FOXP1與AR在前列腺癌中的表達及意義

李 云， 李勝水，許 華，張鳳梅，李雙標，張樹茂

(河北省滄州中西醫(yī)結合醫(yī)院,河北 滄州 061001)

前列腺癌作為男性生殖系統(tǒng)的惡性腫瘤之一，在歐美國家已成為排名第一的危害男性生命健康的腫瘤。近年來，在我國前列腺癌的發(fā)病率及死亡率也逐年升高，因此對前列腺癌的發(fā)生機制及演變過程的研究已成為亟待解決的問題[1]。近年來一些文獻報道叉頭框蛋白P1(FOXP1)作為FOXP亞家族(FOXP1-4)轉錄因子之一，參與生物機體生長發(fā)育的一系列過程，包括對心臟、肺的正常發(fā)育以及在免疫系統(tǒng)中都有重要的調控作用，而且FOXP1的異常表達對不同腫瘤的發(fā)生發(fā)展具有抑制或促進作用[2]。雄激素受體(AR)作為雄激素依賴性轉錄因子，參與細胞的增殖和分化，在前列腺增生及前列腺癌中具有重要作用[3]。本文應用免疫組化SP法檢測FOXP1、AR在前列腺癌中的表達情況，分析探討兩者在前列腺癌發(fā)生發(fā)展過程中的作用，為臨床診治及預后評估提供有效的參考依據。

1 資料與方法

1.1一般資料：選取我院2010年3月～2015年3月經病理證實的石蠟前列腺癌標本50例(前列腺癌組)，正常前列腺標本35例(正常前列腺組)，患者術前均未接受放、化療等治療。

1.2主要試劑：兔抗人FOXP1多克隆抗體(濃縮型，武漢博士德公司)工作液1∶50稀釋；鼠抗人AR多克隆抗體(即用型)、SP免疫組化試劑盒、DAB顯色劑均購于福州邁新公司。

1.3方法：采用免疫組化SP方法染色，將切片脫蠟后進行微波修復，用山羊血清封閉后，滴加抗體置于4℃冰箱過夜。用已知陽性組織做陽性對照，以PBS替代一抗做陰性對照。 次日加入二抗孵育，DAB顯色，蘇木精復染。

1.4免疫組織化學結果判定：FOXP1與AR都是定位于細胞核內，呈棕黃色或棕褐色。光鏡下隨機選擇5～10個視野，計數(shù)100～200個細胞，細胞內出現(xiàn)黃染顆粒為陽性，計算出陽性細胞的百分率。結果評分標準：陽性細胞數(shù)<5%為0分，5%～25%為1分，26%～50%為2分，51%～75%為3分，>75%為4分。染色強度判定：無色為0分，淡黃色為1分，黃色或棕黃色為2分，棕褐色或褐色為3分。染色強度與陽性細胞百分比的乘積<1分為陰性，1～3分為弱陽性，4～6分為陽性，>6分為強陽性。

1.5統(tǒng)計學分析：應用SPSS17.0統(tǒng)計軟件，使用χ2檢驗進行率的比較，相關關系采用Spearman等相關分析，P<0.05表示差異具有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1FOXP1、AR蛋白在良、惡性前列腺組織中的表達情況：FOXP1、AR蛋白在良、惡性前列腺組織中表達比較差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。FOXP1在正常前列腺組表達率86%(30/35)，而在前列腺癌組中表達率為16%(42/50)，兩組比較差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；相反，AR在前列腺癌組中的陽性表達率為80%(40/50)明顯高于正常前列腺組為29%(10/35)，兩組差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。見表1。

2.2FOXP1、AR蛋白在前列腺癌組織與臨床病理參數(shù)的關系:FOXP1與前列腺癌病理分級呈負相關，且在低分化組表達率與高、中分化組表達率比較，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，而AR表達率與前列腺癌病理分級呈正相關，且在各組之間差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；但是這兩種蛋白均與患者年齡無關。見表2。

