唐山大地震40年幸存截癱患者免疫功能分析

王菊惠，袁寶軍△，李 超，楊宏秀，張 倩，張翠華

(1.開灤總醫(yī)院檢驗(yàn)科，河北唐山 063000；2：唐山市傳染病醫(yī)院檢驗(yàn)科，河北唐山 063000)

作為重大自然災(zāi)害的幸存者，40年來唐山地震截癱患者受到多種并發(fā)癥侵?jǐn)_，免疫功能受到不同程度的影響。2010年對唐山地震截癱患者進(jìn)行過免疫球蛋白的測定分析，發(fā)現(xiàn)該人群的免疫球蛋白及C3水平均與健康對照有較大差異[1]。2016年陸續(xù)對幸存的110例截癱患者作了全血淋巴細(xì)胞亞群分析，發(fā)現(xiàn)截癱組CD8+T細(xì)胞升高，CD4+/CD8+和CD16+CD56+NK細(xì)胞水平下降，免疫功能紊亂[2]。本實(shí)驗(yàn)主要檢測現(xiàn)階段唐山地震截癱患者免疫球蛋白(IgG、IgA、IgM)和補(bǔ)體C3、C4水平，并與健康對照者及2010年的結(jié)果作對比，觀察其動(dòng)態(tài)變化，同時(shí)與淋巴細(xì)胞亞群做相關(guān)性分析，動(dòng)態(tài)觀察長期截癱患者細(xì)胞免疫及體液免疫的基本狀況，為臨床治療和患者恢復(fù)提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。

1 資料與方法

1.1一般資料 1976年唐山大地震幸存截癱患者110例(截癱組)，其中，男性38例，平均年齡(64.7±7.7)歲，女性72例，平均年齡(66.1±7.8)歲。健康對照組：四肢健康行動(dòng)自如體檢健康者130例，其中男性41例，女性89例，平均年齡(68.7±8.9)歲。

1.2標(biāo)本采集 從2015年7月至2016年12月陸續(xù)采集截癱組及健康對照組清晨空腹靜脈血共5 mL，2 mL全血于采集當(dāng)天測定淋巴細(xì)胞亞群，另外3 mL及時(shí)分離血清，-20 ℃保存，統(tǒng)一測定免疫球蛋白(IgG、IgA、IgM)和補(bǔ)體C3、C4水平。

1.3檢測方法 T淋巴細(xì)胞亞群采用流式細(xì)胞術(shù)測定，試劑由美國BD公司生產(chǎn)，在美國BD FACSCalibur流式細(xì)胞儀上測定。血清免疫球蛋白(IgG、IgA、IgM)和補(bǔ)體C3、C4采用比濁法在日立7600生化分析儀上測定，試劑均由北京中生公司提供。

2 結(jié) 果

2.1截癱組與健康對照組血清免疫球蛋白IgG、IgA、IgM及補(bǔ)體C3、C4水平比較 結(jié)果顯示，截癱組血清IgG、補(bǔ)體C3、C4水平顯著高于健康對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，截癱組IgA高于健康對照組、IgM低于健康對照組，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表1。

表1 兩組各指標(biāo)比較

表2 截癱患者2016年各指標(biāo)與2010年結(jié)果比較

2.2截癱患者2016年血清免疫球蛋白IgG、IgA、IgM及補(bǔ)體C3水平與2010年結(jié)果比較 結(jié)果顯示，截癱患者2016年血清中IgG、IgA、IgM水平顯著低于2010年，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，補(bǔ)體C3亦低于2010年，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表2。

2.3相關(guān)性分析 截癱患者血清中免疫球蛋白IgG、IgA、IgM及補(bǔ)體C3、C4與外周血中CD4+、CD8+T細(xì)胞、CD19+B細(xì)胞和CD16+CD56+NK細(xì)胞的相關(guān)性分析結(jié)果顯示，血液中IgA與C4、IgA與CD16+CD56+相關(guān)，相關(guān)系數(shù)r分別為0.264和0.291，P值分別為0.022和0.031。血液中C4與C3、C4與CD4+、C4與CD8+、C4與CD16+CD56+顯著性相關(guān)，相關(guān)系數(shù)r分別為0.348、0.504、0.562和-0.865，P值分別為0.002、0.000、0.000和0.000。其余均無相關(guān)性。見表3。

表3 截癱患者血清中各指標(biāo)與外周血中CD4+、CD8+T細(xì)胞、CD19+B細(xì)胞和CD16+CD56+NK細(xì)胞的相關(guān)性

續(xù)表3 截癱患者血清中各指標(biāo)與外周血中CD4+、CD8+T細(xì)胞、CD19+B細(xì)胞和CD16+CD56+NK細(xì)胞的相關(guān)性

