三種專用固相萃取柱-高效液相色譜法檢測食品中蘇丹紅含量

馮寅潔1,周小清1,喬勇升1,馮成玉

(1.江蘇省泰州市食品藥品檢驗(yàn)所,江蘇泰州 225300;2.江蘇省海安市農(nóng)業(yè)農(nóng)村局,江蘇海安 226600)

蘇丹紅是一類以苯基偶氮萘酚為主要基團(tuán)的偶氮化合物,主要有蘇丹紅Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ。化學(xué)名分別為1-苯基偶氮-2-萘酚、1-[(2,4-二甲基苯)偶氮]-2-萘酚、1-[4-(苯基偶氮)苯基]偶氮-2-萘酚、1-2-甲基-4-[(2-甲基苯)偶氮]苯基偶氮-2-萘酚,結(jié)構(gòu)見圖1。這類化合物不溶于水,微溶于乙醇,易溶于丙酮、苯、乙醚、正己烷、油脂等。蘇丹紅屬于人工合成的紅色染料,主要用于溶劑、油、蠟、地板、鞋等的增色和增光。

圖1 蘇丹紅Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ結(jié)構(gòu)圖Fig.1 Structure of Sudan dyes

1995年,歐盟等國家已禁止蘇丹紅作為食品用色素。但是自從2005年,多家知名跨國公司和國內(nèi)企業(yè)產(chǎn)品如辣椒醬、辣椒粉、新奧爾良烤翅、鴨蛋等食品中被檢出蘇丹紅。在多項(xiàng)體外試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)蘇丹紅進(jìn)入人體內(nèi),可代謝生成苯胺類和萘胺類物質(zhì),這些胺類物質(zhì)具有致突變性和致癌性[1]。國際癌癥研究機(jī)構(gòu)(IARC)將蘇丹紅Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ列為三類致癌物,即動(dòng)物致癌物。2005年4月,衛(wèi)生部發(fā)布《蘇丹紅危險(xiǎn)性評(píng)估報(bào)告》中指出,如果經(jīng)常攝入含較高劑量蘇丹紅的食品會(huì)增加其致癌的危險(xiǎn)性,特別是由于蘇丹紅的代謝產(chǎn)物是人類可能致癌物,目前對(duì)這些物質(zhì)尚沒有耐受攝入量,因此應(yīng)盡可能避免攝入這些物質(zhì)[2]。國家先后發(fā)布《食品中可能違法添加的非食用物質(zhì)和易濫用的食品添加劑品種名單》第一批和第五批,將蘇丹紅列為嚴(yán)禁添加的非食用物質(zhì)。針對(duì)蘇丹紅非食品中天然存在的物質(zhì),并且曾在食品中檢出的問題,蘇丹紅檢測一直是職能部門監(jiān)督抽查和風(fēng)險(xiǎn)監(jiān)測工作的重點(diǎn)。2019年國家食品安全抽檢實(shí)施細(xì)則規(guī)定,香辛料油、辣椒及其制品、花椒及其制品、含辣椒的醬腌菜及蔬菜干制品、蛋制品、原料中添加蛋的糕點(diǎn)等食品必須檢測蘇丹紅。

