ALS），可用于小麥田防除野燕麥、早熟禾等一年生和多年生禾本科和部分闊葉雜草，對小麥安全，但對后茬敏感作物玉米、水稻有生長抑制作用[3-4]。因此，磺酰磺隆在農田環境中的持久性和安全性備受關注。

目前，有關磺酰磺隆的研究主要集中在室內生物活性測定、田間藥效和持效期、高效液相色譜法定量檢測、酶聯免疫吸附分析等方面[3-6]。利用液相色譜-串聯質譜法（LC-MS/MS），對玉米植株和土壤中磺酰磺隆殘留量的定量檢測分析未見報道。本文采用液相色譜-串聯質譜法（LC-MS/MS），檢測玉米植株和土壤中磺酰磺隆的殘留量，為磺酰磺隆在農田環境中的使用提供試驗依據。

1 材料與方法

1.1 儀器和試劑

高效液相色譜-質譜儀：Agilent1260-6460Eclipse plus C18色譜柱（50 mm×3.0 mm，2.7 μm），安捷倫科技有限公司；Z326K高速冷凍離心機，德國哈默公司；SQP百分之一電子天平，BSA224S-CW萬分之一電子天平，賽多利斯科學儀器有限公司。

95%磺酰磺隆標準品，德國Dr.Ehrenstorfer公司；乙腈（色譜純），山東禹王和天下新材料有限公司；甲苯（色譜純），國藥集團化學試劑有限公司；甲醇（色譜純），賽默飛世爾科技有限公司；純水，屈臣氏有限公司。

1.2 磺酰磺隆標準溶液的制備

用電子天平稱取95%磺酰磺隆標準品0.010 5 g于100 mL燒杯中，用2 mL二氯甲烷溶解后，加入甲醇稀釋定容至100 mL，即得100 mg/L標準儲備液，用甲醇梯度稀釋配制5、10、50、100、200 μg/L的標準工作溶液，待用。

1.3 試驗樣品的前處理

玉米植株樣品：稱取待測玉米植株勻漿液5.00 g，置于50 mL塑料離心管中，加入10 mL乙腈和2.00 g NaCl，渦旋超聲10 min后加入5.00 g無水Na2SO4，渦旋振蕩30 s，5 000 r/min離心3 min；上清液置于雞心瓶中，旋蒸，用5 mL甲苯-乙腈（體積比1∶3）定容，同時用5 mL甲苯-乙腈（體積比1∶3）對Bond Elut Carbon固相萃取柱進行2次活化處理；將Bond Elut Carbon固相萃取柱置于雞心瓶內，待凈化樣品經渦旋振蕩器渦旋后轉移至Bond Elut Carbon固相萃取柱，靜置過濾5min后，用5mL甲苯-乙腈（體積比1∶3）洗脫2次；旋蒸濃縮近干，用甲醇定容至5 mL容量瓶，過0.22 μm濾膜，待測。

土壤樣品：稱取30.00 g土壤于250 mL錐形瓶中，依次加入40、40、20 mL乙腈，各超聲1次，每次超聲15 min；取上清液經漏斗轉移至100 mL的具塞量筒，重復3次；過濾合并3次離心所得上清液，向具塞量筒內加入7.00 g無水NaCl，振蕩2 min，靜置1 min，再振蕩1 min，靜置40 min。取20 mL提取液于雞心瓶中，旋蒸濃縮近干，用甲醇定容至5 mL容量瓶，過0.22 μm濾膜，待測。

1.4 色譜檢測條件

離子源為電噴霧離子源ESI；掃描方式為正離子源；毛細管電壓4 kV（-）；脫溶劑溫度300℃；脫溶劑氣流量8 L/min；霧化器壓力0.24 MPa。磺酰磺隆檢測方式為多重反應監測（MRM），具體參數見表1。

表1MRM掃描參數

進樣體積5 μL；流速0.3 mL/min；柱溫35℃；采用1 mmol/L乙酸銨＋0.1%甲酸（A）和1 mmol/L乙酸銨＋0.1%甲酸甲醇（B）組成的流動相進行梯度洗脫。洗脫程序：0～1 min，90%→60%（A）、10%→40%（B）；1～3 min，60%→10%（A）、40%→90%（B）；3～6 min，10%（A）、90%（B）；6～6.01 min，10% →90%（A）、90%→10%（B）；6.01～10 min，90%（A）、10%（B）。

1.5 添加回收率的測定

稱取玉米植株樣品5.00 g，分別添加磺酰磺隆標準溶液，使磺酰磺隆添加濃度為5、10、100 μg/kg，每個處理設5次重復。按照上述提取、凈化步驟和儀器條件測定樣品中磺酰磺隆的含量，計算添加回收率。

稱取土壤樣品30.00 g，分別添加磺酰磺隆標準溶液，使磺酰磺隆添加濃度為5、10、100 μg/kg，每個處理設5次重復。按照上述提取、凈化步驟和儀器條件測定樣品中磺酰磺隆的含量，計算添加回收率。

2 結果與分析

2.1 方法的線性關系、靈敏度

按照上述儀器條件，對5、10、50、100、200 μg/L的磺酰磺隆系列標準工作溶液進行豐度測定，以磺酰磺隆質量濃度為橫坐標，磺酰磺隆色譜豐度為縱坐標，繪制標準曲線（圖1）。其線性回歸方程為y=2 746.8x＋2 519.8（R2=0.994 4）。結果表明，在5～200 μg/L范圍內，磺酰磺隆色譜豐度與進樣質量濃度之間線性關系良好。儀器對磺酰磺隆的最小檢出量（LOD）為0.3 μg/L，本試驗中磺酰磺隆在玉米植株和土壤中的最低檢測濃度（LOQ）均為5 μg/kg，保留時間為5.01 min。

圖1 磺酰磺隆標準曲線

2.2 方法的準確度、精密度

添加回收率測定結果見表2。在5、10、100 μg/kg添加水平下，磺酰磺隆在玉米植株中的平均回收率為94.48%～96.92%，相對標準偏差為1.42%～3.60%。

磺酰磺隆在土壤中的平均回收率為93.96%～95.73%，相對標準偏差為1.99%～3.28%。方法的準確度和精密度滿足試驗質量控制要求。

表2 玉米植株和土壤中磺酰磺隆的添加回收率

3 結論

利用LC-MS/MS法測定玉米植株和土壤中磺酰磺隆殘留量，準確度、精密度和靈敏度較高，線性關系良好，具有簡便、快速、準確及分離效果好的優點，符合磺酰磺隆定量分析要求。