ABCB1 基因G2677T/A 多態性與血脂水平及他汀類藥物降脂效應關系的Meta 分析

姚彩霞，邢后彬，徐霽

根據國家衛生計生委發布的2015 年死亡統計數據，心血管疾病死亡占主要疾病死因首位，高脂血癥是常見心血管疾病的獨立危險因素之一。他汀類藥物，即3-羥基-3-甲基戊二酰輔酶A（HMGCoA）還原酶抑制劑，是臨床廣泛使用的降脂藥物。大多數病人接受他汀治療后，可有效降低總膽固醇（total cholesterol，TC）、三酰甘油（triglyceride，TG）、低密度脂蛋白膽固醇（low-density lipoprotein cholesterol，LDL-C），并升高高密度脂蛋白膽固醇（highdensity lipoprotein cholesterol，HDL-C）。但其降脂療效存在明顯的個體差異，有許多病人并不能達到預期療效［1］。除了病人年齡、性別、肝腎功能和藥物的相互作用等因素影響藥物療效外，遺傳因素也起著重要作用。研究表明，參與他汀代謝和脂代謝的酶、受體、轉運蛋白及藥物靶受體等的基因多態性對他汀藥物的療效起著十分重要的作用［2］。

ABCB1基因又稱多藥耐藥基因（multidrug resistance-1，MDR1），其編碼的蛋白為腸道外排轉運蛋白，也稱為P-糖蛋白（P-glycoprotein，P-gp）［3］。P-gp在肝、腎、腸道等正常組織中均有分布，其會限制藥物從胃腸道吸收，促進從膽汁和尿液中排出，因此P-gp 決定藥物到達靶組織的濃度［3-4］。目前多項研究探索ABCB1基因G2677T/A多態性（rs2032582）與血脂水平以及他汀類藥物降脂效應的關系，但研究結果不一致［5-11］。因此，本研究擬利用已公開發表相關研究進行Meta 分析，評價G2677T/A 多態性對血脂水平及他汀類藥物降脂效應的影響，為實現心血管疾病病人的個體化用藥提供理論依據。

1 資料與方法

1.1 文獻檢索 以“ABCB1”或“MDR1”或“rs2032582”或“2677G＞T/A”或“G2677T/A”聯合“他汀”為檢索詞進行檢索，數據庫包括Pubmed、Cochrane Library、中國期刊全文數據庫（CNKI）、萬方數據庫和中文科技期刊全文數據庫（VIP）。檢索時間設定為自數據庫收錄至2019 年2 月17 日。文獻采用Endnote 7.0 和NoteExpress 2.0進行管理。

1.2 文獻納入和排除標準 納入標準：①文章報道ABCB1基因G2677T/A多態性與血脂水平（包括TC、LDL-C、HDL-C 或TG）或（和）他汀類藥物降脂效應的關系；②結果表達為均數和標準差，或者可以通過文中有相關信息可以計算出均數和標準差；③文章發表在同行評審的雜志上，語言為中文或英文。

排除標準：重復研究；會議摘要、綜述、評論性文章；細胞、動物實驗。

1.3 資料提取 兩名研究人員分別獨立地對納入的文獻進行篩選和資料提取，遇到爭議通過討論解決。資料提取內容主要包括：第一作者、發表時間、研究地點、研究人群、樣本量、年齡、性別比、他汀類型、用藥劑量、隨訪時間、基因分型方法、血脂數值以及血脂變化程度等。

1.4 文獻質量評價 采用非隨機試驗性研究的質量評價表（Methodological index for non-randomized studies，MINORS）［12］對納入的研究進行質量評價。這個量表包含12 個條目，針對每個條目，如果未報道則得0 分，有報道但不充分得1 分，報道詳盡得2分。量表可用于評價無對照組和有對照組的非隨機實驗性研究，前者利用1～8 條目進行評價，總分為16 分；后者利用1～12 條目進行評價，總分為24分。文獻質量評價由兩名研究者獨立進行，評價過程中出現的分歧，通過討論予以解決。