檢測蘇丹紅的方法主要有酶聯(lián)免疫法[3]、表面增強(qiáng)拉曼光譜法[4]、紅外光譜法[5]、薄層色譜法[6]、液相色譜法[7-8]、液質(zhì)聯(lián)用法[9]等。GB/T 19681-2005[10]前處理采用自行填充的中性氧化鋁層析柱,使用前需根據(jù)蘇丹紅的回收率調(diào)整氧化鋁活度,對(duì)檢測人員經(jīng)驗(yàn)要求較高,平行性和準(zhǔn)確度欠佳,并且耗費(fèi)大量有機(jī)溶劑。這些問題導(dǎo)致國標(biāo)方法不能適應(yīng)現(xiàn)今大批量檢測的快速、準(zhǔn)確、便捷、節(jié)省試劑等要求。為提高實(shí)驗(yàn)效率,目前多采用商業(yè)化固相萃取柱(SPE柱)對(duì)食品進(jìn)行凈化和目標(biāo)物的富集,可以在蘇丹紅檢測中起到除雜和富集目標(biāo)物作用的固相萃取柱有中性氧化鋁固相萃取柱[11]、C18固相萃取柱[12]、硅膠柱[13]、分子印跡柱[14]、SAX柱[15]等,但是經(jīng)過實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),通用型SPE柱的加標(biāo)回收率偏低,而分子印跡柱僅針對(duì)某一種蘇丹紅。本文采用幾種商業(yè)化蘇丹紅專用固相萃取柱,按照相應(yīng)的方法進(jìn)行前處理,通過高效液相色譜檢測,比較蘇丹紅加標(biāo)回收率和色譜圖,確定適用于不同種類食品中蘇丹紅檢測的方法,以期獲得操作簡單、溶劑耗費(fèi)少、回收率高,適合于日常批量檢測的蘇丹紅檢測方法。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

蘇丹紅Ⅰ(純度98.5%)、蘇丹紅Ⅱ(純度99.6%)、蘇丹紅Ⅲ(純度94.8%)、蘇丹紅Ⅳ(純度99.6%) 德國Dr. Ehrenstorfer公司;正己烷、異丙醇、甲醇、乙腈 均為色譜純,德國MERCK公司;二氯甲烷、丙酮、甲基叔丁基醚 均為分析純,國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司;Cleanert Sudan固相萃取柱(A柱,500 mg/6 mL) 天津博納艾杰爾科技有限公司;ProElut SDH固相萃取柱(B柱,500 mg/6 mL) 天津迪馬科技有限公司;CNW Poly-sery MIP-SDR 固相萃取柱(C柱,500 mg/6 mL) 上海安譜實(shí)驗(yàn)科技股份有限公司;辣椒粉、辣椒油、番茄醬、咸鴨蛋、辣條、雞蛋糕 均為市售。

DIONEX UltiMate 3000高效液相色譜儀串聯(lián)二極管陣列檢測器 美國Thermo Fisher Scientific公司;XS 204電子天平 梅特勒-托利多儀器上海有限公司;Mili-Q Reference超純水機(jī) 美國Millipore公司;VORTEX 2旋渦混勻器 德國IKA公司;JP-100結(jié)盟牌超聲波清洗機(jī) 深圳市結(jié)盟清洗設(shè)備有限公司;LD5-2B低速離心機(jī) 北京雷勃爾醫(yī)療器械有限公司;RV 10 basic旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀 德國IKA公司。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 樣品前處理

1.2.1.1 蘇丹紅提取 辣椒粉:稱取0.5 g試樣于50 mL離心管中,加入10 mL正己烷混合1 min,超聲提取5 min,5000 r/min離心5 min,將上清液轉(zhuǎn)移至50 mL旋蒸瓶中,殘留物用10 mL正己烷重復(fù)提取1次,合并上清液,在40 ℃水浴中減壓旋蒸至近干,再加入5 mL正己烷混勻,待凈化。

辣椒油:稱取0.5 g試樣與50 mL離心管中,后續(xù)處理方法同辣椒粉。

番茄醬:稱取1.0 g試樣于50 mL離心管中,加入1 mL水混合1 min,再加入10 mL正己烷混合1 min,后續(xù)處理方法同辣椒粉。

咸蛋黃、辣條、雞蛋糕:稱取1.0 g試樣于50 mL離心管中,后續(xù)處理方法同辣椒粉。

1.2.1.2 固相萃取柱凈化和富集 參考各SPE柱的操作說明。

A柱操作方法:依次加入5 mL二氯甲烷、5 mL正己烷活化SPE柱;將待凈化液上樣,用6 mL正己烷分兩次洗旋蒸瓶,一并上樣;用3 mL異丙醇-正己烷(體積比3∶97)溶液淋洗,然后將SPE柱抽干;加入10 mL二氯甲烷洗脫,收集洗脫液于25 mL旋蒸瓶;在40 ℃水浴中減壓旋蒸至干,準(zhǔn)確加入2 mL甲基叔丁基醚-甲醇(體積比4∶6)溶液溶解殘?jiān)?過0.22 μm濾膜,待液相檢測。

