高效液相色譜法在藥品檢驗(yàn)中的應(yīng)用效果

王晶

（哈爾濱市食品藥品檢驗(yàn)檢測(cè)中心，黑龍江 哈爾濱150000）

高效液相色譜法，最早出現(xiàn)在20 世紀(jì)初。在不斷的發(fā)展中，這項(xiàng)技術(shù)以及相關(guān)理論已經(jīng)得到了較為廣泛的應(yīng)用。高效液相色譜法已經(jīng)被應(yīng)用在生物醫(yī)藥，生命科學(xué)和食品科學(xué)等多個(gè)領(lǐng)域中，并且這項(xiàng)技術(shù)在藥品檢驗(yàn)中的應(yīng)用尤為廣泛。從《中國藥典》的相關(guān)描述中可以看出，這種方法具有一定的應(yīng)用科學(xué)性。自此記錄后，這一技術(shù)便在藥品檢驗(yàn)中得到迅速發(fā)展。從當(dāng)前的發(fā)展情況看，高效液相色譜法已經(jīng)成為了我國藥品檢驗(yàn)的主要檢測(cè)方法。據(jù)相關(guān)數(shù)據(jù)研究結(jié)果顯示，在將其與其他普通傳統(tǒng)檢驗(yàn)方法進(jìn)行比較時(shí)，高效液相色譜法的檢測(cè)效果更加顯著。以此為依據(jù)，探究高效液相色譜法的應(yīng)用情況和應(yīng)用效果。

1 高效液相色譜的應(yīng)用情況

1.1 應(yīng)用原理

高效液相色譜是色譜法的一種。高效液相色譜法的流動(dòng)相是液體（包括不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑或緩沖液）。運(yùn)用高壓輸液系統(tǒng)，樣品隨流動(dòng)相進(jìn)入色譜柱內(nèi)。樣品各組分在色譜中由于吸附能力，分配情況的不同被分離，最終進(jìn)入檢測(cè)器，根據(jù)保留時(shí)間的不同，進(jìn)行定量定性檢測(cè)分析。

1.2 應(yīng)用特點(diǎn)

高效液相色譜法的特點(diǎn)：①檢測(cè)時(shí)間短。②靈敏度高。③應(yīng)用范圍廣。

1.2.1 檢測(cè)時(shí)間短：與傳統(tǒng)檢驗(yàn)方法比較，分析檢測(cè)所需時(shí)間少。一般樣品的檢測(cè)都在幾分鐘到幾十分鐘內(nèi)完成，大大提高了檢驗(yàn)檢測(cè)的效率。

1.2.2 靈敏度高：實(shí)際應(yīng)用中，檢測(cè)器的檢測(cè)靈敏度更高，并且具有較高的選擇性。紫外檢測(cè)器可達(dá)0.01ng，進(jìn)樣量在μL 數(shù)量級(jí)。

1.2.3 應(yīng)用范圍廣：普通液相只適用于易分離、沸點(diǎn)比較低以及熱穩(wěn)定性較強(qiáng)的樣品，而高效液相色譜法不受這些條件的影響，能夠分離、檢測(cè)70%以上的有機(jī)化合物。其次，根據(jù)物質(zhì)物理與化學(xué)性質(zhì)的不同，選擇不同填料的色譜柱。種類繁多的色譜柱，也在一定程度上擴(kuò)大了高效液相色譜的應(yīng)用范圍。

高效液相色譜法的應(yīng)用非常廣泛，分離的物質(zhì)種類多，分離效率高，靈敏度高，并且色譜柱可循環(huán)利用。樣品經(jīng)過色譜柱不易被破壞，據(jù)此可用于單一組分的制備與收集。

