段建兵,郭琛琛,相艷麗
(1.河北辛集市畜牧工作站,河北辛集 052360;2.河北省辛集市南智邱動物衛生監督分所,河北辛集 052360)
動物在經歷環境的變化時會發生生理應激,環境的變化刺激了身體反應,目的是為了重建體內穩態平衡狀態。生理應激會對家禽生長和健康產生負面影響,特別是對幼禽生理影響較為明顯(田建華等,2018 ;孫冬巖等,2015)。Thaxton 和Puvadolpirod(2000)提出一個研究家禽應激的模型,該模型包括持續輸注促腎上腺皮質激素,而Post 等(2003)提出一種利用日糧添加皮質酮替代促腎上腺皮質激素應激模型。在這兩種模型中,Thaxton 和Puvadolpirod(2000)研究了肉雞42 個不同參數,并將它們分別分配到4 個應激反應類別中,即形態學、內分泌和血液代謝物、消化和代謝及免疫。這些應激模型的應用尚未擴展到成年家禽,同時關于促腎上腺皮質激素介導的蛋雞應激反應的數據有限,大多數研究的目的是了解特定的環境因素對有限數量生理反應的影響(Thaxton,2004)。目前還沒有對已知或可能在應激狀態的成年家禽類中發生的適應性反應及這些反應之間的時間關系進行全面評估,因此,本研究旨在探討持續輸注促腎上腺皮質激素對蛋雞多種應激反應的影響。
1.1 動物分組與處理 試驗選擇45 w 海蘭褐殼蛋雞80 只,隨機分為兩組,每組40 只雞(4 個重復,每個重復10 只)。對照組注射1 μL/kg 體重0.85% 的生理鹽水,處理組注射10 IU/kg 促腎上腺皮質激素。對照組和處理組均連續注射6 d。
1.2 試驗記錄與樣品收集 試驗結束后對動物稱重、屠宰,分別測定屠體各部分的重量。采用常規養分測定方法分析胸肌和腿肌的化學成分。雞只屠宰前翅下靜脈采血5 mL 用于分析血漿皮質酮、葡萄糖、膽固醇、高密度脂蛋白和甘油三酯含量(試 劑 盒 法)。參 考Thaxton 和Siegel(1972)的方法分析蛋雞抗綿羊紅細胞抗體水平及植物凝集素指數、嗜異細胞與淋巴細胞比值。
1.3 養分消化及繁殖器官特征 每天記錄蛋雞采食量和飲水量,采用全收糞法收集糞便,分析糞便和飼料化學成分,以此計算養分消化和吸收量。試驗結束后屠宰雞只,記錄卵泡數和閉鎖卵泡數,稱量輸卵管。
1.4 統計分析 采用SAS 軟件單因素方差分析模式,對處理組和對照組指標均值進行T 檢驗,結果以“平均值± 標準誤”表示,P <0.05 判定為差異顯著。
2.1 形態特征和肌肉成分 由表1 可知,與對照組相比,處理組顯著提高蛋雞體重、屠體重、后半屠體重、肝臟和腸道重量(P <0.05),但對前半屠體重、腿、腳、皮膚、心臟和腹脂重量的影響無顯著差異(P >0.05)。注射促腎上腺皮質激素顯著提高蛋雞肝臟干物質、水分、蛋白質、脂肪、灰分和碳水化合物含量(P <0.05)。

表1 連續6 d 注射促腎上腺皮質激素對蛋雞形態特征的影響 g
由表2 可知,蛋雞連續注射促腎上腺皮質激素6 d 后,使腿肌水分及胸肌脂肪含量提高了9.06% 和100%(P <0.05)。但對照組與處理組對蛋雞胸肌水分、蛋白質、碳水化合物、灰分及腿肌蛋白質、脂肪、碳水化合物、脂肪和灰分含量的影響均無顯著差異(P >0.05)。

表2 連續6 d 注射促腎上腺皮質激素對蛋雞胸肌和腿肌成分的影響 g
2.2 內分泌和血液代謝指標 由表3 可知,處理組較對照組顯著提高血漿皮質酮、葡萄糖、膽固醇和高密度脂蛋白水平(P <0.05),分別提高了129.98%、174.25%、66.94% 和1166.67%,血漿甘油三酯含量降低了15.04%(P <0.05)。

表3 連續6 d 注射促腎上腺皮質激素對蛋雞血漿生化指標的影響
由表4 可知,與對照組相比,處理組抗SRBC水平、植物凝集素指數和脾臟相對重量較對照組降 低 了29.98%、47.45%、40.91%(P <0.05),嗜異細胞與淋巴細胞的比值提高了297.06%(P <0.05)。

表4 連續6 d 注射促腎上腺皮質激素對蛋雞免疫指標的影響 g
2.3 消化和代謝 由表5 可知,處理組較對照組顯著提高了2、4、6 d 蛋雞采食和飲水量及糞排泄量和干物質排泄量(P <0.05)。對照組與處理組對糞碳水化合物、灰分、蛋白質、脂肪、纖維和總能含量均無顯著影響(P >0.05)。注射促腎上腺皮質激素對干物質、蛋白質、碳水化合物、脂肪和總能消化率均無顯著影響(P >0.05),但顯著提高了2 和6 d 灰分、蛋白質、總能的吸收量(P<0.05),提高6 d 脂肪吸收量(P <0.05)。
2.4 繁殖器官指數 由表6 可知,處理組與對照組對成熟卵泡數無顯著影響(P >0.05),但處理組的卵泡均處于閉鎖狀態。與對照組相比,處理組顯著降低輸卵管重量(P <0.05)。