2.3FOXP1、AR在前列腺癌組織中表達的相關性:在前列腺癌中FOXP1、AR兩種蛋白的表達，分別呈現(xiàn)明顯下調及上調的趨勢，通過相關性分析，兩者之間差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。見表3。

表1 FOXP1、AR在良、惡性前列腺組織中表達[例(%)]

表2 FOXP1、AR蛋白在前列腺癌中與臨床病理參數(shù)的關系[例(%)]

表3 FOXP1、AR蛋白在前列腺癌中的相關性(例)

3 討論

3.1FOXP1蛋白在前列腺癌中的表達及意義：FOXP1屬于FOXP亞家族轉錄因子成員之一，其基因定位于染色體 3p14.1，長度628kb，表達的蛋白產物具有廣泛的生物學功能，參與心臟、肺及中樞神經的發(fā)育及對免疫系統(tǒng)具有重要調控作用[4]。近年來也發(fā)現(xiàn)FOXP1表達于不同腫瘤組織中，如淋巴瘤、乳腺癌、肝細胞癌等。在不同腫瘤中，F(xiàn)OXP1的生物學作用也不同。有文獻報道FOXP1在淋巴瘤中過表達與惡性轉歸及預后不良有關，提示其可能有癌基因作用[5]；在乳腺癌中，研究者發(fā)現(xiàn)其可能作為一種腫瘤抑制因子調控乳腺癌發(fā)病機制，F(xiàn)OXP1高表達提示較好[6]，因此，F(xiàn)OXP1的雙面作用提示在不同腫瘤的發(fā)生、發(fā)展過程中其作用機制可能不同。本實驗應用免疫組化發(fā)現(xiàn)FOXP1在前列腺癌組織中的表達明顯低于正常前列腺及增生的前列腺組織，而且在高分化、中分化與低分化的前列腺癌中的表達有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，說明FOXP1可能是一個潛在腫瘤抑制因子，差異也具有顯著參與前列腺癌的進展過程，提示其可作為一個新的標志物用于前列腺癌的診斷及預后評估。

3.2AR蛋白在前列腺癌的表達及意義：雄激素受體(AR)屬于甾體超家族成員，是一種具有配體活性的轉錄因子，通過與雄激素結合，參與男性性征、男性器官發(fā)育、維持男性正常生理功能；同時研究發(fā)現(xiàn)，AR信號通路在前列腺癌病程進展中具有重要作用[7]。本試驗結果顯示，AR在前列腺癌中的陽性表達明顯高于良性對照組，但與前列腺癌的病理分級呈正相關，與其他研究結果一致。

3.3FOXP1與AR兩種蛋白在前列腺癌中的作用機制：Taylor等研究發(fā)現(xiàn)FOXP1在前列腺癌中基因的缺失可能是潛在的腫瘤抑制因子，對調節(jié)前列腺癌的發(fā)生起重要作用[8]，而且Takayama K等學者發(fā)現(xiàn)FOXP1是一種雄激素反應因子，能夠負性調節(jié)雄激素首頁信號通路，影響前列腺癌的病程進展[9]。AR對前列腺癌的發(fā)生發(fā)展的促進作用可能由于AR通過激活靶基因的轉錄活性，使PSA等相應蛋白合成增加，發(fā)揮轉錄活化因子核細胞分化的作用，從而調節(jié)細胞增殖、凋亡和新生血管的作用，進而促進腫瘤生長[10-11]。本研究還發(fā)現(xiàn)FOXP1與AR的表達在前列腺癌中呈負相關，但是具體機制仍不清楚，需要進一步研究。

綜上所述，檢測FOXP1、AR可能為前列腺癌的早期發(fā)現(xiàn)、分期預后評估提供了新的思路。但是FOXP1與AR之間的相互關系及如何促進前列腺癌的發(fā)生、發(fā)展還不完全了解，有待進一步研究。