2 高效液相色譜在藥品檢驗(yàn)中的應(yīng)用效果

2.1 在有關(guān)物質(zhì)檢驗(yàn)方面

藥品有關(guān)物質(zhì)的限度檢查與控制是藥品有效性及安全性的重要保證。高效液相色譜是有關(guān)物質(zhì)檢查常用方法，可以用于雜質(zhì)的定量與定性分析。韋林洪[1]等建立了高效液相色譜法測(cè)定地塞米松及有關(guān)物質(zhì)的方法。地塞米松與1，2- 二氫物、16β- 甲基環(huán)氧物和17- 脫氧-21 醇等雜質(zhì)分離效果好。同時(shí)可以測(cè)定地塞米松與各雜質(zhì)的含量。楊清舉[2]建立檢測(cè)依達(dá)拉奉注射液中有關(guān)物質(zhì)含量的高效液相色譜法。此方法依達(dá)拉奉主成分與各雜質(zhì)分離效果好，目標(biāo)雜質(zhì)的回收率均達(dá)99%～102%。采用高效液相色譜法硫酸沙丁胺醇原料藥中硫酸沙丁胺醇主成分及十四種雜質(zhì)均能得到有效分離，同時(shí)可以測(cè)定五種雜質(zhì)的含量[3]。鹽酸莫西沙星原料藥中鹽酸莫西沙星與八種雜質(zhì)分離效果好，八種雜質(zhì)均能完成定量分析[4]。張曉曉[5]等用高效液相色譜法測(cè)定鹽酸阿羅洛爾的含量，同時(shí)可以測(cè)定三種雜質(zhì)的含量。以磷酸鹽緩沖液為流動(dòng)相梯度洗脫可以檢測(cè)利多卡因貼片的有關(guān)物質(zhì)含量。采用高效液相色譜法可將抗癌藥物卡巴他賽注射液中雜質(zhì)與主成分有效分離并測(cè)定其雜質(zhì)的含量。用苯基硅烷鍵合硅膠柱可以測(cè)定降血脂藥非諾貝酸中主成分與有關(guān)物質(zhì)含量。用氨基色譜柱可以測(cè)定鹽酸氨基葡萄糖片中三種雜質(zhì)的含量。

2.2 在含量測(cè)定方面

高效液相色譜法在藥品含量測(cè)定方面具有樣品用量少，分析速度快，準(zhǔn)確度高，專屬性強(qiáng)等特點(diǎn)。尤其在中成藥方面，可以同時(shí)測(cè)定多種目標(biāo)組分的含量。

陸萍[6]等建立高效液相色譜法同時(shí)測(cè)定紫草油中左旋紫草素、歐前胡素、異歐前胡素和綠原酸含量的方法，上述四種成分的回收率均大于90%。顧佼佼[7]用高效液相色譜法檢測(cè)小兒咳喘顆粒中黃芩苷與鹽酸麻黃堿含量，該方法重現(xiàn)性好，檢測(cè)成本低。舒婷，黃湘杰[8]利用高效液相色譜法建立補(bǔ)肺活血膠囊中五種成分含量的指紋圖譜法，可測(cè)定其中毛蕊異黃酮葡萄糖苷、芒柄花素、芍藥苷、補(bǔ)骨脂素、異補(bǔ)骨脂素的含量。劉彩君，朱芹[9]建立參苓白術(shù)散高效液相色譜特征圖譜，并測(cè)定其中五個(gè)指標(biāo)性成分：人參皂苷Rg1、人參皂苷Rb1、人參皂苷Re、甘草苷和甘草酸的含量。李華麗[10]等用高效液相色譜法測(cè)定婦炎康中丹酚酸、原兒茶醛、丹參素、芍藥苷四種成分的含量。

2.3 新技術(shù)的應(yīng)用

高效液相色譜- 串聯(lián)質(zhì)譜法（HPLC-MS/MS）是一種高選擇性的分析方法。這種方法可以同時(shí)完成分離與定量分析。近年來，HPLC-MS/MS 應(yīng)用于中成藥組分的含量測(cè)定[11]及中藥農(nóng)藥殘留測(cè)定；化妝品中化學(xué)成分的含量測(cè)定[12]；食品中抗生素殘留及農(nóng)藥殘留的測(cè)定等。高效液相色譜- 串聯(lián)質(zhì)譜法技術(shù)的應(yīng)用，擴(kuò)展了高效液相色譜法的應(yīng)用領(lǐng)域，使得其在藥品檢驗(yàn)檢測(cè)中發(fā)揮更大的作用。

3 結(jié)論

高效液相色譜法在藥品檢驗(yàn)工作中的應(yīng)用，具有一定的特點(diǎn)，不僅對(duì)應(yīng)的選擇性強(qiáng)，靈敏度較高，而且能夠同時(shí)實(shí)現(xiàn)對(duì)物質(zhì)的分離與測(cè)量。主要用于藥品的鑒定，有關(guān)物質(zhì)的檢查和有效成分含量的測(cè)定等。同時(shí)，高效液相色譜法能夠?yàn)橹兴幱行С煞值姆治鎏峁┬滤悸罚M(jìn)而促進(jìn)我國中醫(yī)藥事業(yè)的進(jìn)一步發(fā)展。

綜上所述，在進(jìn)行藥品檢驗(yàn)的工作過程中，將高效液相色譜進(jìn)行應(yīng)用，其對(duì)應(yīng)的應(yīng)用效果是較為顯著的，能夠促進(jìn)整體檢出率的提高。此方法在藥品檢驗(yàn)過程中，起著至關(guān)重要的作用，極大的提高了藥品檢驗(yàn)的效率和質(zhì)量。