雞骨草葉色素超聲提取工藝優選研究

韋雪娜++蘭驥++黃鎖義

摘要：以超聲波輔助法對雞骨草葉色素提取進行研究，通過單因素試驗以及正交試驗得到雞骨草葉色素的最佳提取工藝。即在超聲時間為30 min，固液比為1∶70（g/mL），超聲功率為100 W時色素提效果最好。該法原材料及試劑低廉易得，提取方法簡便省時，提取效果重復性好，為雞骨草葉資源的利用提供了理論依據。

關鍵詞：雞骨草葉；色素；超聲波法；提取工藝

中圖分類號：R284.2 文獻標識碼：A 文章編號：0439-8114（2017）08-1534-03

DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2017.08.032

Optimizing Ultrasonic Extraction of Abrus Cantoniensis Leaves Pigment

WEI Xue-naa，LAN Jib，HUANG Suo-yia，c

（a.College of Pharmacy；b.College of Clinical Medicine；c.Key Laboratory of Guangxi Universities on National Medicine in Youjiang River Basin，Youjiang Medical University for Nationalities， Baise 533000，Guangxi，China）

Abstract：Abrus Cantoniensis leaves was used as the raw material. The Abrus Cantoniensis leaves pigment in the method of ultrasound was researched， in order to provide the theory basis for making full use of the Abrus Cantoniensis leaves resources. The process to the best extracting Abrus Cantoniensis leaves pigment through single factor experiment and orthogonal，experiment L9（34）. The results which investigated in single factor test and onhogonal test L9（34） showed that the optimum conditions were the extraction reagent reagent/solvent ratio 1∶70（g/mL）， ultrasound power at 100 W for 30 minutes. Raw materials and reagent is less-cost and easy to get， a simple method for extraction time， extraction repeatability.

Key words：Abrus Cantoniensis leaves； pigment； ultrasonic wave； extraction technology

食品的色彩是食品感光品質的一個重要因素，隨食品工業的不斷發展與進步，食用色素已成為食品工業不可缺少的食品添加劑，年需求增長率已達到5%左右。色素分為天然色素和人工合成色素，廣泛用于食品、醫藥、化妝品等輕工業領域，大量生物學、營養學和醫學研究報告指出天然色素具有營養功能和生理保健功能，而合成色素大多為焦油染料，本身無任何營養價值，此外，對人體還有害甚至有致癌的危險[1]。世界各國不僅在食用色素對人體健康影響方面做了大量調查和研究，而且在食用色素的管理和使用方面均有嚴格的規定[2]。由于合成色素在食品中添加對人類健康有影響和危害，回歸自然、尋求與開發安全食用天然色素，尤其是一些藥食同源并具有保健功能的天然色素備受人們的關注，成為當前食用色素研究中的熱點課題。

雞骨草，又名廣州相思子、細葉雞草、小葉雞骨草，為百科相思子屬植物，具有清熱解毒、舒肝散瘀、益胃健脾的功效[3，4]，對急慢性肝炎、肝硬化腹水均有一定的療效[4]；廣泛用于治療濕熱黃疸、脅肋不適、胃脘脹痛、乳癰腫痛、胃痛、毒蛇咬傷、泌尿系統感染等癥狀[5，6]。具有降低血脂肝脂、促脂質代謝、抗氧化應激、抗炎、免疫調節及改善肝組織結構等方面的作用[7]。雞骨草還具有較強清除超氧自由基和羥自由基的能力[8]。近幾年大量藥理和臨床試驗研究發現雞骨草主要含有生物堿類、糖類化合物、皂苷類、黃酮類、多酚類、甾醇類、氨基酸等化學成分[4，9]。目前雞骨草已是多種中藥材的主要原料，主要分布于廣東、廣西兩省區，廣西是主要的人工栽培區[9]。目前已開發雞骨草中成藥制劑有雞骨草丸、雞骨草膠囊、舒肝合劑、結石通片、疏肝膠囊等[10]。雖然雞骨草相關品種已在臨床大量使用，但目前對其有效成分和藥理作用機制等方面的研究還不夠充分，在相關產品的開發及對質量的控制等方面也還有待深入[11]。由此可見，雞骨草具有非常重要的研究價值和藥用價值。本研究以雞骨草葉作為研究對象，用超聲波對其水溶物進行色素提取，探討其最佳的提取方法，具有一定的理論和科研價值，為將來雞骨草葉色素利用提供重要理論指導依據。

