浙江地區金線蓮種質資源調查與產業保護現狀

吳梅，孔向軍，凌丹燕，馬巧群，毛碧增

(1.浙江大學 生物技術研究所，浙江 杭州 310058； 2.金華市農業科學研究院 花卉苗木研究所，浙江 金華 321000;3.金華市荊龍生物科技有限公司，浙江 金華 321000)

金線蓮(Anoectochilusroxburghii)又稱金線蘭，為蘭科開唇蘭屬多年生植物，全草在民間被入藥，為珍貴中藥材，具有適應環境狹窄、自然生長緩慢、天然繁殖率低等特點，有清熱涼血、除濕解毒等功效，一般用于治療急慢性肝炎、糖尿病等癥，享有“藥王”的美稱。《瀕危野生動植物種國際貿易公約》(CITES)將其列入附錄Ⅱ的保護物種，《國家重點保護野生植物名錄》(第二批)也將其列為二級保護植物，在臺灣地區每千克售價達5 000～6 000新臺幣，被譽為比人參還貴的農作物[1-3]。

近幾年隨著金線蓮產業化發展，組培繁育主要集中在以臺灣和福建省等地，與全國其他產區相比，僅在《浙江植物志》《浙南本草新編》《福建植物志》中看到有關浙江金線蓮的藥用價值報道，浙江省市場內流通的栽培種多為省外引入種(如福建金線蓮和臺灣金線蓮)[4-5]，全省種質資源分布尚未見系統報道。

浙江省淺山產地已經難覓野生金線蓮的蹤跡，經民間尋訪考證得知，在麗水、金華、杭州、寧波等地均有發現金線蓮野生資源，由于自然環境的破環，現存資源越加稀少，一旦物種消失，將不可挽回，野生馴化家種研究迫在眉睫[6]。因此，對浙江省現有野生金線蓮資源進行調查和保護利用已經刻不容緩。

為更好地保護與開發利用浙江地域特色物種，浙江省《浙江省人民政府辦公廳關于加快推進中醫藥健康服務發展的意見》(浙政辦發〔2015〕103號)提出建立浙產特色中藥材與藥用資源的種質資源圃，大力實施中藥材生產質量管理規范，促進中藥材種植業綠色發展，加快推動中藥材優良品種選育和無公害規范種植。《浙江省中藥材保護和發展規劃(2015—2020年)》(浙政辦發〔2015〕117號)提出加快瀕危稀缺中藥材種植養殖基地建設，降低對野生中藥材資源的依賴程度，加強中藥材良種繁育基地建設，建立完善中藥材良種繁育基地，保障藥材基源安全。本文首先對藥農提供的浙江地區金線蓮的野生種質進行實地踏勘調查，開展金線蓮本草考證和生態生物學基礎研究，為服務地方經濟和保護浙江省中藥資源及其利用奠定基礎。

1 調查區域與方法

1.1 調查區域概況

浙江林地資源豐富，屬中低海拔、陰濕常綠闊葉林區，西南、西北部地區群山峻嶺，中部、東南地區以丘陵和盆地為主，東北地區地勢較低，以平原為主；受東亞季風影響，浙江冬夏盛行風向有顯著變化，降水有明顯的季節變化。由于浙江位于中、低緯度的沿海過渡地帶，加之地形起伏較大，氣候特點是：季風顯著，四季分明，年氣溫適中，光照較多，雨量豐沛，空氣濕潤，雨熱季節變化同步，氣候資源配置多樣。年平均氣溫15～18 ℃，極端最高氣溫33～43 ℃，極端最低氣溫-2.2～17.4 ℃；年平均雨量為980～2 000 mm，年平均日照時長1 710～2 100 h。

1.2 方法

通過市場收集企業組培苗、野外跟蹤調查、實地調研，全面地了解浙江省各地區的野生和栽培金線蓮資源狀況，并根據金線蓮在浙江的分布情況，選擇有代表性的地點進行調查。從2018年3月開始至2019年2月，共收集福建、浙江、廣東等地企業生產的組培無菌苗16份，溫州、金華、杭州、寧波、麗水等地野生資源12份。通過維普科技期刊數據庫、中國知網、萬方數據知識服務平臺等數據庫查閱文獻，與文獻的文字描述、插圖做比較，為浙江省金線蓮野生資源馴化栽培提供技術支撐。

檢測土壤采樣于金華安地、蘭溪、箬陽等地，喬木層主要建群物種有殼斗科、樟科、大戟科、桑科、棕櫚科等，林下灌木層和草本層植物多為耐陰植物。采樣方法為對角線采樣法，按LY/T 1237—1999《森林土壤有機質的測定及碳氮比的計算》、LY/Y1228—2015《森林土壤氮的測定》、LY/T1234—2015《森林土壤鉀的測定》、LY/T1232—2015《森林土壤磷的測定》、LY/T1239—1999《森林土壤pH的測定》等方法測定土壤有機質、氮、磷、鉀含量和pH。

