張 吉
(哈爾濱市大工司法鑒定科學技術研究所,黑龍江哈爾濱 150001)
新時代需要重視蔬菜噴灑農藥,并且70%的農藥都是有機磷農藥,那么蔬菜中必定會殘留一些超標的物質,對人體健康以及安全具有嚴重影響和威脅。為提升人們身體健康程度,提出了蔬菜農藥殘留物質檢測工作,對田間蔬菜進行普查,做好農貿市場調查工作,滿足人們實際需求,做好化學檢驗工作,防止蔬菜中存在過多農藥物質,影響人體身體健康。
此種方法就是結合蔬菜中的有機磷農藥氧化還原性進行合理檢測和分析,有機磷農藥中存在的物質如磷脂酸、磷酸銨等,會在催化劑基礎下發生水解,轉變為磷酸以及醇,并且最后的水解產物和顯色劑發生反應,將紫紅色轉變為無色。具體檢測步驟就是,選擇3~4mL農藥溶液,和兩小滴紫紅色顯色劑溶液均勻混合在一起,然后向其中添加黃色催化劑,劑量為四滴,將反應位置放置5~10min左右,液體發生褪色則表示農藥中殘留物質超標。此種檢測方法的優勢在于屬于化學反應,方法比較穩定,操作比較簡單,不需要進行前期培訓,一次可以完成多個樣品實驗工作,并且檢測消耗的時間是非常短的。不過缺點就是在臨界點周圍存在的顏色變化并不明顯,對特定有機農藥比較敏感,容易受到還原性物質的干擾[1]。
此種方法就是有機磷和氨基甲酸脂農藥可特異性的抑制乙酰膽堿酯酶自身的活動,將準備好的樣品和乙酰膽堿酯酶混合在一起,結合混合后出現的顏色以及物理信息變化程度進行判斷,可以識別出農藥中有機磷以及氨基甲酸脂類殘留?,F在最常用酶抑制法為:速測卡、比色法以及膽堿酯酶生物傳感器法等[2]。速測卡也就是紙卡測試方法,操作十分簡單,使用期間比計較方便,可以直接使用在田間以及超市中的蔬菜農藥殘留物質檢測工作中[3]。比色法可以稱之為分光光度法,同樣也是借助有機磷以及氨基甲酸酯類對農藥中存在的乙酰膽堿酯酶抑制作用實現檢測目的,因為抑制率和農藥配比濃度之間存在一定關系,所以可以使用分光光度計數和讀書方式進行檢測。上述兩種方法都可以在現場即可完成現場檢測工作,迅速得到購買的蔬菜中是否存在殘留的農藥物質,可以有效避免農藥殘留蔬菜進入到市場,保證人們食用蔬菜的安全性。酶生物傳感器是通過物質進行識別,主要是由固定化酶膜和生物點擊組成的,檢測工作原理是借助酶自身存在的專一性特點,以酶促反應作為依據,使得生物點擊可以有效傳輸信息,進而完成定量分析工作。酶生物傳感器存在過程迅速,操作容易、靈活度高以及特異性強等基本特征,不過因為使用的酶試劑保存不方便,容易失去活性,所以檢測結果不夠真實,數據并不穩定。
基于此詳細介紹化學比色法,在一定條件下,有機磷和氨基甲酸酯類農藥會對膽堿酯酶起到一種抑制效果,并且抑制程度和農藥自身配比存在一定關系。一般情況下,酶會對乙酰膽堿進行催化,進而出現水解反應,最終形成的產物會和顯色劑發生反應,進而出現黃色物質,在分光光度計處在412nm期間,記錄吸光度隨著時間變化的數值,通過有效記錄后進行計算,可以得到抑制率,通過抑制率的推算可以判斷蔬菜中是否含有高濃度有機磷或者氨基甲酸脂類物質。