大分割放療聯合多西他賽對高海拔地區非小細胞肺癌患者血清MMP-9、TGF-β1和VEGF表達的影響

馬吉成,李淼,韓海林,汪學昌

肺癌是臨床上最為常見的惡性腫瘤，病死率和發病率均位居惡性腫瘤的首位[1]。近年，隨著我國經濟的快速發展，工業化加快，周邊環境不斷惡化，生活及工作壓力的不斷增加，導致吸煙人數逐漸增多，進而造成其發病率仍在逐年增加，同時發病具有一定的性別差異，女性發病率顯著低于男性，其對人們生命健康產生嚴重的影響[2]。非小細胞肺癌(NSCLC)占據肺癌總數的80%左右，主要包括大細胞癌、鱗癌及腺癌等[3]。由于NSCLC在發病早期僅表現為一定程度的頭痛、咳嗽、發熱等非典型癥狀，容易被忽視，因此臨床大多數NSCLC患者一旦確診，均為肺癌晚期，5年生存期相對較低，基本上失去了臨床治療的最佳時機[4]。近年臨床研究顯示，對于NSCLC的治療，放化療綜合性治療手段的臨床療效明顯優于單純的手術、化療及放療等[5]。目前，臨床上對于NSCLC的治療基本上均首選放化療綜合性治療[6]。而臨床多項數據顯示，大分割適形放療具有提高生物有效劑量、減少腫瘤細胞增殖及縮短治療時間的優點[7-8]。現觀察大分割放療聯合多西他賽對高海拔地區非小細胞肺癌患者血清MMP-9、TGF-β1和VEGF表達的影響，為其臨床診治提供參考，報道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選擇2015年8月—2017年8月青海省第五人民醫院放療一科收治的高海拔地區非小細胞肺癌患者130例作為研究對象，按照隨機數字表法分為對照組和試驗組，各65例。2組患者的性別、年齡、腫瘤部位、病變部位、病理分型、TNM分期等比較差異無統計學意義(P>0.05)，具有可比性，見表1。本研究經醫院醫學倫理委員會批準，患者及家屬知情同意并簽署知情同意書。

1.2 選擇標準 (1)診斷標準：參考《臨床診療指南·腫瘤分冊》中關于非小細胞肺癌的診斷標準[9]；非小細胞肺癌患者的TNM分期參考國際抗癌聯盟(UICC)制定的非小細胞肺癌TNM分期標準[10]。(2)納入標準：①所有患者均符合上述關于NSCLC的診斷標準，且經病理學及影像學證實者；②預計生存期至少6個月者；③無化療或放療禁忌證者。(3)排除標準：①入組前進行相關放化療者；②合并嚴重感染或其他相關呼吸系統疾病者；③合并精神系統疾病者；④合并嚴重的心、肝、腎功能障礙者；⑤伴有嚴重內科及血液系統疾病者；⑥妊娠、哺乳期患者；⑦有家族遺傳史患者;⑧依從性差，中途退出者。

表1 2組患者基線資料比較 [例(%)]

1.3 治療方法

1.3.1 化療方案： 2組患者均予多西他賽(江蘇天禾制藥有限公司)60 mg·m-2·d-1治療，每個治療周期為4周，前2周2組患者均給予放療化療同步進行，結束后再進行化療鞏固治療2個周期。

1.3.2 放療方案：患者仰臥位，以德國西門子64排螺旋CT機掃描患者中頸部的肋膈角，并通過三維適應性治療計劃系統對其計劃靶區(PTV)、臨床靶區(CTV)及腫瘤區(GTV)進行依次勾勒。其中PTV在CTV的基礎上再次外放5～10 mm；CTV在GTV基礎上外放5～7 mm。按照95%的PTV可接受量確定患者處方劑量：對照組患者給予腫瘤放療劑量為70Gy,分25次完成,每周7次；試驗組患者腫瘤放療劑量為62.5Gy，分25次完成，每周5次，周末休息，其中脊髓劑量一般要求<45 Gy，雙肺V20一般<25%。

1.4 觀察指標與方法

1.4.1 血清MMP-9、TGF-β1和VEGF水平測定：上述血清采用酶聯免疫吸附法測定MMP-9、TGF-β1和VEGF水平，試劑盒由貝克曼庫爾特公司提供，嚴格按照說明書要求操作。

1.4.2 血清T淋巴細胞亞群水平測定：治療前后采集患者清晨空腹肘靜脈血5 ml，離心得血清，冰箱-75℃條件下保存待測。采用流式細胞儀(CytoFLEX，貝克曼庫爾特公司)對血清CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+水平進行測定。

1.4.3 骨髓抑制測定：觀察記錄2組患者治療前后白細胞、血紅蛋白及血小板數量變化。

1.4.4 記錄不良反應：觀察2組患者放射性肺炎、放射性食管炎、肝功能不全及消化道反應等。

1.5 療效評價標準 參考WHO制定的關于肺癌的療效評價標準[11]：(1)完全緩解(CR)，可見病灶全部消失，且維持時間≥4周；(2)部分緩解(PR)，腫瘤最大直徑縮小≥50%，且維持時間≥4周；(3)穩定(SD)，非CR和PR；(4)疾病進展(PD)，靶病灶直徑和相對增加≥20%，出現新病灶。緩解率=(CR+PR)/總例數×100%。

2 結 果

2.1 2組臨床療效比較 試驗組患者的治療緩解率明顯高于對照組(P<0.05)，見表2。

2.2 2組血清MMP-9、TGF-β1和VEGF水平比較 治療后，2組血清MMP-9、TGF-β1和VEGF水平較治療前均降低，且試驗組降低較對照組更顯著(P<0.01)，見表3。