2 結果與分析

2.1 金線蓮主產區種質資源生物學特性

從福建、江西、廣東、浙江等地搜集金線蓮組培無菌種苗資源16份，進行種質資源編號。接種培養5個月后，存放于金華市農業科學研究院溫室內，每份金線蓮資源隨機選取30株鮮樣，進行形態指標測定，結果如表1所示。

表1 金線蓮主產區種質資源生物學特性

2.2 人工栽培金線蓮的主要類型

市場上大部分人工栽培的金線蓮來自于野生資源，品系混雜，產量與內在品質不穩定，嚴重影響藥材的質量。經過長期不斷的人工選擇，選育出產量高、質量穩定、適應性強的優良品種是發展金線蓮產業的重要基礎[7]。目前，根據葉片形狀和莖稈顏色，將人工栽培的金線蓮分為3個主要類型，分別為尖葉金線蓮、臺灣銀線蓮、圓葉金線蓮。

尖葉金線蓮(A.roxburghii)葉片卵圓形或卵形，長1.3～3.5 cm，寬0.8～3.0 cm，上面暗紫色或黑紫色，具金紅色帶有絹絲光澤的美麗網脈，背面淡紫紅色，先端近急尖或稍鈍；莖直立，肉質，圓柱形；花苞片淡紅色，卵狀披針形或披針形；花色白或淡紅，不倒置，花瓣質地薄，近鐮刀狀，花期8(9)—11(12)月；生于海拔50～1 600 m的常綠闊葉林下或溝谷陰濕處。

臺灣銀線蓮(A.formosanus)葉片卵狀長圓形或卵形，長4～6 cm，寬2.5～3.0 cm，綠色，具白色、光澤美麗的網脈，先端漸尖，基部圓或鈍；莖圓柱形，直立，肉質；子房圓柱形，扭轉，被毛；花不甚張開，倒置；花瓣白色，花期10—11月；生于海拔500～1 600 m的陰濕森林或竹林內。

圓葉金線蓮(A.chapaensis)植株高9～15 cm，葉片卵形，背面淺紅色，長2～5 cm，寬1.5～3.5 cm，先端急尖，基部圓鈍，兩側不等寬；節上生根；莖上升或直立，圓柱形，無毛；花白色，不倒置；花瓣斜歪的半卵形，花期7—8月；生于海拔1 300 m山坡密林的陰濕地。

2.3 浙江省野生金線蓮學名考證

金線蓮是浙、閩、臺等省的民間珍稀草藥，歷代本草古籍雖未見記載，但在浙江平陽、建德、淳安、金華婺城區等地也均有民間使用習慣。目前，現有文獻中對金線蓮名稱記載較為混亂，異名繁多。收集的植物種源經分類鑒定，浙江省藥用野生金線蓮共有3種(標樣保存于金華國家農業科技園區金華市荊龍生物科技有限公司)，形態特征主要如下：

2.3.1 金線蓮

植物學名為金線蘭，葉片為卵圓或卵形，主要特征葉上面暗紫色，具有明顯金紅色帶有絹絲光澤的網脈，總狀花序。

2.3.2 浙江金線蘭

植株高8～16 cm，具匍匐狀根莖，莖肉質，淡紅褐色，被柔毛，下部集生葉2～6枚，中、上部具鱗片狀葉1～2枚。葉片稍肥厚，寬卵形至卵圓形，長0.7～2.0 cm，寬0.6～2.1 cm，先端急尖，基部圓形，邊緣微波狀，全緣，上面呈天鵝絨狀綠紫色，具絹絲狀光澤；具脈5～7條，脈紋金黃色，下面略帶淡紫紅色，兩面均無毛；葉柄長約6 mm，基部擴大抱莖。總狀花序具花1～3條，花序軸被柔毛；花苞片膜質，卵狀披針形，長約6.5 mm，寬3.5 mm，先端漸尖，外面被柔毛；花瓣白色，與花苞片近等長或稍短，被白花期8月[8]。標本采自金華箬陽，生于溪邊巖石上，海拔600～1 000 m，浙江金線蘭與金線蓮葉片相似，但花唇瓣的裂片較寬，倒斜三角形，爪部兩側具2～5枚小齒，和金線蓮相比，其花瓣非長流蘇狀，兩者較易區別。

2.3.3 無線金線蓮

無線金線蓮和金線蓮常以伴生形式生長于浙江海拔400～700 m的竹林下，據民間習慣稱葉面具明顯金黃色網脈的為金線蓮母(金線蓮)，葉面葉脈不明顯或無脈的為金線蓮公(或無線金線蓮)。胡珊梅等[9]運用RAPD技術，對同一采集地具有不同葉面特征的有線金線蓮和無線金線蓮進行了DNA指紋鑒定，結果表明，二者具有部分共同的譜帶，但又有各自的特征性譜帶，說明二者具有較大的遺傳變異。筆者將采收到的金線蓮種子進行組織培養后，發現種子苗也有無紋和有紋同時存在，對其花器解剖觀察后初步認為兩者屬同種植物。

