轉(zhuǎn)移因子對雞血清生化指標的影響研究

林祚貴 徐 磊,2＊ 鐘佳蓮

（1.福建農(nóng)業(yè)職業(yè)技術學院 福州 350119；2.南京天邦生物科技有限公司 南京 211102）

隨著人們生活水平的提高，對雞肉、雞蛋需求量也相應加大，大大刺激了養(yǎng)禽業(yè)的蓬勃發(fā)展，但是隨之而來的各種傳染性疾病也給養(yǎng)禽業(yè)造成了嚴重的威脅。一些傳染性病毒病一直困擾著養(yǎng)禽業(yè)，病毒新毒株、變異株不斷出現(xiàn)，造成巨大的經(jīng)濟損失，并危害人類的生命安全。現(xiàn)在我國動物疾病的防治面臨嚴峻的挑戰(zhàn)，目前的預防和治療措施難以有效地控制疫病的發(fā)展，尤其抗生素耐藥性問題日益嚴重、抗生素殘留，迫切需要一種安全有效的、無抗藥性的、無殘留的防治措施。

轉(zhuǎn)移因子（Transfer Factor，TF）是白細胞中有免疫活性的T淋巴細胞所釋放的一類小分子可透析物質(zhì)。其成分復雜，主要含有多肽和核糖，以及多種游離氨基酸和 Na、Mg、K、Ca、Zn 等金屬元素。 TF 帶有致敏淋巴細胞的特異性免疫信息，在受者體內(nèi)能夠誘導T細胞轉(zhuǎn)變?yōu)樘禺愋灾旅袅馨图毎虼耍軌蛱禺惖貙⒐┱叩募毎庖吡Ρ粍拥剞D(zhuǎn)移到受者體內(nèi)，使受者獲得特異性細胞免疫功能，即轉(zhuǎn)移和擴大細胞免疫力。自20世紀60年代發(fā)現(xiàn)TF至今，國內(nèi)外許多學者對其進行了大量的研究，發(fā)現(xiàn)其具分子量小、無毒、無抗原性、不引起過敏反應、不產(chǎn)生對抗抗體且可超越種系界限應用等優(yōu)點，因而將它廣泛應用于人類的疾病防治上。1979年以后，國內(nèi)逐漸將它應用于動物的疾病防治上，且取得了可喜的成果。TF自1955年被發(fā)現(xiàn)以來，作為具有特異和非特異性免疫活性的細胞調(diào)節(jié)因子、免疫增強劑已顯示出其廣闊的應用前景，但關于TF的作用機理，目前尚未完全搞清，因而吸引著大批科學工作者從事轉(zhuǎn)移因子試驗及臨床研究[1-2]。本文旨在通過對肉雞肌注TF進行血清生化指標測試，分析TF對雞血清生化指標的影響，為TF在肉雞上的臨床應用提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗材料 本研究組已授權TF國家發(fā)明專利制備的轉(zhuǎn)移因子[3-5]；L500臺式低速離心機，購自湖南湘儀實驗室儀器開發(fā)有限公司；GS200全自動生化分析儀和生化檢測試劑，購自深圳市錦瑞電子有限公司。

1.2 試驗動物 試驗雞為福清金鳳凰禽類飼養(yǎng)技術質(zhì)詢服務中心提供的25羽180日齡福建德化黑雞。

1.3 試驗設計 選取25羽健康成年德化黑雞，隨機分為對照組、試驗組1和試驗組2；試驗組每組10羽，試驗組1肌肉注射TF 0.5 mL/羽，試驗組2肌肉注射TF 1.0 mL/羽，對照組5羽，注射生理鹽水。所有雞均實行自由采食及飲水，試驗組的雞每天注射TF一次，連續(xù)注射3 d，每天觀察雞群有無異常變化，確認雞群正常后在第四天上午，每羽雞空腹用一次性注射器通過翼下靜脈采血，每羽采集5 mL放入離心管。將采集的雞血液室溫放置30 min，待血液凝固，再放入離心機，2 000 r/min離心15 min，分離出血清，再通過全自動生化分析儀進行檢測。

1.4 測定指標與方法 使用GS200全自動生化分析儀測定的11個項目與方法為：總蛋白（TP）為雙縮脲比吸光度法（g/L）；白蛋白（ALB）為溴甲酚綠法（g/L）；肌酐（CREA）為肌氨酸氧化酶法（μmol/L）；Y-谷氨酰基轉(zhuǎn)移酶（GGT）為IFCC推薦法（U/L）；總膽紅素（T-BIL）為化學氧化法（μmol/L）；尿素（UREA）為酶偶聯(lián)速率法（mmol/L）；尿酸（UA）為尿酸酶-過氧化物酶偶聯(lián)法 （μmol/L）；丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）為 IFCC 推薦法（U/L）；天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）為 IFCC 推薦法（U/L）；甘油三酯（TG）為GPO-PAP 法（mmol/L）；總膽固醇（CHOL）為 CODPAP 法（mmol/L）。

1.5 數(shù)據(jù)處理 測得的試驗數(shù)據(jù)用EXCEL 2003初步整理后，采用SPSS 19.0數(shù)據(jù)處理軟件進行統(tǒng)計分析，結(jié)果以“平均值±標準差”表示，并進行單因子方差分析。