2.3 T細胞亞群水平比較 與治療前比較，治療后2組血清CD3+、CD4+、CD4+/CD8+均明顯升高，血清CD8+水平明顯降低，且試驗組改善較對照組更為顯著(P<0.05)，見表4。

表2 2組患者臨床療效比較 [例(%)]

表3 2組患者治療前后血清MMP-9、TGF-β1和VEGF水平比較

表4 2組患者治療前后T細胞亞群水平變化比較

2.4 2組骨髓抑制情況比較 與治療前比較，治療后2組患者的白細胞、血紅蛋白及血小板水平均明顯降低，而試驗組降低程度低于對照組(P<0.01)，見表5。

2.5 2組不良反應比較 試驗組患者不良反應總發生率明顯低于對照組(χ2=5.125，P=0.024)，見表6。

2.6 2組預后生存情況比較 與對照組比較，試驗組患者的生存時間延長，差異具有統計學意義(P<0.05)，見圖1。

3 討 論

NSCLC患者臨床治療難點主要在于其遠處轉移及局部復發，但是單純的化療及放療效果相對較差，化療放療聯合治療的效果要顯著高于單純治療手段[12]。臨床多項研究顯示，提高放療劑量可以對患者腫瘤產生較好控制，增強最終療效[13]。調強治療及三維適形放療等技術的不斷突破可以顯著提高目前臨床放療技術，有效地改善病灶周邊肺、食管及脊髓等正常組織對于放療劑量的限制，提高靶區劑量，減少對周邊正常組織的損傷，大分割放療技術可以有效增強放療劑量，縮短放療療程，減輕患者的經濟負擔及精神壓力[14]。VEGF是一種由腫瘤細胞生成的特異性因子，對腫瘤新生血管形成具有促進作用。VEGF可與相應的受體進行特異性結合，通過一系列的生物反饋和調控機制，誘導血管內皮細胞增殖、分裂，進而對內皮細胞的遷移產生趨化作用，同時增強血漿滲出和毛細血管的通透性，最后對新生血管的生成具有一定程度的介導作用。其對蛋白酶溶解的生成還具有一定誘導作用，降解間質纖維和血管基膜，為轉移灶的形成提供基礎[15-16]。MMP-9具有基底膜成分降解的功能，其主要以酶原形式分泌，對新生血管形成也具有一定促進效果[17]。同時促進腫瘤的轉移與侵襲，造成腫瘤細胞脫落向遠處淋巴結進行轉移，形成轉移灶。另外，高水平的MMP-9還可促使腫瘤細胞更容易發生浸潤侵襲，與患者預后關系較為密切[18]。TGF-β是一種存在于人體癌變及正常細胞組織內的一種因子，在細胞分化增殖過程中起著重要的作用[19]。在腫瘤早期，細胞由于缺少TGF-β1的表達，細胞的生長抑制作用得到釋放，腫瘤細胞快速增長；而在腫瘤晚期，TGF-β1對血管生成具有一定促進效果，加劇細胞外糖蛋白和細胞黏附蛋白基質的積聚，對細胞外基質合成及免疫細胞生成具有抑制作用，從而減緩腫瘤細胞生長[20]。

本結果提示，試驗組患者治療后的血清VEGF、MMP-9、TGF-β1及骨髓抑制情況改善更為顯著。提示大分割放療聯合多西他賽治療可以顯著增強高海拔地區非小細胞肺癌患者的免疫力，改善生活質量，減輕化療不良反應的發生。這可能是由于多西他賽是一種具有顯著放射增敏作用的半合成類紫杉醇衍生物，對微管蛋白的聚合具有一定程度的促進作用，從而對微管蛋白去多聚化產生抑制效果，將腫瘤細胞增殖過程阻滯在M期和G2期，抑制癌細胞的增殖分裂，同時可以增強細胞對射線的敏感度，殺死腫瘤細胞，增強療效[21]。另外大分割放療技術主要以患者病灶為中心靶點，通過儀器改變三維方向，調整中心靶點位置與計劃一致，從而增強照射精度[22]。另外，在治療過程中還及時對中心靶點位置進行調整，對于不規則的腫瘤病灶，可以經灶心射線劑量進行集中強化[23]。大分割化療每次的照射劑量都不低于2.5 Gy，在避免傷及病灶周邊組織的前提下殺死腫瘤細胞，同時每次照射劑量的增加，也相應減少了治療時間，完全符合放射生物學的原理[24]。化療是一種全身性療法，而放療是一種局部作用的方法，不能殺傷射線范圍以外的腫瘤細胞，而本研究中使用的多西他賽還具有增強細胞對射線敏感度的功效，2種治療方法相輔相成，協同增強治療效果，一定程度延長預后生存時間[25]。

表5 2組患者治療前后骨髓抑制情況比較

表6 2組患者不良反應發生情況比較 [例(%)]

綜上所述，大分割放療聯合多西他賽治療高海拔地區非小細胞肺癌患者，可以明顯降低血清MMP-9、TGF-β1和VEGF水平，增強機體免疫力，減少不良反應發生，改善預后生存情況，效果顯著，具有一定的臨床應用價值。

利益沖突：所有作者聲明無利益沖突

作者貢獻聲明

馬吉成、汪學昌：設計研究方案，實施研究過程，資料搜集整理，論文撰寫，論文修改；李淼：提出研究思路，分析試驗數據，論文審核;韓海林：進行統計學分析，課題設計，論文撰寫