1.5 統計學方法 運用Pearsonχ2檢驗評價納入研究rs2032582 位點的Hardy-Weinber 平衡。當P＞0.05時，說明所調查的群體達到遺傳平衡，具有群體代表性。

采用均數差（mean difference，MD）和95%置信區 間（confidence interval，CI）來 評 價MDR1 基 因G2677T/A 多態性和血脂水平以及他汀類藥物療效的關系。采用Q檢驗和P值評價研究結果間的異質性，并用I2統計量來評價異質性的大小，當P＞0.1，I2＜50%，則提示各研究間無統計學異質性，采用固定效應模型進行分析；若P≤0.1，I2≥50%，則提示研究間存在統計學異質性，采用隨機效應模型進行分析。通過連續排除所有研究中的一篇研究，合并余下的研究結果，利用敏感型分析對研究結果的穩定型進行評價。通過繪制漏斗圖評價發表偏倚。采用Review Manager 5.3軟件進行統計檢驗。

2 結果

2.1 文獻檢索結果 初步檢索共獲得相關文獻220篇，通過查重以及閱讀標題和摘要排除199篇，進一步通過閱讀全文排除不符合納入標準的文獻11篇，最終納入10篇研究。具體文獻篩選流程見圖1。

圖1 文獻篩選的流程及結果

2.2 納入研究的一般特征 10 篇研究中3 篇［5，13-14］研究對象為歐美人群、4篇［6-7，9，15］南美人群、1篇［8］印度人群以及2 篇［10-11］中國人群。各研究樣本量為68～1 483 例，累計病人數3 088 例。7 篇研究［5，7-11，15］使用阿托伐他汀進行降脂治療，1篇研究［6］使用辛伐他汀，1篇研究［13］使用多種他汀類藥物，隨訪時間為4 周至52 周不等。基因分型技術采用PCR-RFLP、Taqman、RT-PCR-pryosequencing 以及熒光原位雜交法等。納入所有研究基因分型均符合Hardy-Weinber平衡。納入文獻的主要研究特征見表1。

采用MINORS量表對納入的研究進行文獻質量評價，結果顯示：10 篇研究得分為18～21 分，表明所納入的研究文獻質量中上等，主要存在樣本量不足、缺乏對照組、隨訪時間不充足等問題。

2.3 ABCB1 基因G2677T/A 多態性與血脂水平的關系 如圖2 所示，采用固定效應模型合并相關文獻數據，發現分別攜帶ABCB1 基因2677GG 基因型和non-GG基因型病人間血脂水平（TC、LDL-C、HDL-C及TG）差異無統計學意義，且各組結果也未發現有顯著的異質性（P＞0.1）。

進一步分析，亦未發現分別攜帶rs2032582 位點GG 基因型和G non-G 基因型病人間以及GG 基因型和Non-G non-G 基因型病人間TC、LDL-C、HDL-C 及TG 水平差異有統計學意義，具體結果見表2。

2.4 ABCB1 基因G2677T/A 多態性與他汀類藥物降脂效應的關系 如圖3 所示，根據meta 分析結果，攜帶ABCB1 基因2677GG 基因型的病人與攜帶non-GG 基因型的病人相比，他汀類藥物降脂效應（TC、LDL-C、HDL-C 及TG）差異無統計學意義。HDL-C 組和TG 組中各研究結果間無異質性（P＞0.1），而TC組和LDL-C組中各研究結果間有顯著的異質性（P＜0.001）。

此外，在分別攜帶GG基因型和G non-G基因型病人間以及GG 基因型和Non-G non-G 基因型病人間他汀類藥物降脂效應（TC、LDL-C、HDL-C 及TG）差異無統計學意義，見表3。