2.4 浙江省野生金線蓮的分布

根據長期對野外金線蓮考察的記錄資料和民間走訪結果，選擇具有代表性的泰順、文成、平陽等地，于2013年10月—2017年10月進行采樣，發現野生金線蓮在浙江省林下山凹面比凸面多，山的下半部比上部多，這說明金線蓮生長需要蔭濕條件好的生態環境。植株成點狀分布，植株間距離有近有遠，獨立生長，相互之間沒有黏連，據此初步判斷金線蓮在野外以種子繁殖為主(表2)。

表2 浙江野生資源分布概況

金線蓮花期為8—11月，結果期為11月中旬至12月上旬，海拔高處比海拔低處晚開花。在12個樣地共勘查1 876 m2，共獲得384株金線蓮(無線金線蓮29株)。金線蓮居群發育較為完整，株高為3.5～11.7 cm。各樣地中金線蓮為不連續的散點狀分布，資源存量極為稀少，處于瀕危狀態，生存形勢十分嚴峻，雖然未達到極危等級，但部分居群僅有5株植株的存量。

2.5 野生金線蓮土壤生境特點

由表3可以看出，4個采樣地浙江野生金線蓮生長土壤pH為5.25～5.90，有機質含量為17.8～28.7 mg·kg-1，水解性氮含量為43～92 mg·kg-1，速效磷含量為36.0～67.4 mg·kg-1，速效鉀含量為87.0～143.2 mg·kg-1，說明金線蓮對土壤性狀要求較高，喜歡疏松、通氣、透水的腐殖土和經風化的微酸性土壤。在物種豐富的常綠闊葉林下，生長在2～3 cm的土表層。成片的金線蓮大都分布在團粒結構好，速效磷、速效鉀、水解性氮含量高的區域。生長在石巖和苔蘚上的金線蓮往往零星分布，植株矮小，生長發育不良，可能是土層肥力不足、水氣環境不良所致。

表3 野生金線蓮土壤分析

3 野生金線蓮資源瀕危原因

海拔影響植物種類的分布和蘊藏量，金線蓮主要分布海拔為200～1 200 m。低海拔常分布在山澗溪流兩側，高海拔一般為針闊葉混交林下陰濕、肥沃的環境，表明金線蓮在不同海拔的垂直分布幅度較廣，為該資源的合理利用提供了開發空間[10]。但目前浙江金華、溫州、麗水等地區金線蓮面臨著日趨嚴峻的生存問題，主要原因分析如下：(1)金線蓮種子只含有未分化完全的胚，在野外萌發所需的自然條件苛刻，自然繁殖率低；(2)金線蓮的根狀莖和氣生根易外露，天敵較多，鳥類和鼠類等動物喜食，加之生境的易碎性對其生存產生很大壓力；(3)在經濟利益驅使下，當地居民亂采濫挖，導致野生金線蓮種質遭到嚴重破壞甚至局部性的滅絕。

4 浙江金線蓮保護利用建議

通過對林下種植和大棚栽培技術的研究和推廣，建立浙江優良金線蓮品種仿野生體系，可以促進浙江金線蓮特色資源可持續利用和產業化發展，更好地為人民造福，讓人民受益。

在收集野生金線蓮資源過程中，通過眼觀、手摸等方法，發現葉片的紋路密集程度、外觀形狀特征明顯不一致(圖1)，需要進一步查閱相關文獻和應用分子生物學技術進行分類。筆者認為浙江省應加強金線蓮資源圃建設，考證其基源和品種，建立金線蓮資源圃，進行專業評價鑒定。

圖1 不同金線蓮資源的葉片特征

5 小結

結合金線蓮淺根性生長特性，種植時建議選擇保濕性好、有少量枯枝覆蓋物、腐殖土較多、通氣性和持水性相互協調的常綠闊葉林下仿野生栽種。如有機質在15 mg·kg-1以下、綜合肥力較低、團性結構性差的土壤，需要進行土壤改良。我們除利用宣傳途徑，加強金線蓮分布點的管護力度，增強分布區內居民對金線蓮種質及其生境的保護意識外，還應該盡快開展和完善金線蓮的保護措施，通過科研院校等機構引種進行遷地保護，促進浙江金線蓮瀕危機制、繁殖策略和技術的研究，開展浙江金線蓮人工仿野生林下栽培，從根本上緩解民眾對野生資源的需求，使該珍稀藥用植物得到合理的開發利用，助力浙中藥材金線蓮資源的可持續發展。