幾種中草藥提取物對感染產(chǎn)氣梭菌肉雞生長性、血液生化指標(biāo)及腸道組織學(xué)的影響

張志鵬，丁益?zhèn)?/p>

為了提高肉雞飼料轉(zhuǎn)化率，降低死亡率，抗生素促生長劑在過去幾十年曾被使用，但由于抗菌藥物產(chǎn)生的耐藥性及其在肉類的殘留日益受到關(guān)注。因此，在世界上許多國家，抗生素已被禁用。由產(chǎn)氣梭菌引起的壞死性腸炎是家禽生產(chǎn)中最常見的疾病之一，其治療成本很高（王顯峰和白金英，2019）。日糧類型和飼養(yǎng)管理（如放養(yǎng)密度、受污染的飼料和腸道黏膜的破壞因素）與該病的發(fā)病機(jī)制有關(guān)（孫笑非等，2012）。隨著抗生素的限制或禁用導(dǎo)致了壞死性腸炎的傳播，因此，家禽研究人員正在尋找抗生素替代品，以改善肉雞生長性能，優(yōu)化腸道健康。植物源性飼料添加劑的積極作用已被報(bào)道（王若瑾等，2015）。草本植物和香料通過調(diào)控內(nèi)源性酶的分泌、抗菌和抗氧化潛能刺激動物采食量。在肉雞生產(chǎn)中使用不同的草藥和香料結(jié)果不一致（Lee等，2015）。因此，本研究旨在比較不同中草藥生物制劑與抗生素對實(shí)驗(yàn)誘導(dǎo)的產(chǎn)氣莢膜梭菌感染肉雞的效果。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)與飼養(yǎng)管理 將560只Ross 308肉雞隨機(jī)分為7組，每組8個重復(fù)，每個重復(fù)10只雞。各組日糧處理如下：對照組飼喂基礎(chǔ)日糧，未感染產(chǎn)氣梭菌，T1組感染產(chǎn)氣梭菌，T2組感染產(chǎn)氣梭菌+0.2 g/kg阿維霉素，T3組感染產(chǎn)氣梭菌+0.40 g/kg百里香酚，T4組感染產(chǎn)氣梭菌+0.2 g/kg血根堿，T5組感染產(chǎn)氣梭菌+0.5 g/kg香芹酚、肉桂醛和辣椒素混合物，T6組感染產(chǎn)氣梭菌+0.2 g/kg百里香酚和茴香混合物。參考Schocken-iturrino等（2013）描述的方法確認(rèn)雛雞是否感染產(chǎn)氣莢膜桿菌。試驗(yàn)基礎(chǔ)日糧組成及營養(yǎng)水平見表1。試驗(yàn)在控制條件下進(jìn)行，試驗(yàn)期間溫度和濕度分別維持在（25±0.5）℃和51%，試驗(yàn)分為1～14 d和15～28 d。

1.2 產(chǎn)氣莢膜梭菌感染 在試驗(yàn)第15天除了對照組外，其他組肉雞均參考Ao等（2012）的方法強(qiáng)飼4×108CFU/g產(chǎn)氣莢膜梭菌。

1.3 生長和屠宰性能 在感染后計(jì)算每日采食量，減去所提供飼料中浪費(fèi)或未吃完的。在第3周和第4周結(jié)束時統(tǒng)計(jì)總采食量和稱量體重。同時計(jì)算各組料重比，計(jì)算公式如下：

料重比=采食量/增重；

生產(chǎn)效率因子=（存活率×活體重）/（日糧×料重比）×100。

第4周試驗(yàn)結(jié)束時每組隨機(jī)選擇8只雞進(jìn)行屠宰，胴體解剖分離胸肌、腿肌、脂肪和內(nèi)臟器官（包括小腸、脾、心、肝），稱重計(jì)算其與活體重百分比。

1.4 血液生化指標(biāo)和回腸絨毛形態(tài) 每個重復(fù)隨機(jī)選擇5只雞翅下靜脈采血3 mL，血液樣本3000 rpm離心10 min，分離血清，-20℃保存至分析。采用ELISA試劑盒測定血清總抗氧化能力和硫代巴比妥酸反應(yīng)物（TBARs）含量、谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）活力及葡萄糖、總蛋白、白蛋白、球蛋白和甘油三酯含量。試驗(yàn)第28天每個重復(fù)選擇2只雞，分離回腸，切片至1 cm，用顯微鏡分析絨毛高度和隱窩深度。

1.5 統(tǒng)計(jì)分析 試驗(yàn)結(jié)果表示為平均值和標(biāo)準(zhǔn)誤差，采用SAS軟件完全隨機(jī)設(shè)計(jì)的方差分析對試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，P＜0.05表示差異顯著。

2 試驗(yàn)結(jié)果與分析

2.1 生長性能 由表2和表3可知，T2組第3周和第4周料重比顯著升高（P＜0.05）。在第4周對照組與處理組對生長性能參數(shù)無顯著影響（P＞ 0.05）。

表2 試驗(yàn)處理對試驗(yàn)第3周結(jié)束時肉雞生長性能的影響

表3 試驗(yàn)處理對試驗(yàn)第4周結(jié)束時肉雞生長性能的影響

2.2 屠宰性能 由表4可知，感染組（T1）的屠宰率顯著降低（P＜0.05）。值得注意的是，抗生素組（T2）和添加中草藥添加劑組（T3、T4和T5）組屠宰率無顯著差異（P＞0.05）。與對照組相比，處理組顯著提高了小腸重量（P＜0.05）。

