熱熔擠出技術制備齊墩果酸固體分散體的研究

陳璟 呂志陽 陳靜 周揚 聶銳 單鑫

摘 要：應用熱熔擠出（HME）技術制備高熔點難溶性藥物齊墩果酸（OA）的固體分散體，以提高其體外溶出度。稱取適量聚乙烯吡咯烷酮（PVPK30）與齊墩果酸原料藥以一定的比例混合均勻，采用熱熔擠出技術制備相應的熱熔制劑。通過差示掃描量熱法（DSC）及體外溶出度來表征和評價所制備的熱熔制劑。分析結果顯示齊墩果酸原料藥在制備的熱熔制劑中均以無定形狀態存在，體外溶出結果表明經過熱熔技術制備的兩種熱熔制劑均能提高齊墩果酸原料藥的溶出度，齊墩果酸原料藥∶聚乙烯吡咯烷酮在1∶5時在60 min內的累計溶出度達到71%，明顯高于原料藥以及物理混合物。通過熱熔擠出技術制備的熱熔制劑可在一定程度上提高難溶性藥物的溶出度，為齊墩果酸的工業化生產提供了一定的試驗基礎。

關鍵詞：齊墩果酸；熱熔擠出技術；固體分散體；溶出度

基金項目：江蘇高?！扒嗨{工程”資助項目（2018年）；2019江蘇省中醫藥管理局項目（YB201997）

齊墩果酸（Oleanolic Acid，OA）是一種五環三萜類化合物，廣泛分布于青葉膽、女貞子等藥用植物中，具有多種藥理效應，其中最為突出的藥理效應為消炎、增強免疫、抑制血小板聚集、降血脂等作用，同時也是治療急性黃疸型肝炎和慢性肝炎比較理想的藥物，且毒性低、副作用少[1]。最新研究表明，OA可能是一個有前途的藥物輔助化療的骨肉瘤[2]。但OA的脂溶性極強、溶出度低，使得機體對其吸收很有限，從而導致其口服生物利用度低。本試驗利用熱熔擠出技術改善OA制劑的體外溶出情況，以提高其生物利用度，增強其治療效果[3]。

1 材料與儀器

1.1 儀器

美國Waters e2695型高效液相色譜儀；Hanbon C18色譜柱（4.6 mm2×150 mm，5 μm，江蘇漢邦科技有限公司）；FA1204B電子分析天平（上海精密科學儀器有限公司）；KQ-500DE型數控超聲波清洗器；BZF50型真空干燥箱（上海博訊）；美國Waters 2424型蒸發光散射檢測器；Thermo Process 11熱熔擠出機（美國賽默飛公司）；ZRS-8GD智能溶出試驗儀（天津市天大天發科技有限公司）；Anke TGL-16C高速離心機（上海安亭科學儀器廠）；200F3型差示掃描量熱儀（德國耐士科技有限公司）；傅里葉變換紅外分光光度計（Thermo NICOLET is 10）；德國布魯克D2 PHASER X-射線衍射儀。

1.2 材料

OA原料藥（成都德思特生物技術有限公司）；OA對照品（成都德思特生物技術有限公司，批號：DST 171026-051）；輕質碳酸鈣；聚乙烯吡咯烷酮（PVPK-30）；甲醇（色譜純，江蘇漢邦科技有限公司）；超純水（自制）；其余試劑均為分析純。

2 方法與結果

2.1 OA固體分散體的制備

啟動電源，升高雙螺桿擠出機的溫度，設置各個區段的溫度為210 ℃，溫度達到所設定的溫度值時，同時打開水循環，維持系統溫度恒定，繼續平衡20 min，設定雙螺桿的轉速為60 r/min，并將干燥保存的OA物理混合物稱取約10 g緩慢勻速地加入料斗中，設定扭矩為60%左右，物料經模孔擠出后呈條狀，并用鑷子將其收集于料盤中，室溫下冷卻后，將其粉碎并過80目篩，放置于干燥器內，室溫保存備用。