表5 連續6 d 注射促腎上腺皮質激素對蛋雞消化和代謝的影響

表6 連續6 d 注射促腎上腺皮質激素對蛋雞繁殖器官指數的影響
本試驗通過持續灌注促腎上腺素皮質激素后發現蛋雞體重提高了,這與在肉雞上的研究結果不同,如肉雞添加皮質酮導致生長受到抑制(Post等,2003),其認為肉雞的生長抑制是因為腎上腺皮質素介導的糖異生作用結果,即機體蛋白質儲備被分解用于能量供應,而Tankson 等(2001)研究也發現,灌注促腎上腺皮質激素降低了肉雞體重和屠體重。本試驗化學分析表明,經過促腎上腺皮質激素處理的肌肉樣品水分、蛋白質和總能含量均有所降低,這一結果支持了皮質酮升高會增加蛋白質分解代謝。皮質醇、皮質酮和藥物地塞米松這些糖皮質激素抑制蛋白質生長,導致動物的生長抑制,但在任何激素處理后,蛋白質分解代謝率都沒有改變(Klasing 和Jarrell,1985),這與本試驗研究結果一致。
雞的骨骼肌發育能力很強,尤其是與乳房相關的骨骼肌。Dupont 等(1999)報道,皮質醇改變肌肉和肝臟的胰島素信號,在肉雞中發現,胰島素樣生長因子控制瘦肉組織的生長。胰島素和胰島素樣因子在雞應激中的作用尚未完全闡明,但雞生長停止可能是由于胰島素樣因子受體下調引起。目前的研究缺乏促腎上腺皮質激素對骨骼肌蛋白質含量的影響,但這種結果是可以預期的,因為已知胰島素樣因子可以刺激動物生長期的瘦肉組織,而它在已經完成生長的成年動物中基本上無效(Dupont 等,2004)。本試驗結果表明,促腎上腺皮質激素處理后蛋雞的體重、屠體重、肝臟、腸道重量均有所增加,同時肝臟水分、蛋白質、脂肪、碳水化合物和灰分水平的增加都是應激表現。在糖異生過程中,由于氨基酸被優先用于分解代謝,脂質在肝臟中積累,肝臟變肥及水、蛋白質、脂肪、碳水化合物和灰分水平增加。對蛋雞胸肌和腿肌樣本分析表明,促腎上腺皮質激素不會導致蛋白質含量下降,但促腎上腺皮質激素介導的腿肌含水量增加。促腎上腺皮質激素介導的腿肌水分增加的機制尚不清楚,但陽離子、疏水性和pH 變化都會影響肉的持水能力(Raymer 等,1997)。此外,經促腎上腺皮質激素處理的蛋雞比對照組平均多喝145 mL 水,同時糞便含水量增加54 mL/d,因此,體內含水量的增加可能是處理后體重增加的主要原因。
內分泌和代謝變化是大多數物種,包括成年和幼禽的應激反應指標。血漿膽固醇、葡萄糖、高密度脂蛋白和甘油三酯水平是所有家禽的應激指標。Davis 等(2000)發現,增加飼養密度并不影響蛋雞皮質酮水平。Thaxton 和Puvadolpirod(2000)發現,促腎上腺皮質激素介導的雞血漿中皮質醇、葡萄糖和膽固醇水平升高,增加循環糖皮質激素誘導糖異生,這一過程導致血漿葡萄糖水平升高。此外,糖皮質激素可以通過拮抗胰島素的作用抑制外周組織攝取葡萄糖,應激過程中釋放的糖皮質激素最初會從脂肪組織中調動蛋雞脂質,尤其是甘油三酯(Sahin 和Kucuk,2001)。糖皮質激素能激活結構蛋白,脂質被動員后立即被分解成非酯化脂肪酸,轉移到肝臟,由磷脂酰磷酸二氫酶轉化為三磷酸供能,極低密度脂蛋白將三磷酸腺苷從肝臟轉運到肌肉和脂肪等組織,三磷酸腺苷在這些組織中被脂蛋白脂肪酶水解,通過脂蛋白脂肪酶的作用水解和去除極低密度脂蛋白中的甘油三酯,將極低密度脂蛋白轉化為富含膽甾醇的低密度脂蛋白,而一些極低密度脂蛋白表面脂質轉化為高密度脂蛋白(Assmann 和 Jerzy-Roch,2003)。在應激過程中,血漿膽固醇水平升高,高密度脂蛋白水平也升高,因為,高密度脂蛋白的功能是將膽固醇從身體組織運輸到肝臟。在本研究中促腎上腺皮質激素處理的蛋雞和熱應激蛋雞血漿甘油三酯水平降低(Sahin 和Kucuk,2001)。雞對SRBC 主要體液免疫反應被抑制的程度與在肉雞中單一注射促腎上腺皮質激素引起的免疫反應相同,而皮膚嗜堿性細胞對植物凝集素- 磷酸鹽的過敏反應表明,細胞介導免疫被抑制的程度與在肉雞注射促腎上腺皮質激素的報道大致相同(Murray 等,1987)。
綜上所述,蛋雞在持續輸注促腎上腺素皮質激素介導下的適應性反應可分為5 類:形態學、內分泌、血液代謝物、消化代謝、免疫和生殖。蛋雞和肉雞應激反應的主要差異表現在形態、消化代謝和繁殖方面。具體來說,蛋雞在應激條件下體重增加,而肉雞生長終止,蛋雞卵泡停止發育。在蛋雞、肉雞的皮質酮水平、血液代謝物和所有免疫參數的反應都非常相似,唯一顯著的差異是經過促腎上腺素皮質激素處理的蛋雞血漿甘油三酯水平降低,而肉雞甘油三酯水平升高。