寧夏回族自治區(qū)一起非洲豬瘟疫情的流行病學(xué)調(diào)查

（寧夏回族自治區(qū)動(dòng)物疾病預(yù)防控制中心，寧夏銀川 750011）

非洲豬瘟（African swine fever，ASF）是由非洲豬瘟病毒（African swine fever virus，ASFV）引起的高度接觸性豬急性傳染病，世界動(dòng)物衛(wèi)生組織將其列為須通報(bào)動(dòng)物疫病，我國將其列為一類動(dòng)物疫病[1]。ASF 不僅嚴(yán)重威脅養(yǎng)豬業(yè)的健康發(fā)展，還嚴(yán)重威脅食品安全，可造成極大的經(jīng)濟(jì)損失。2018 年8 月，我國首次在遼寧省沈陽市發(fā)現(xiàn)ASF疫情[2]，隨后疫情擴(kuò)散至全國其他地區(qū)，給我國養(yǎng)豬業(yè)造成巨大經(jīng)濟(jì)損失。

2019 年5 月21 日，寧夏回族自治區(qū)石嘴山市惠農(nóng)區(qū)確診發(fā)生ASF 疫情。這是寧夏回族自治區(qū)第2 起、全國第132 起ASF 疫情。為追溯這起ASF 疫情的來源和擴(kuò)散風(fēng)險(xiǎn)，寧夏回族自治區(qū)農(nóng)業(yè)農(nóng)村廳組建流行病學(xué)調(diào)查工作組，對(duì)惠農(nóng)區(qū)ASF疫情的發(fā)生、發(fā)展、可能來源及疫情擴(kuò)散風(fēng)險(xiǎn)等進(jìn)行了調(diào)查分析，從生豬調(diào)運(yùn)、飼料、泔水、生物安全等風(fēng)險(xiǎn)因素入手，結(jié)合實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)結(jié)果，綜合分析了ASF 傳播的可能途徑。

1 材料與方法

1.1 現(xiàn)場(chǎng)調(diào)查

同當(dāng)?shù)卣约靶竽痢⒐病⑹袌?chǎng)監(jiān)管等部門相關(guān)人員進(jìn)行座談，現(xiàn)場(chǎng)查閱發(fā)病豬場(chǎng)相關(guān)文件、記錄，實(shí)地查看封鎖消毒關(guān)卡、無害化處理點(diǎn)、屠宰場(chǎng)、超市、餐飲企業(yè)、消毒檢查站，詢問相關(guān)從業(yè)人員，采集相關(guān)樣品進(jìn)行ASF 檢測(cè)。綜合獲得的相關(guān)信息，從溯源、追蹤和風(fēng)險(xiǎn)分析等方面開展流行病學(xué)調(diào)查。

1.2 溯源

調(diào)查首發(fā)病例出現(xiàn)前1 個(gè)月內(nèi)該場(chǎng)的情況，從生豬及豬肉產(chǎn)品調(diào)運(yùn)、飼料使用情況、是否飼喂泔水以及生物安全等方面進(jìn)行溯源，并采樣進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)，分析該場(chǎng)感染ASFV 的可能途徑。

1.3 追蹤

追蹤近1 個(gè)月內(nèi)的生豬調(diào)出、病死豬處理、養(yǎng)殖場(chǎng)內(nèi)糞便和雜物處理等情況，并采樣進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)，分析ASF 擴(kuò)散的可能性和途徑。

1.4 實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)

1.4.1 樣品采集 根據(jù)追溯調(diào)查情況，在疫區(qū)豬場(chǎng)及購入疫點(diǎn)仔豬的豬場(chǎng)等有流行病學(xué)關(guān)聯(lián)的養(yǎng)豬場(chǎng)，以及與疫點(diǎn)相關(guān)的餐飲機(jī)構(gòu)、豬肉銷售攤點(diǎn)、生豬運(yùn)輸車輛，共采集樣品481 份（表1）。

1.4.2 檢測(cè)試劑 核酸提取試劑盒（磁珠法）：購自蘇州天隆生物科技有限公司（批號(hào)H0419010211）；ASFV 熒光PCR 檢測(cè)試劑盒：購自青島立見診斷技術(shù)發(fā)展中心（批號(hào)040251901）。

1.4.3 檢測(cè)方法 樣品處理和試驗(yàn)過程，按照中國動(dòng)物衛(wèi)生與流行病學(xué)中心編制的《非洲豬瘟實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)操作程序》和農(nóng)業(yè)農(nóng)村部推薦的熒光PCR方法進(jìn)行；核酸提取過程，嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行操作。