檢測具體過程就是,選擇一種蔬菜作為樣品,然后使用清水將蔬菜表層存在的泥土全部清洗干凈,然后使用剪刀將其剪成1cm的碎片,從中選擇1g作為實驗樣品,然后將其放入到燒杯之中,再加入5mL的緩沖液,蓋上蓋子進行震蕩,時間控制在1~2min,將提取液提取出來,靜置3~5min左右等待使用?,F在試管中添加2.5mL緩沖液,進而加入0.1mL酶液和同等劑量的顯色劑,充分搖勻,在正常溫度下放置15min以上,一定要注意不同批次樣品一定要控制好時間。在加入0.1mL底物搖勻,放入到儀器比色池之中,在3min內記錄樣品的吸光度變化數值[4]。結合變化的數值可以計算出正確抑制率,一旦計算出的抑制超過了50%,那么蔬菜中則還有該農藥殘留物,樣品則體現為陽性結果。不同檢測機構使用的儀器存在差異性,酶以及底物的差異必定會引起抑制率的差異。
因為乙酰膽堿酯酶一般都是來自動物血液中的,需要的材料非常昂貴,并且保存并不方便,所以近年來人們研究出一種全新物質水解酶代替乙酰膽堿酯酶進行檢測工作,植物水解能夠加快2,6-二氯乙酰靛酚酶發生水解,并且植物水解酶可以促進α-乙酸萘脂轉化為α-萘酚,和Fe3Cl3溶液發生反應,發生反應后會生成紫色配合物,吸光度處在516nm波長范圍內,顯色反應主要是因為在農藥中被抑制,質量濃度也比較大,吸光度的下降則會加快,依據此關系可以成為植物水解酶分光光度法檢測蔬菜農藥方法。
其工作原理是抗原抗體特異性識別以及結合反應的一種分析形式,農藥以及藥物小分子借助碳鏈長度和大載體結合起來,通常都是指蛋白質這類物質,才能共價鍵之間有效結合,最后可以形成人工抗原形式,再將其注射到動物體內中,以克隆抗體以及細胞技術結合形式,完成抗體克隆工作,再使用抗原酶標記技術,依據顯色反應程度對蔬菜進行合理檢測工作,可以使用三唑酮對黃瓜以及梨等產品進行合理檢測。檢測限達40ug/kg,所以針對農藥中殘留物質的檢測可以使用免疫分析法,主要是酶免疫、反射免疫、熒光免疫和化學發光免疫等,人們最常使用的方式就是酶免疫技術。
蔬菜農藥殘留的有效去除需要使用很多化學知識,比如可以使用堿水浸泡方式,借助化學堿性條件加快有機磷農藥的分解,使用加熱分解法使得農藥中氨基甲酸酯類殺蟲劑被快速分解,對于一些處理難度大的蔬菜,也可以通過高溫加熱方式對殘留物質進行去除。貯藏轉化法是根據蔬菜中農藥殘留依據時間變化逐漸分解原理,對于一些容易保存的蔬菜效果比較明顯,可以降低毒性,減少蔬菜中農藥殘留物質遺留,一直到蔬菜符合人們使用標準后推入市場交易中。也可以借助高頻高電放電,進而可以產生大量臭氧,從而真正達到殺菌效果,與此同時可以保留蔬菜自身味道,延長蔬菜保留時間,便于各種蔬菜的清洗。免疫法操作步驟比較簡單,價格并不昂貴,靈活度十分高以及轉移性等優勢,可以被廣泛使用在蔬菜農藥物質檢測中,但不能對多種農藥物質分析,所以限制了使用領域。
總而言之,因為現在科學技術的迅速發展,蔬菜中農藥殘留物質會被逐漸水解?,F場、快捷的安全檢測方法不斷被研制出來,可以解決農藥殘留物質的壓力,滿足人們健康飲食需求。在農藥檢測中期望研制出更多不需要大型設備和機器檢測技術,可以直接對蔬菜進行檢測,提升檢測工作質量和效率的同時,促進我國農產品發展,提升質量的同時,關注食用安全程度。