B柱操作方法:用5 mL正己烷活化SPE柱,將待凈化液上樣,用6 mL正己烷分兩次洗旋蒸瓶,一并上樣;依次用5 mL正己烷、5 mL乙酸乙酯-正己烷(體積比1∶99)溶液淋洗,然后將SPE柱抽干;加入10 mL乙酸乙酯-正己烷(體積比3∶7)溶液洗脫,后續(xù)處理方法同A柱操作方法。

圖2 蘇丹紅標(biāo)準(zhǔn)溶液光譜圖Fig.2 Spectrogram of Sudan dyes standard solution

C柱操作方法:依次加入5 mL二氯甲烷、5 mL正己烷活化SPE柱;將待凈化液上樣,用6 mL正己烷分兩次洗旋蒸瓶,一并上樣;用5 mL正己烷淋洗,然后將SPE柱抽干;加入10 mL二氯甲烷洗脫,后續(xù)處理方法同A柱操作方法。

1.2.1.3 固相萃取柱的比較 按照1.2.1.1提取四種蘇丹紅的加標(biāo)水平均為2.0 mg/kg的樣品,參照A、B、C柱的操作方法對(duì)提取液進(jìn)行凈化和富集,通過液相色譜檢測比較各SPE柱處理組的加標(biāo)回收率。

1.2.2 蘇丹紅標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制 標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液:按照純度折算,分別稱取蘇丹紅Ⅰ10.15 mg、蘇丹紅Ⅱ10.04 mg、蘇丹紅Ⅲ10.55 mg、蘇丹紅Ⅳ10.04 mg于50 mL燒杯中,先加入少量乙醚將蘇丹紅完全溶解,再用正己烷溶解轉(zhuǎn)移至250 mL容量瓶中,加正己烷定容,得到濃度為40 μg/mL的蘇丹紅混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液。

標(biāo)準(zhǔn)工作液:吸取混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液0.1、0.2、0.4、0.8、1.6 mL于5只25 mL容量瓶中,用甲基叔丁基醚-甲醇(體積比4∶6)溶液定容,配制成濃度分別為0.16、0.32、0.64、1.28、2.56 μg/mL蘇丹紅Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ混合標(biāo)準(zhǔn)工作液。

1.2.3 液相色譜條件 Symmetry C18色譜柱(150 mm×4.6 mm,5 μm);Hypersil GOLD AQ保護(hù)柱(10 mm×4 mm,5 μm)。流動(dòng)相:溶劑A為乙腈,溶劑B為水。梯度洗脫:0～12 min,85% A～100% A,15% B～0% B;12～18 min,100% A;18～19 min,100% A～85% A,0% B～15% B;19～22 min,85% A,15% B。流速:1.0 mL/min。進(jìn)樣體積:20 μL。柱溫:30 ℃。二極管陣列檢測器掃描波長:190～800 nm;蘇丹紅Ⅰ檢測波長:478 nm;蘇丹紅Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ檢測波長:520 nm。

1.3 數(shù)據(jù)處理

每個(gè)處理6次平行。借助Thermo Scientific Dionex Chromeleon 7色譜數(shù)據(jù)系統(tǒng)對(duì)樣品色譜圖進(jìn)行定性和定量分析,相同處理組數(shù)據(jù)通過Excel軟件計(jì)算平均值和相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差。