注：*表示在0.05水平(雙側(cè))上相關(guān)；**表示 在 0.01 水平(雙側(cè))上顯著相關(guān)；-表示無數(shù)據(jù)

3 討 論

免疫功能分為非特異性免疫和特異性免疫，其中特異性免疫又包括體液免疫和細(xì)胞免疫，由T、B細(xì)胞來完成。B淋巴細(xì)胞介導(dǎo)體液免疫，其受特異性抗原刺激后，分化、增殖為漿細(xì)胞產(chǎn)生抗體，如IgM、IgG、IgA等，發(fā)揮免疫效應(yīng)等。補(bǔ)體可協(xié)同抗體形成抗原-抗體復(fù)合物，產(chǎn)生溶菌和溶細(xì)胞現(xiàn)象，它的作用是多方面的[3]。本研究結(jié)果顯示，地震截癱患者40年后，血清IgG、補(bǔ)體C3、C4水平顯著高于健康對照組。說明截癱患者長期受壓瘡、泌尿系感染等并發(fā)癥[4]的影響，機(jī)體長期處于免疫應(yīng)答的狀態(tài)，免疫球蛋白IgG和補(bǔ)體C3、C4水平居高不下，而IgA 和IgM與健康對照組之間比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。而2010年的研究結(jié)果為IgG、IgA、IgM及補(bǔ)體C3、均高于健康對照組[1]。張玉純等[5]研究的唐山地震11年后截癱患者的體液免疫(IgM、IgG、IgA、C3和溶菌酶)和健康人無明顯差別。這也許與采取標(biāo)本時(shí)各截癱患者并發(fā)癥的發(fā)生和進(jìn)展有直接關(guān)系。與李湘英[6]在免疫球蛋白及補(bǔ)體的測定在系統(tǒng)性紅斑狼瘡中研究相似。

本研究結(jié)果與2010年自身結(jié)果相比，IgM、IgG、IgA顯著減低，C3輕度減低，可能是因?yàn)槿梭w老齡化，機(jī)體免疫功能下降的緣故。與林俊錦等[7]研究的老年結(jié)核病患者較青壯年患者細(xì)胞免疫功能低下相符。同時(shí)因?yàn)楦鞣N并發(fā)癥的原因，截癱患者機(jī)體細(xì)胞免疫功能紊亂，淋巴細(xì)胞亞群分布異常，CD4+細(xì)胞減少或功能低下[2]，其產(chǎn)生淋巴因子協(xié)助B淋巴細(xì)胞表達(dá)和分泌免疫球蛋白的能力相對減弱，從而導(dǎo)致體液中IgM、IgG、IgA減少。

T、B淋巴細(xì)胞及NK細(xì)胞均為免疫細(xì)胞，參與免疫應(yīng)答，清除進(jìn)入機(jī)體的細(xì)菌和病毒等。

其中T淋巴細(xì)胞介導(dǎo)細(xì)胞免疫，CD4+和CD8+T細(xì)胞相互制約及平衡可以平衡機(jī)體的免疫應(yīng)答。本研究結(jié)果顯示IgA與補(bǔ)體C4和NK細(xì)胞有相關(guān)性，補(bǔ)體C4與CD4+和CD8+T細(xì)胞和NK細(xì)胞均有顯著相關(guān)性，說明體液免疫和細(xì)胞免疫在免疫應(yīng)答中協(xié)同發(fā)揮作用。其中免疫球蛋白IgA的作用不容忽視，作用機(jī)理有待進(jìn)一步研究。其中補(bǔ)體C4與IgA、CD4+和CD8+T細(xì)胞和NK細(xì)胞之間均有相關(guān)，說明C4積極發(fā)揮了多項(xiàng)作用。李冰等[8]的研究也探討了C4在系統(tǒng)性紅斑狼瘡中診斷價(jià)值。國外研究也發(fā)現(xiàn)在人類急性腦損傷中的腦組織損傷區(qū)有補(bǔ)體C4d的大量沉積[9]。說明補(bǔ)體C4在機(jī)體的免疫應(yīng)答中起了重要作用，還有待進(jìn)一步研究。

4 結(jié) 論

唐山地震截癱患者40年來多種并發(fā)癥的存在，激發(fā)機(jī)體的免疫系統(tǒng)發(fā)生了紊亂，淋巴細(xì)胞亞群比例失調(diào)，不僅細(xì)胞免疫功能低下，IgM、IgG、IgA 和C3、C4水平均有不同程度變化。因此對免疫球蛋白、補(bǔ)體及淋巴細(xì)胞亞群聯(lián)合檢測，對于監(jiān)測病情和指導(dǎo)治療有一定參考作用。