2 結(jié)果與分析

2.1 發(fā)病情況

2019 年5 月20 日下午，惠農(nóng)區(qū)動(dòng)物疾病預(yù)防控制中心接到某養(yǎng)殖戶報(bào)告，稱其飼養(yǎng)的生豬有異常死亡。惠農(nóng)區(qū)動(dòng)物疾病預(yù)防控制中心使用ASF快速檢測(cè)試紙條進(jìn)行檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)結(jié)果呈陽性；遂對(duì)2 頭病死豬進(jìn)行剖檢，采集樣品連夜送至寧夏回族自治區(qū)動(dòng)物疾病預(yù)防控制中心進(jìn)行檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)仍為ASFV 核酸陽性。經(jīng)調(diào)查，該養(yǎng)殖場(chǎng)位于石嘴山市惠農(nóng)區(qū)河濱街道辦事處（東經(jīng)106.770 368，北緯39.272 347），距離“石鋼線”約500 m，四周被多個(gè)煤礦企業(yè)及電場(chǎng)等包圍（圖1）。疫區(qū)（疫點(diǎn)周圍3 km）內(nèi)，還有1 戶生豬養(yǎng)殖戶，存欄24 頭；受威脅區(qū)（疫點(diǎn)周圍10 km）內(nèi)，有生豬養(yǎng)殖場(chǎng)戶474 戶，存欄6 581 頭，經(jīng)排查均未見異常。

圖1 石嘴山市惠農(nóng)區(qū)地理位置（A）和疫點(diǎn)豬場(chǎng)位置（B）

該養(yǎng)殖戶為自繁自養(yǎng)，主要出售仔豬；生豬存欄40 頭，其中母豬13 頭、種公豬1 頭、仔豬26 頭。2019 年5 月14 日，其飼養(yǎng)的生豬開始出現(xiàn)精神不振、厭食、氣喘等癥狀，使用雙黃連、全能頭孢、氟苯尼考和鹽酸多西環(huán)素等獸藥進(jìn)行治療，無明顯效果。5 月17 日1 頭母豬死亡，5 月20 日2 頭母豬死亡，5 月21 日凌晨1 頭母豬死亡。疫病流行曲線見圖2。

圖2 疫病流行曲線

發(fā)病豬主要表現(xiàn)厭食、氣喘、皮膚發(fā)紺、精神不振等癥狀，剖檢可見脾臟異常腫大、腸系膜淋巴結(jié)腫大出血（圖3）。

圖3 現(xiàn)場(chǎng)死亡豬只及剖檢情況

2.2 溯源和追蹤情況

2.2.1 溯源

2.2.1.1 飼料及飲水 該養(yǎng)殖戶駕駛自己的電動(dòng)三輪車定期從某飼料廠購買飼料，包括發(fā)酵型飼料、麩皮、玉米面等。現(xiàn)場(chǎng)采集飼料樣品進(jìn)行檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)為ASFV 核酸陰性，因此由飼料帶入病毒的風(fēng)險(xiǎn)極低。該養(yǎng)殖戶使用自來水，水樣經(jīng)檢測(cè)為ASFV核酸陰性，因此經(jīng)水源帶入病毒的風(fēng)險(xiǎn)極低。

2.2.1.2 豬肉及豬肉產(chǎn)品 場(chǎng)主自述從未將購買的豬肉帶進(jìn)養(yǎng)殖場(chǎng)區(qū)，在家也不食用豬肉，現(xiàn)場(chǎng)也未發(fā)現(xiàn)任何肉制品，因此由豬肉及豬肉產(chǎn)品帶入病毒的風(fēng)險(xiǎn)較低。

2.2.1.3 泔水 養(yǎng)殖戶自述，2019 年1 月后未再用泔水飼喂過生豬；經(jīng)調(diào)查，該養(yǎng)殖戶以前經(jīng)常去收集泔水的餐館也證實(shí)再未見過該養(yǎng)殖戶收集泔水；現(xiàn)場(chǎng)查看養(yǎng)殖戶場(chǎng)區(qū)內(nèi)安裝的監(jiān)控錄像，也沒有發(fā)現(xiàn)泔水運(yùn)輸情況。因此，由泔水帶入病毒的風(fēng)險(xiǎn)較低。

2.2.1.4 生豬調(diào)運(yùn) 該養(yǎng)殖戶最后一次調(diào)入種公豬是在1 年以前，因此由生豬調(diào)入帶入病毒的風(fēng)險(xiǎn)極低。2019 年5 月1—15 日，兩名生豬販運(yùn)人曾到該養(yǎng)殖場(chǎng)區(qū)內(nèi)購買仔豬、母豬，且均進(jìn)入了養(yǎng)殖區(qū)。雖然兩名生豬販運(yùn)人3—5 月曾去過的生豬養(yǎng)殖場(chǎng)戶以及其自家飼養(yǎng)的生豬、運(yùn)輸車輛及環(huán)境拭子等樣品檢測(cè)結(jié)果均為陰性，但由其攜帶病原導(dǎo)致疫情發(fā)生的風(fēng)險(xiǎn)仍較高。

2.2.1.5 廢品雜物 該養(yǎng)殖戶常年從各處收集各種廢品雜物，包括大量運(yùn)煤車拋棄的廢棄雜物，且隨意堆放在養(yǎng)殖場(chǎng)區(qū)內(nèi)，因此由廢棄破爛攜帶病原導(dǎo)致該起疫情發(fā)生的風(fēng)險(xiǎn)較高。

