外周血T淋巴細胞及乙型肝炎病毒血清標志物與HBV-DNA的相關(guān)性分析

郭文麗，潘春燕，莊潔偉

(深圳市寶安區(qū)人民醫(yī)院檢驗科，廣東 深圳 518101)

乙型肝炎(簡稱乙肝)是以肝臟炎性病變?yōu)橹鞑⒖梢鸲嗥鞴贀p害的傳染病。近年來，乙型肝炎發(fā)病率增長較明顯，據(jù)世界衛(wèi)生組織報道，每年約有100萬人死于乙肝惡化所致的肝衰竭、肝硬化和原發(fā)性肝細胞癌等。多數(shù)學(xué)者認為乙肝發(fā)病的主要原因之一為乙型肝炎病毒(HBV)未得到有效控制，致使病毒在肝臟內(nèi)持續(xù)復(fù)制，而T淋巴細胞可有效維持機體免疫功能。HBV脂蛋白外殼上攜帶乙型肝炎表面抗原HBsAg，其為HBV感染的血清學(xué)標志[1-3]。HBV-DNA作為乙型肝炎病毒感染的指標具有較高的特異性和靈敏性，當HBV復(fù)制及有傳染性時，HBV-DNA 檢測顯示為陽性[4-6]。由于目前較多基層醫(yī)療機構(gòu)對于HBV-DNA檢測暫無條件，可用檢測乙肝血清標志物的方法來體現(xiàn)機體狀態(tài)。本文對外周血T淋巴細胞、乙肝病毒血清標志物及HBV-DNA間的相關(guān)性進行探討分析，以提高乙肝診斷準確率。

1 資料與方法

1.1一般資料:從2014年1月～2015年11月，共納入89例在我院行HBV-DNA檢測的門診及住院患者為研究對象，均符合《病毒性肝炎防治方案》中的診斷標準。研究對象中男45例，女44例，平均年齡為(30.33±7.42)歲。納入標準：①患者認知正常；②無嚴重血液病及重要器官性疾病；③患者及其家屬知情同意。排除標準：①有嚴重遺傳病病史者；②嚴重器官衰竭功能不足者；③拒絕參與此次研究者。

1.2檢測方法

1.2.2乙肝病毒血清標志物檢測:采用ELISA法檢測HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb。嚴格按照試劑盒操作說明進行檢測，檢測所需裝置均在效期內(nèi)使用。

1.2.3HBV-DNA檢測:采用熒光測定PCR法對HBV-DNA水平進行檢測。嚴格按照試劑盒操作說明進行檢測，檢測所需裝置均在效期內(nèi)使用。方法如下：取凍存已裂解的細胞，室溫放置5 min使其完全溶解。分離并清洗后取RNA沉淀物進行溶解，先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1∶100)后，讀取其在分光光度計260 nm和280 nm處的吸收值，測定RNA溶液濃度和純度。

2 結(jié)果

表1 不同HBV-DNA水平外周血T淋巴細胞亞群檢測結(jié)果

2.2不同乙肝病毒血清標志物模式間HBV-DNA陽性率：HBsAg陽性的79例患者中，HBV-DNA陽性率為64.3%；HBsAg陰性的10例患者中，HBV-DNA陽性率為56.4%。HBeAg陽性的27例患者中，HBV-DNA陽性率為88.3%；HBeAg呈陰性的62例患者中，HBV-DNA陽性率為53.1%。由此可知HBeAg較HBsAg相比更為敏感。結(jié)果見表2。

表2 不同乙肝病毒血清標志物模式間HBV-DNA陽性率

3 討論

乙型病毒性肝炎系由乙肝病毒(HBV)引起，患者具有惡心嘔吐、食欲減退、肝功能異常等臨床表現(xiàn)。部分患者病程遷延轉(zhuǎn)為慢性，或發(fā)展為肝硬化甚至肝癌[7]。由于乙肝病毒在體內(nèi)長期存在,肝臟產(chǎn)生不同程度的纖維化；病程持續(xù),可發(fā)展成肝硬化、肝癌等。

HBV-DNA為乙肝病毒脫氧核糖核酸，對檢測乙肝病毒有無復(fù)制有重要作用[8-9]。HBV-ADN檢查為后期治療提供了準確的參考依據(jù)，對于判斷乙肝傳染性強弱、乙肝病毒復(fù)制情況、乙肝抗病毒治療效果等都有十分重要的意義[2]。一般HBV-DNA水平越高，顯示傳染性越強。既往研究顯示，乙肝患者血清HBeAg含量與HBV-DNA之間相關(guān)性較高，可對機體內(nèi)乙肝病毒狀態(tài)進行有效表達[10]。研究表明，BsAg(+)HBeAg(+)HBcAb(+)組的HBV-DNA陽性率為88.4%，與其他血清標志物相比明顯增高，說明HBV-DNA與HBeAg有較高相關(guān)性，在評價乙肝傳染性和病毒復(fù)制情況中較為準確。

綜上所述，乙肝血清標志物與外周血T淋巴細胞在臨床應(yīng)用中均有優(yōu)勢,明確各指標與HBV-DNA檢測結(jié)果間的關(guān)系有助于全面監(jiān)測乙肝病情，為臨床診斷乙肝、治療乙肝及乙肝患者的預(yù)后判斷提供客觀依據(jù)。