全自動血細胞分析儀中白細胞假性計數的研究進展

張希，康晨

天津市黃河醫院檢驗科 (天津 300110)

全自動血細胞分析儀主要通過流式與電阻抗技術對細胞進行計數，再使用過氧化物酶、高頻電磁、低頻電磁、激光散射、直流電等方法將白細胞分為多種類型，一般通過散點圖表示[1]。但在實際檢測過程中會受諸多因素的影響而導致白細胞分類與計數不準確，進而導致假性白細胞分類不準確與假性增高，此時散點圖可提示為檢測結果異常，因此，操作人員需充分了解血細胞分析儀的白細胞分類散點圖，以便準確分析原因[2]。本研究主要就全自動血細胞分析儀中白細胞假性計數的研究進展作一綜述。

1 白細胞計數假性降低

1.1 分葉核中性粒細胞聚集

在實際檢測過程中，標本中所含有的EDTA抗凝劑可導致分葉核中性粒細胞聚集，進而導致白細胞計數假性降低，此種情況雖然較少發生，但仍不可忽視[3]。分葉核中性粒細胞聚集無明顯性別差異，醫學界目前尚未明確此種聚集的發生機制。此外，該種情況還可發生于枸櫞酸鈉和肝素抗凝的血液標本中。相關報道顯示，白細胞聚集與特定疾病或者病理之間無明確關聯性[4]。白細胞分類散點圖能夠提示異常情況，但在實際檢測過程中往往會出現儀器忽略最大聚集物的情況，并對小聚集物發出報警。在電阻抗類血細胞分析儀中，當白細胞分類圖分葉核中性粒細胞聚集區域出現未成熟粒白細胞時，儀器會發出報警信號。這種發生于EDTA抗凝血腫的分葉核中性粒細胞聚集物可直接影響白細胞計數的檢測結果，出現白細胞計數假性降低與錯誤分類情況，進而引發淋巴細胞增多癥與假性粒細胞缺乏癥，需引起重視。

1.2 淋巴細胞聚集

淋巴細胞聚集可導致白細胞計數出現假性降低情況。據相關報道顯示，對燒傷、尿路感染、嚴重單核細胞白血病、B細胞淋巴瘤等患者的血液標本進行檢測后，可發現淋巴細胞聚集情況[5]。此外，相關報道顯示，在慢性淋巴細胞白血病患者體內也存在淋巴細胞聚集情況，使用血細胞分析儀對存在上述情況的患者進行檢測時，會導致較大的聚集細胞被忽略，進一步導致白細胞計數假性降低；同時，小聚集物可干擾白細胞分類情況，導致儀器出現錯誤[6]。

2 白細胞計數假性增高

2.1 血小板聚集與巨型血小板

通常，白細胞計數假性增高主要由體積相近的血小板聚集物所致。目前常用的全自動五分類血細胞分析儀能夠準確檢測出此種異常情況，并直接反映于散點圖上。血小板聚集物能夠以點的形式組成火箭狀，主要位于白細胞分類散點圖左下方，可形成淋巴細胞報警信號[7]。若患者患有骨髓增生性疾病與骨髓發育異常疾病，則血液中會出現一些體積巨大的血小板，由于這些血小板會達到白細胞大小而被當成白細胞計數，當儀器檢測到此種巨型血小板時會發出報警信號，報告為血小板聚集或者巨血小板。

2.2 有核紅細胞

有核紅細胞可存在于正常血液或病理血液中，數量有時可多于白細胞，且可與溶血劑直接反應，使細胞膜溶解，進而釋放出細胞核，也是臨床上導致白細胞異常增高的重要原因[8]。當有紅細胞處于游離狀態時，其體積低于50 fl，可與巨大血小板或血小板聚集物表面相重疊，進而共同影響白細胞計數，使儀器發出相同報警信號。

2.3 抗溶性紅細胞

在部分情況下，紅細胞不會受到溶血劑的破壞，當患者患有肝臟疾病、尿毒癥及行化療后，可導致其體內抗溶性紅細胞被誤認為白細胞，進而導致白細胞計數假性增高[9]。白細胞分類散點圖中可發現大量小點處于淋巴細胞區域，使其無法與淋巴細胞區分，進而發出報警信號。但通常情況下，可根據散點圖密度分析出有核紅細胞的存在，該情況可見于含血紅蛋白C的紅細胞患者血液標本內。此外，隨著科學技術的進步，先進的血細胞分析儀能夠通過產生紅細胞的方式抵抗溶血劑信息，使血細胞與溶血劑接觸時間延長，進而達到消除紅細胞抵抗的目的。對于存在專用白細胞核計數通道的血細胞計數儀，可通過破膜試劑將細胞膜溶解，以達到精確計數細胞核的目的，確保準確區分有核紅細胞與白細胞。

2.4 冷球蛋白類

冷球蛋白對白細胞計數具有重要的影響，不僅能夠導致其假性增高，還可進一步影響血小板、紅細胞及血紅蛋白計數。據相關報道顯示，這種影響與冷球蛋白量無明顯關聯性，可能與其自身特性相關，因此，在實際檢測過程中，若出現異常檢測結果，則可考慮冷球蛋白，有助于冷球蛋白血癥的臨床診斷[10]。當處于室溫下，通過顯微鏡對患者染色的血涂片進行觀察，可發現明顯冷沉淀物，當處于低溫環境下，該情況更加明顯。冷球蛋白本質上屬于一種免疫球蛋白，當處于37 ℃以下的環境時，可形成冷沉淀物，因此，在檢測時需適當對試劑加溫，以減少該情況的發生，但仍無法完全避免，有時仍可發現白細胞計數假性增高的情況。這種冷沉淀物的體積接近血小板，在臨床檢測時可對血小板計數產生直接影響，導致血小板計數出現假性增高的情況，進而導致血小板體積直方圖發出報警信號。當冷球蛋白出現聚集或者體型巨大時，可接近白細胞，使白細胞計數出現假性增高情況。對白細胞散點圖進行觀察后，可發現冷球蛋白呈云霧狀小點分布，主要位于血小板閾值處或者淋巴細胞上，有時也可出現于多形核白細胞散點頂端，若觀察到上述情況，則說明可能存在冷凝蛋白質[11]。此外，當冷球蛋白呈膠凍狀時，可堵塞血細胞計數儀的吸樣針，進而影響最終分析結果，因此，需引起重視。

2.5 纖維蛋白原

相關研究結果顯示，纖維蛋白與冷纖維蛋白原可直接影響白細胞計數與血小板計數，使其出現明顯假性增高的情況，有時可使白細胞計數假性增高16倍[12]。通過電子顯微鏡對血涂片進行觀察后，可發現其與纖維絲相關，這種纖維絲與纖維蛋白、冷纖維蛋白原存在密切的關聯。在臨床檢測時，將采集到的新鮮血液使用EDTA抗凝可有效避免上述情況，說明當標本與EDTA尚未接觸前可引發纖維蛋白聚集，進而導致白細胞計數出現假性增高的情況[13]。

2.6 標本量過度

在臨床檢測中，真空管內血液標本過多可導致血小板假性計數，進而導致血液標本受到影響，使白細胞計數假性增高，因此，在檢測時需控制標本的質量，以確保白細胞計數的準確性。

總之，在使用全自動血細胞分析儀的過程中，易受到多種因素的影響而導致白細胞假性計數，其中原因較為復雜，難以及時發現與鑒別，因此，要求操作者高度重視全自動血細胞分析儀所顯示的報警信號，通過血涂片方式進行觀察，以減少或者避免白細胞假性計數的情況。