表4 試驗(yàn)處理對試驗(yàn)第4周結(jié)束時肉雞屠宰性能的影響 %

2.3 血液生化指標(biāo)和肝臟酶活力 由表5可知，T6組肉雞血液總蛋白含量顯著升高（P＜0.05），T1組血液球蛋白顯著降低（P＜0.05）。對照組和處理組對肉雞血液葡萄糖、甘油三酯及谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）活力無顯著影響（P＞0.05）。但T5組較對照組、T3和T4組顯著提高肝臟谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）活力（P ＜ 0.05）。

表5 試驗(yàn)處理對試驗(yàn)第4周結(jié)束時肉雞血液生化指標(biāo)和肝臟酶活力的影響

2.4 血液抗氧化和小腸形態(tài) 由表6可知，各處理組對血液總抗氧化力無顯著影響（P＞0.05）。但與對照組和T1組相比，T6組顯著提高回腸絨毛高度和隱窩深度（P＜0.05）。T5和T6組較對照組、T1、T2和T4組顯著提高血液硫代巴比妥酸反應(yīng)物含量（P＜0.05）。

表6 試驗(yàn)處理對試驗(yàn)第4周結(jié)束時肉雞血液抗氧化和小腸形態(tài)的影響

3 討論

非抗生素飼料添加劑現(xiàn)在被用來提高生長和飼料利用率，在本研究中發(fā)現(xiàn)，對照組和處理組體重和料重比無顯著差異，但T2組在第3周料重比明顯升高。此外，百里香酚、肉桂醛和辣椒素的效果與對照組相似，顯示出對感染產(chǎn)氣莢膜梭菌肉雞的有效性。Lee等（2015）在沒有任何細(xì)菌感染的情況下使用中草藥制劑可以提高生長性能。中草藥制劑的作用機(jī)制可能與增加飼料采食量，改善營養(yǎng)消化，增加消化酶分泌，提高腸道對營養(yǎng)素的吸收有關(guān)。目前，有關(guān)中草藥制劑對受細(xì)菌感染家禽影響的研究很少。有研究證明，中草藥、香料和各種植物提取物具有促進(jìn)消化和抗菌作用，刺激消化酶的分泌，改善腸道內(nèi)營養(yǎng)物質(zhì)的利用和吸收過程（Khan等，2012）。血根堿因其抗炎、抗菌和免疫調(diào)節(jié)作用而聞名，此外還影響腸道形態(tài)結(jié)構(gòu)、微生物發(fā)酵和小腸蠕動等功能（Jankowski等，2009）。與抗生素處理的肉雞相比，添加中草藥制劑的肉雞生長性能和胴體特征有所改善，這可能與其化合物的多重有益作用有關(guān)。在本研究中，中草藥添加劑組提高了肉雞日增重和飼料效率。

本研究中，T6組在第3周血清總蛋白和球蛋白濃度明顯升高，其他代謝物無明顯差異。Amad等（2013）也報(bào)道了肉雞在中草藥飼料添加劑作用下血清白蛋白和總蛋白濃度顯著升高，而血糖水平?jīng)]有顯著變化。Ghazalah和Ali（2008）在肉雞日糧中添加0.5%迷迭香葉后發(fā)現(xiàn)，其顯著提高了血液總蛋白、球蛋白和白蛋白的含量。中草藥添加劑提高感染產(chǎn)氣莢膜梭菌肉雞蛋白質(zhì)水平的部分原因可能是體重增加，而體重增加與機(jī)體蛋白質(zhì)質(zhì)量提高有關(guān)。

不同處理組對肉雞血清甘油三酯、葡萄糖、谷草轉(zhuǎn)氨酶活力無顯著影響，這與Amad等（2013）的研究結(jié)果一致。在本研究中，血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶在第4周末顯著升高，血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶和谷草轉(zhuǎn)氨酶是肝臟損傷和功能障礙的特異性指標(biāo)，在任何病理表現(xiàn)中，血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶和谷草轉(zhuǎn)氨酶從肝臟釋放到血液中（Toghyani等，2011）。Cho等（2014）在受產(chǎn)氣莢膜菌感染的肉雞中添加中草藥，結(jié)果發(fā)現(xiàn)膽固醇降低，高密度脂蛋白增加。文獻(xiàn)中不同中草藥添加劑對肉雞生化指標(biāo)的影響存在較大差異，這可能與肉雞品種、營養(yǎng)、年齡和試驗(yàn)設(shè)計(jì)等差異有關(guān)。在本研究中，與對照組和其他相比，T6組絨毛高度和隱窩深度顯著增加。Amad等（2013）報(bào)道了用中草藥提取物飼養(yǎng)的肉雞絨毛高度和隱窩深度比提高，這可能與上皮細(xì)胞更新增加有關(guān)。

4 結(jié)論

綜上所述，與抗生素相比，肉雞日糧添加中草藥制劑在維持產(chǎn)氣莢膜梭菌感染肉雞生長性能和血液生化特性方面具有應(yīng)用優(yōu)勢。