圖2 ABCB1基因G2677T/A多態性與血脂水平關系的Meta分析（GG基因型比non-GG基因型）

圖3 ABCB1基因G2677T/A多態性與他汀類藥物降脂效應關系的Meta分析（GG基因型比non-GG基因型）

2.5 敏感性分析和發表偏倚 敏感型分析結果顯示各個亞組中去除任何一篇研究都不會明顯改變總體的合并結果，表明這篇Meta分析的結果是穩定的。

以LDL-C GGvs.non-GG為例，利用統計軟件繪制漏斗圖進行發表偏倚的評估。從圖4 和圖5 可見，繪制的漏斗圖左右基本對稱，初步表明目前的研究資料不存在顯著的發表偏倚，納入的總體結果可靠。

3 討論

ABCB1 基因定位于7 號染色體長臂，全長超過100 kb，包含28個外顯子，其編碼P-糖蛋白，由于該蛋白可轉運多種不同結構的藥物，其中包括降脂藥［16］。已有研究發現ABCB1 基因遺傳變異可以影響他汀類藥物的藥代動力學和藥效學［16-17］。G2677T/A 位點是ABCB1 基因常見的非同義編碼SNPs，當等位基因發生突變，可改變P-糖蛋白的氨基酸序列，從而對藥物的轉運及代謝產生影響。

圖4 ABCB1基因G2677T/A多態性與血脂水平相關性的漏斗圖（GG比non-GG基因型）

表1 納入研究的文獻基本特征

表2 ABCB1基因G2677T/A多態性對血脂水平的影響

表3 ABCB1基因G2677T/A多態性對他汀類藥物降脂效應的影響

圖5 ABCB1基因G2677T/A多態性與他汀類藥物降脂效應相關性的漏斗圖（GG比non-GG基因型）

目前ABCB1基因G2677T/A多態性與血脂水平及他汀類藥物調脂效果是否有相關性仍存在爭議。Fiegenbaum 等［6］首次發現G2677A/T 基因多態性可影響辛伐他汀治療后TC和LDL-C下降程度。Taegtmeyer 等［14］發現G2677T/A-C3435T 單倍型與LDL-C水平相關。Thompson 等［13］的研究發現使用阿托伐他汀治療的病人中ABCB1 2677G＞T/A位點GG型病人LDL-C水平的降幅比TT型病人高3%，TC水平的降幅比TT型病人高2%。近期張天棟等［11］在中國人群中發現阿托伐他汀對攜帶ABCB1 2677GG型病人LDL-C的調節作用顯著高于攜帶同一位點的其他基因型病人。然而Kajinami 等［5］研究結果顯示，ABCB1 G2677A/T多態性與阿托伐他汀降脂效應無關。另外多項研究也提示ABCB1 G2677A/T多態性與他汀降脂作用無明顯相關［7］。本研究采用meta分析的方法評價G2677T/A 基因多態性與血脂水平或他汀類藥物降脂療效的關系，共納入10 項獨立研究，樣本量累計3 088例。研究結果顯示未發現發現攜帶2677GG基因型與non-GG基因型、G non-G基因型或Non-G non-G基因型人群之間的血脂水平（TC、LDL-C、HDL-C 及TG）差異有統計學意義，亦未發現這些不同組別人群之間他汀類藥物降脂效應差異有統計學意義。基于本研究的Meta 分析的結果尚不能認為ABCB1基因G2677T/A多態性與血脂水平及他汀類藥物降脂效應有關。

本研究也存在一定的局限性。由于采用嚴格的納入標準，納入的研究數較少，且部分研究樣本量小；不同研究之間研究對象的種族、基因檢測方法、他汀類藥物種類、給藥劑量及服用時間均有所不同，這些會導致各研究之間存在潛在的異質性；此外，meta 分析屬于描述性的二次分析，發表偏倚等不可避免。因此有必要進一步開展設計嚴謹、大樣本、多中心的臨床研究來評價ABCB1 G2677T/A多態性與血脂水平以及他汀降脂效應他汀類藥物降脂效應的關系，為實現他汀類藥物個體化治療提供理論依據。