2.2 體外溶出試驗

選用0.5%十二烷基硫酸鈉SDS溶液（900 mL）為溶出介質，設定溫度為（37.0±0.5）℃，轉速為100 r/min。取樣時間分別為5、15、30、45、60 min，定時定位取2 mL，同時補加等量等溫溶出介質溶液。經0.45 μm微孔濾膜過濾，取濾液，設定進樣量為20 μL，進行HPLC測定溶出曲線如圖1所示。

由體外溶出圖可以看出，OA原料藥在5 min內的累積溶出度只有7%、60 min內的累積溶出度為32%。在聚乙烯吡咯烷酮體系中，OA與輔料的物理混合物比OA原料藥的累積溶出度僅高5%，但在熱熔制劑中，5 min時的累積溶出度比原料藥高7%，60 min時的累積溶出度達到了71%，遠遠超過了原料藥與物理混合物的累積溶出度。在VA64體系中，OA與輔料的物理混合物與OA原料藥相差不大，但熱熔制劑組5 min時的累積溶出度為15%，60 min時的累積溶出度達到了74%。由試驗結果可知通過熱熔擠出技術制備的OA熱熔制劑均能提高OA原料藥的溶出度。

2.3 齊墩果酸固體分散體的體外表征

不同輔料制備固體分散體體系DSC圖譜如圖2所示，a：OA原料藥；b：PVPK30；c：OA和輔料的物理混合物；d：OA和輔料按1∶5制得的熱熔制劑。

試驗結果顯示，OA原料藥在314 ℃處有一個明顯的吸熱峰，但OA熱熔制劑在此處無吸熱峰，說明藥物以無定形的狀態分散于載體材料中，表明聚乙烯吡咯烷酮與藥物的相容性更好一些。

3 結語

試驗發現：DSC試驗中，OA原料藥在314 ℃處有一個明顯的吸熱峰，物理混合物在此處的吸熱峰仍存在，但熱熔擠出技術制備的固體分散體在此處的吸熱峰消失。通過溶出試驗可以看出，PVPK30體系得到的固體分散體的溶出度均達到70%，明顯高于物理混合物及OA原料藥的溶出度，但有關體內吸收過程仍需進一步研究。綜上，熱熔擠出技術可明顯提高難溶性高熔點藥物OA的溶出度，可為其工業化生產作準備。

[參考文獻]

[1] 阮氏越秋，趙浩如.齊墩果酸固體分散體的制備及體外溶出度測定[J].中國藥科大學學報，2003（3）：236-239.

[2] XU Y，SHU B，TIAN Y，et al.Oleanolic acid induces osteosarcoma cell apoptosis by inhibition of notch signaling[J].Ecological Modeling，2018（7）：896-902.

[3] 張慶剛，趙星星.熱熔擠出技術制備吡羅昔康固體分散體[J].藥學研究，2013（9）：526-527，556.

Preparation of oleanolic acid solid dispersion by hot melt extrusion

Chen Jing， Lyu Zhiyang， Chen Jing， Zhou Yang， Nie Rui， Shan Xin

（Nanjing University of Chinese Medicine Hanlin College，Taizhou 225300，China）

Abstarct：The solid dispersion of oleanolic acid（OA）was prepared by holtmelt extrusion（HME）in order to improve its dissolution in vitro. Polyvinylpyrrolidone（PVPK30）and oleanolic acid were uniformly mixed in a certain proportion， and the corresponding hot melt preparation was prepared by hot melt extrusion technology. The hot melt preparation was characterized and evaluated by differential scanning calorimetry and in vitro dissolution. The results showed that oleanolic acid existed in amorphous form in the hotmelt preparation， the results of dissolution in vitro showed that the dissolution rate of oleanolic acid was improved by the preparation of two kinds of hot melt preparations， and the cumulative dissolution rate was 71% within 60 min when the proportion of oleanolic acid and Polyvinylpyrrolidone is 1∶5， significantly higher than the bulk drug and physical mixture. The dissolution of the drug can be improved to some extent by the hot melt extrusion technology， which provides the experimental basis for the industrial production of oleanolic acid.

Key words：oleanolic acid； hot melt extrusion technology； solid dispersion； dissolution