食品檢測實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制與管理液相色譜

王海澍　王云衢

羅丹明B（Rhodamine B）又稱玫瑰紅B，或堿性玫瑰精，俗稱花粉紅，是一種具有鮮紅桃色的人工合成染料，曾經(jīng)用作食品添加劑，但后來實(shí)驗(yàn)證明羅丹明B致癌，現(xiàn)已不允許用作食品染色。作為一種具有潛在的致癌、致突變性的心臟毒性的人工合成堿性熒光染料，羅丹明B在市場上被不法商販添加于調(diào)味品如辣椒面、辣椒醬、花椒、火鍋底料等中，從中牟取利益。我國各地食品藥品監(jiān)督管理局曾多次對非法添加羅明丹B進(jìn)行專項(xiàng)檢查。因此，調(diào)味品中羅丹明B的測定研究可為食品監(jiān)管部門提供技術(shù)支持，在保障食品安全方面具有重大意義。

1.儀器設(shè)備

安捷倫液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀1260-6460（軟件版本：MassHunter Version B.06.00）;SPS202F電子天平，梅特勒-托利多（常州）稱量設(shè)備系統(tǒng)有限公司

2.試劑及標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)

甲醇，色譜純;甲酸（純度88%）;羅丹明B（純度：98.6%）lot：40815。

標(biāo)準(zhǔn)溶液配制：準(zhǔn)確稱取按其純度折算為100%質(zhì)量的標(biāo)準(zhǔn)品0.0100g，置于100mL容量瓶中，甲醇定容，配制儲備液（0.1mg/mL）;中間儲備液：取1mL標(biāo)準(zhǔn)儲備液于100mL容量瓶中，用甲醇水（1∶1）定容，中間儲備液濃度（1000ng/mL）;標(biāo)準(zhǔn)使用液：取1mL中間儲備液于100mL容量瓶中，用甲醇水（1∶1）定容，配制成標(biāo)準(zhǔn)使用液（10ng/mL）;分別移取標(biāo)準(zhǔn)使用液50、100、250、500、750μL，用甲醇水（1∶1）定容1mL，配制成0.5、1、2.5、5、7.5、10ng/mL系列標(biāo)準(zhǔn)工作液。

3.儀器測試條件

ESI源;正模式;色譜柱：C18柱，2.1mm×100mm，1.7μm;柱溫：35oC;進(jìn)樣量：10μL;流速0.2mL/min;梯度洗脫條件見表1。

4.樣品前處理

稱取2g（精確到0.01g）樣品，置于50mL聚丙烯離心管中，準(zhǔn)確加入25mL乙酸乙酯-環(huán)己烷（1∶1）溶液，渦旋混合提取2mim，再超聲提取15min，4000r/min離心5min，過0.22μm有機(jī)膜，待凈化。取10mL待凈化液過PCX小柱（PCX小柱預(yù)活化：6mL甲醇、6mL水），4mL水和4mL甲醇淋洗，用8mL5%氨水甲醇洗脫，于45°C氮吹吹干，用甲醇水（1∶1）復(fù)溶，定容1mL，過0.22μm有機(jī)膜待上機(jī)。

5.方法檢出限及線性回歸方程

對配制的羅丹明B系列標(biāo)準(zhǔn)工作溶液進(jìn)行測試，線性回歸方程、相關(guān)系數(shù)及方法檢出限（按S/N=3計(jì)）見表2。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明羅丹明B在0-10ng/mL范圍內(nèi)線性良好，相關(guān)系數(shù)為0.999。

6.回收率與精密度

在不含羅丹明B的調(diào)料中，分別添加含量為5、10、25μg/kg三個(gè)濃度水平的標(biāo)樣，每個(gè)水平平行測定6次，其回收率和相對標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）見表3。

7.結(jié)論

羅丹明B采用外標(biāo)法定量。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，羅丹明B在0-10ng/mL范圍內(nèi)具有良好的線性關(guān)系，相關(guān)系數(shù)為0.999，方法檢出限為0.001μg/kg，該目標(biāo)化合物的平均添加回收率為80.45%-117.57%，RSD均小于5.0%。本方法具有前處理簡單、快速、結(jié)果準(zhǔn)確可靠等優(yōu)點(diǎn)，可用于調(diào)料中非法添加物羅丹明B的檢測。