2.2.1.6 周邊流浪犬 該養(yǎng)殖戶飼養(yǎng)的豬為散養(yǎng)，俗稱溜達(dá)豬，周邊流浪犬也可隨意進(jìn)出場(chǎng)區(qū)，與養(yǎng)殖生豬有直接或間接接觸；該養(yǎng)殖場(chǎng)戶周邊有多家漢餐館及企業(yè)食堂。因此，由流浪犬?dāng)y帶病原導(dǎo)致疫情發(fā)生的風(fēng)險(xiǎn)較高。

2.2.2 追蹤

2.2.2.1 生豬調(diào)出情況 2019 年5 月1 日生豬販運(yùn)人A 從該養(yǎng)殖戶購買15 頭豬出售給養(yǎng)殖戶B，5 月21 日又從養(yǎng)殖戶C 購買了15 頭豬暫養(yǎng)。5 月9 日生豬販運(yùn)人B 從該養(yǎng)殖戶購買5 頭小豬出售給養(yǎng)殖戶D，5 月15 日又從該養(yǎng)殖戶購買3 頭母豬，在自家養(yǎng)殖場(chǎng)區(qū)內(nèi)飼養(yǎng)。此外，生豬販運(yùn)人B 曾于4 月16 日將自家6 頭肥豬和從養(yǎng)殖戶E 收購的10 頭豬拉到惠農(nóng)生豬定點(diǎn)屠宰場(chǎng)屠宰。對(duì)兩名生豬販運(yùn)人3—5 月所涉及的4 個(gè)養(yǎng)殖戶以及惠農(nóng)生豬定點(diǎn)屠宰場(chǎng)等均進(jìn)行了現(xiàn)場(chǎng)排查與抽樣檢測(cè)，結(jié)果均未發(fā)現(xiàn)異常。采集疫區(qū)內(nèi)養(yǎng)殖戶F（生豬存欄24 頭）的生豬血清與環(huán)境拭子樣品及生豬販運(yùn)人的生豬運(yùn)輸車輛環(huán)境拭子樣品等進(jìn)行病原學(xué)檢測(cè)，結(jié)果均為陰性。綜上判定，疫情擴(kuò)散的風(fēng)險(xiǎn)較低。

2.2.2.2 病死豬及豬糞無害化處理 疫情確診后，對(duì)同群豬進(jìn)行了撲殺，并對(duì)病死豬及豬糞進(jìn)行了無害化處理。由此，疫情擴(kuò)散的風(fēng)險(xiǎn)較低。

2.2.2.3 陽性相關(guān)產(chǎn)品處理 僅疫點(diǎn)環(huán)境樣品檢測(cè)出病原學(xué)陽性，并對(duì)疫點(diǎn)進(jìn)行了全面封鎖與消毒處理，且該養(yǎng)殖場(chǎng)周邊人煙稀少，因此疫情擴(kuò)散風(fēng)險(xiǎn)較低。

2.3 實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)

采集的481 份樣品經(jīng)檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，10 份組織樣品和9 份發(fā)病養(yǎng)殖場(chǎng)環(huán)境拭子樣品為ASFV 核酸陽性，血清和豬肉樣品均為陰性（表2）。

3 討論

綜合判定，該起疫情由養(yǎng)殖戶飼養(yǎng)的溜達(dá)豬、廢品雜物和出售生豬等原因造成的可能性最高。養(yǎng)殖戶生物安全意識(shí)淡漠、生產(chǎn)管理措施原始粗放，基本沒有生物安全防護(hù)措施，對(duì)ASF 疫情的發(fā)生毫無防范能力，是導(dǎo)致病原傳入的主要風(fēng)險(xiǎn)因素[3]。建議當(dāng)?shù)蒯槍?duì)不同養(yǎng)殖情況，加大ASF 防控知識(shí)宣傳，促進(jìn)養(yǎng)殖場(chǎng)戶提升生物安全水平，加強(qiáng)人員、物品、車輛的清洗消毒，同時(shí)整頓各類散、亂、小生豬養(yǎng)殖戶，清退落后養(yǎng)殖散戶，禁止飼養(yǎng)“泔水豬、垃圾豬、溜達(dá)豬”。

表2 不同樣品采集場(chǎng)點(diǎn)檢測(cè)結(jié)果

生豬販運(yùn)人頻繁接觸各類養(yǎng)豬場(chǎng)戶、車輛和人員，不能嚴(yán)格執(zhí)行清洗消毒措施，人員、車輛清洗消毒不徹底，這些都是ASFV 跨區(qū)域長距離傳播的重要因素[4]。販運(yùn)戶及生豬運(yùn)輸車輛的清洗消毒是切斷病毒傳播途徑重要手段，因此建議當(dāng)?shù)夭扇♂槍?duì)性措施，規(guī)范生豬和生豬產(chǎn)品的跨地區(qū)調(diào)運(yùn)、產(chǎn)地檢疫和運(yùn)輸車輛備案管理以及相關(guān)場(chǎng)所和車輛的清洗消毒。