2 結(jié) 果

由表1可見，注射TF后試驗組1和試驗組2的TP濃度呈上升趨勢，試驗組1和試驗組2極顯著高于對照組（P<0.01），試驗組2極顯著高于試驗組1（P<0.01）；試驗組的ALB濃度顯著低于對照組（P<0.05），試驗組 1 顯著低于試驗組 2（P<0.05）；試驗組1的UA濃度極顯著低于對照組（P<0.01），試驗組2極顯著高于對照組（P<0.01）；TF對其他各項生化指標的影響均未達到顯著水平（P<0.05）。

3 討論與小結(jié)

血清生化指標反映了機體營養(yǎng)代謝情況和各種組織器官功能，也間接反映了動物的生產(chǎn)性能。肝臟是合成蛋白質(zhì)的主要場所，血清中ALB與球蛋白之和為血清TP，因此，血清ALB濃度可以反映肝臟的功能，除作為營養(yǎng)物質(zhì)的載體外，還維持血漿滲透壓，同時又是機體蛋白質(zhì)的一個來源，可轉(zhuǎn)化為組織蛋白，用于修補組織和提供能量。血清TP是反映體內(nèi)蛋白質(zhì)合成的一個重要指標[6]，其含量高低反映了機體蛋白質(zhì)代謝的強弱。血清球蛋白的高低卻與機體的免疫性能有一定的關系，其是血清蛋白的一部分，能與外來特異性抗原起免疫反應而保護機體，其含量的高低影響機體的抗病力[7]。從表1可以看出，注射TF后血清TP濃度呈上升趨勢，表明TF影響雞的肝臟合成功能，使其與組織蛋白質(zhì)保持動態(tài)平衡的正向作用加強，提高了機體對蛋白質(zhì)的吸收和利用，試驗組血清TP濃度高于對照組，隨著注射量的增加，濃度也增加，差異極顯著（P<0.01）。與對照組相比，TF對ALB有顯著降低作用（P<0.05），試驗組2高于試驗組1。本試驗雖然未測球蛋白，但通過TP和白蛋白的變化可知，球蛋白有所升高，球蛋白的升高是免疫力提高的表現(xiàn)[8]，表明TF有利于雞的免疫力提高。

表1 轉(zhuǎn)移因子對雞血清生化指標的影響

UA主要由蛋白質(zhì)和核酸降解生成，其是禽類氨基酸代謝的終產(chǎn)物和排泄形式，血清UA濃度可在一定程度上反映機體蛋白質(zhì)代謝情況[9]。UA作為禽類氨基酸代謝的最終產(chǎn)物，主要由腎臟排出，因此，血清中UA含量常常作為檢測禽類腎功能的重要依據(jù)[10]。從表1可以看出，試驗組1的UA濃度比對照組下降，差異極顯著（P<0.01），表明 0.5 mL/羽連續(xù)肌肉注射3 d的劑量，TF促進雞機體對氨基酸的吸收合成，降低了蛋白質(zhì)的分解代謝，形成氮的正平衡，最終使雞的肌肉蛋白質(zhì)沉積增加[11]。試驗組2的UA濃度比對照組上升，差異極顯著（P<0.01），表明1.0 mL/羽連續(xù)肌肉注射3 d的劑量，TF提高了機體對蛋白質(zhì)的分解代謝。

尿素氮是禽類蛋白質(zhì)分解代謝的主要終末產(chǎn)物。氨基酸脫氨基產(chǎn)生NH3和CO2，兩者在肝臟中合成尿素[12]。血清尿素氮是反映機體的營養(yǎng)狀況以及蛋白質(zhì)代謝水平的指標，血清尿素氮濃度可以較準確地反映動物體內(nèi)蛋白質(zhì)代謝和氨基酸之間的平衡狀況[13-14]。從表1可以看出，試驗組尿素濃度比對照組有所增加，差異不顯著（P>0.05）。

從表1可以看出，與對照組相比，TF對CREA、GGT、ALT、TG的影響有逐漸遞減趨勢，但差異不顯著 （P>0.05）；與對照組相比，TF 對 T-BIL、UREA、AST、CHOL的影響有逐漸增加趨勢，但差異也不顯著（P>0.05）；與對照組相比，試驗組1的TG有所升高，試驗組2有所下降，但差異均不顯著（P>0.05）。

從對雞注射飼養(yǎng)和血清生化指標的分析結(jié)果來看，TF連續(xù)肌肉注射3 d的劑量可極顯著提高TP濃度，顯著降低ALB濃度，0.5 mL/羽連續(xù)肌肉注射3 d的劑量極顯著降低UA濃度，1.0 mL/羽連續(xù)肌肉注射3 d的劑量極顯著提高UA濃度。經(jīng)過多年研究，表明TF具有安全可靠、無毒副作用、可增強受體免疫功能、改善體液免疫功能，從而增強機體的抗病能力。所以，建議推廣普及TF的使用，適當降低價格，讓養(yǎng)殖戶都能接受TF，把TF的研究在實際養(yǎng)殖中得到廣泛應用，為養(yǎng)殖業(yè)動物疫病的防控以及人類的食品安全開辟新的道路。