2 結(jié)果與分析

2.1 檢測波長的選擇

二極管陣列檢測器采集蘇丹紅Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ混合標(biāo)準(zhǔn)工作液在190～800 nm光譜圖如圖2。蘇丹紅在400～800 nm 可見光區(qū)均有吸收,最大可見光吸收波長分別為477.39、491.12、503.91、512.81 nm,蘇丹紅Ⅰ與蘇丹紅Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ的最大可見光吸收波長相差較大。有文獻(xiàn)采取同一檢測波長檢測蘇丹紅Ⅰ～Ⅳ[16],也有采取蘇丹紅Ⅰ與蘇丹紅Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ不同的檢測波長[17]。考慮到工作中需優(yōu)先采用國家標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行檢測,以及與其他檢測機(jī)構(gòu)出具的報(bào)告數(shù)據(jù)具有可比性,本實(shí)驗(yàn)采用與GB/T 19681-2005一致的檢測波長,蘇丹紅Ⅰ檢測波長為478 nm,蘇丹紅Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ檢測波長為520 nm。

2.2 色譜條件的選擇

實(shí)驗(yàn)選用C18柱對(duì)樣品進(jìn)行分離。GB/T 19681-2005采用0.1%甲酸的水溶液∶乙腈(體積比85∶15)為溶劑A,0.1%甲酸的乙腈溶液∶丙酮(體積比80∶20)為溶劑B,通過梯度洗脫對(duì)四種蘇丹紅進(jìn)行分離,單次進(jìn)樣時(shí)間為40 min。采用國標(biāo)方法,每次檢測前需根據(jù)進(jìn)樣數(shù)計(jì)算流動(dòng)相用量,流動(dòng)相不夠時(shí)需再次配制,耗費(fèi)一定時(shí)間。同時(shí),混合有酸、水和有機(jī)溶劑的流動(dòng)相具有不穩(wěn)定性,再加上梯度洗脫,容易導(dǎo)致蘇丹紅保留時(shí)間的重現(xiàn)性不理想。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),采取常用的流動(dòng)相乙腈和水分別作為溶劑A和溶劑B,不需要進(jìn)行流動(dòng)相的配制,再通過梯度洗脫,也可以實(shí)現(xiàn)四種蘇丹紅的完全分離,并且進(jìn)樣時(shí)間縮短至22 min。2.56 μg/mL蘇丹紅混合標(biāo)準(zhǔn)溶液的色譜圖如圖3所示。按照摸索后確定的梯度洗脫條件運(yùn)行,蘇丹紅保留時(shí)間的重現(xiàn)性較好。

表1 蘇丹紅的線性回歸方程、線性范圍和相關(guān)系數(shù)Table 1 Linear regression equations,linear ranges and correlation coefficients

圖3 蘇丹紅混合標(biāo)準(zhǔn)溶液色譜圖Fig.3 Chromatogram of sudan dyes mixed standard solution注:1:蘇丹紅Ⅰ;2:蘇丹紅Ⅱ;3:蘇丹紅Ⅲ;4:蘇丹紅Ⅳ。

2.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線、線性范圍及檢出限

將配制的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液0.16～2.56 μg/mL按濃度由低到高依次進(jìn)樣。以峰面積Y(mAu·min)對(duì)相應(yīng)的濃度X(μg/mL)進(jìn)行線性回歸,得到方程見表1。對(duì)空白樣品加標(biāo),按照1.2.1.1和1.2.1.2 B柱操作方法進(jìn)行處理,得到不同食品基質(zhì)的蘇丹紅Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ檢出限(S/N=3),如表2所示。方法檢出限與食品種類、稱樣量、試劑、SPE柱、最終樣液定容體積、儀器噪聲等有關(guān)。辣椒粉、辣椒油的稱樣量為0.5 g,其余樣品的稱樣量為1 g,而辣椒油空白樣品的噪音值比辣椒粉略大,因此在6種食品中,辣椒油中蘇丹紅的檢出限最高,其次是辣椒粉;稱樣量均為1 g的食品中,咸蛋黃空白樣品的噪音值比其他空白樣品略大,檢出限低于辣椒粉,其余三種樣品的稱樣量和噪音值相同,檢出限也相同。