1 材料與方法

1.1 材料

雞骨草葉購于百色，曬干后粉碎備用。

1.2 試劑

乙醇、丙酮、鹽酸、乙酸，均為AR。

1.3 儀器

電子天平（上海民橋精密科學儀器有限公司）；722N可見分光光度計（上海菁華科技儀器有限公司）；臺式連續投料粉碎機（溫嶺市林大機械有限公司）；SHZ-D（Ⅲ）型循環水真空抽氣磊（鞏義市予華儀器有限責任公司）；KQ5200DB型數控超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司）；DHG-9070A型電熱恒溫鼓風干燥箱（上海精宏實驗設備有限公司）；電熱式恒溫水浴箱（江蘇金壇宏凱儀器廠）。

1.4 試驗設計與方法

以95%乙醇為提取液，以超聲波輔助法，分別選擇超聲時間（A）、固液比（B）、超聲功率（C）這3個因素進行單因素試驗和正交試驗（表1），以研究出提取雞骨草葉色素的最佳提取工藝條件。

2 結果與分析

2.1 提取溶劑的選擇

精確稱量5份0.5 g的雞骨草葉粉末分別置于5個干凈的250 mL的圓底燒瓶中，再分別向其中加入100 mL配制好的95%乙醇、丙酮、0.4 mol/L鹽酸、20%乙酸以及蒸餾水。50 ℃條件下在恒溫水浴箱中加熱30 min后，趁熱抽濾，用溶劑定容于500 mL容量瓶中，觀察其顏色并在390 nm處測定溶液吸光度（表2）。用95%乙醇浸提的溶液測其吸光度為最大且獲得的溶液顏色穩定，所以選擇95%乙醇作為其提取劑。

2.2 最佳波長的選擇

準確稱取0.5 g的雞骨草葉粉末放置于250 mL圓底燒瓶中，向圓底燒瓶中加入100 mL 95%乙醇在超聲功率為80 W、溫度為50 ℃的條件下超聲，時間為15 min，時間到后立即趁熱抽濾。測定波長300～410 nm區域的吸光度（圖1）。由圖1可知，在300～410 nm時存在一個波峰，最大吸收波長為330 nm。

2.3 超聲波輔助提取雞骨草葉色素

1）超聲時間對雞骨草葉色素提取效果的影響。精確稱量4份0.5 g的雞骨草葉粉末分別置于4個干凈的250 mL圓底燒瓶中，同時分別向其中加入100 mL配制好的95%乙醇。在超聲功率為80 W、溫度為50 ℃的條件下分別超聲15、30、45、60 min，時間到后立即趁熱抽濾，用溶劑定容于500 mL容量瓶中，測其在330 nm處的吸光度（圖2）。由圖2可知，超聲時間為30 min時提取效果最好，故最佳提取時間為30 min。

2）超聲功率對雞骨草葉色素提取效果的影響。精確稱量4份0.5 g的雞骨草葉粉末分別置于4個干凈的250 mL圓底燒瓶中，同時分別向其中加入100 mL配制好的95%乙醇。在超聲功率為80、100、120、140 W，溫度為50 ℃的條件下超聲30 min，時間到后立即趁熱抽濾，用溶劑定容于500 mL容量瓶中，測其在330 nm處的吸光度（圖3）。由圖3可知，超聲功率在100 W的時候吸光度最高，所以確定100 W為最佳超聲功率。

3）固液比對雞骨草葉色素提取效果的影響。精確稱量4份0.5 g的雞骨草葉粉末分別置于4個干凈的250 mL圓底燒瓶中，同時分別向其中加入15、25、35、45 mL配制好的95%乙醇。在超聲功率為80 W，溫度為50 ℃的條件下超聲30 min，時間到后立即趁熱抽濾，用溶劑定容于500 mL容量瓶中，測其在330 nm處的吸光度（圖4）。由圖4可知，提取液在固液比（g/mL，下同）為1∶70時提取效果最好，所以確定最佳固液比為1∶70。

由表2，表3可知，從極差分析R值可以看出3個因素對雞骨草葉天然色素提取效果的影響程度依次為A>C>B，即超聲時間>超聲功率>固液比。同時綜合各因素的k值和直接比較，從正交試驗可以得出最佳提取條件為超聲時間30 min，超聲功率100 W，固液比1∶70。

3 小結與討論

超聲波提取雞骨草葉色素的各因素對色素提取效果的影響程度依次為超聲時間>超聲功率>固液比。通過單因素試驗和正交試驗，證明雞骨草葉提取色素在超聲功率為100 W，提取時間為30 min，固液比為1∶70的條件下提取率最高，為雞骨草葉色素的提取提供一條新的途徑，對工業化生產具有一定的參考，為雞骨草的開發利用提供了科學依據。

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