表2 蘇丹紅的檢出限Table 2 Detection limits of Sudan dyes

2.4 溶液提取次數(shù)的選擇

前處理過程中使用的提取溶劑有正己烷[18-20]、丙酮[21]、乙腈[12]、乙酸乙酯[22]等,采用正己烷提取,可以較好地將這種油溶性染料從食品中溶解出來;同時(shí)在本實(shí)驗(yàn)中,正己烷是SPE柱的活化試劑,因此以正己烷為提取液,有利于加快在SPE柱的上樣速率。在咸蛋黃中加標(biāo)2.0 mg/kg,分別用正己烷(10 mL×2次)和正己烷(10 mL×3次)提取,通過B柱凈化后檢測,四種蘇丹紅的加標(biāo)回收率為85.2%～97.9%和84.3%～95.9%。在番茄醬中加標(biāo)2.0 mg/kg,分別用正己烷(20 mL×2次)和正己烷(20 mL×3次)提取,B柱凈化后檢測,四種蘇丹紅的加標(biāo)回收率為85.6%～98.3%和85.8%～92.1%。正己烷提取2次和3次的回收率差別不大,因此選擇提取2次。

2.5 固相萃取柱的比較

在番茄醬、咸蛋黃中加標(biāo)2.0 mg/kg,按照1.2.1.1提取后,分別借助SPE柱A、B、C進(jìn)行凈化和富集,每個(gè)處理6次平行,通過液相檢測比較不同SPE柱處理組的加標(biāo)回收率,結(jié)果見圖4。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),A柱處理咸鴨蛋加標(biāo)樣品,蘇丹紅Ⅱ回收率為73.1%～83.8%,相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)為5.0%;A柱處理番茄醬加標(biāo)樣品,蘇丹紅Ⅱ回收率為71.9%～88.4%,RSD為7.6%。在實(shí)際操作中,對(duì)于深色樣品如番茄醬,需要多次添加正己烷洗下旋蒸瓶內(nèi)的殘?jiān)笊蠘?直至旋蒸瓶內(nèi)溶液無色;對(duì)于含油高的樣品如咸蛋黃,上樣后需要增加淋洗溶液異丙醇-正己烷以去除填料中的油脂,否則洗脫液中將含有較多油脂。A柱處理加標(biāo)樣品,上樣溶液和淋洗溶液的增多會(huì)導(dǎo)致被SPE柱吸附的蘇丹紅Ⅰ、Ⅱ逐漸被洗下,尤其是蘇丹紅Ⅱ損失明顯,導(dǎo)致回收率偏低。B、C柱處理加標(biāo)樣品,不會(huì)因上樣溶液和淋洗溶液增加導(dǎo)致蘇丹紅有明顯損失,填料吸附目標(biāo)物的能力穩(wěn)定,加標(biāo)回收率理想。B柱處理番茄醬和咸蛋黃加標(biāo)樣品,四種蘇丹紅的平均加標(biāo)回收率分別為85.2%～91.1%和83.7%～89.1%,RSD分別為4.8%～6.2%和2.4%～5.5%。C柱處理兩種加標(biāo)樣品,蘇丹紅的平均加標(biāo)回收率分別為85.5%～91.7%和85.8%～91.3%,RSD分別為3.8%～5.6%和3.2%～5.1%。

表3 B柱處理加標(biāo)樣品的回收率Table 3 Recoveries of spiked samples treated by SPE cartridge B

表4 C柱處理加標(biāo)樣品的回收率Table 4 Recoveries of spiked samples treated by SPE cartridge C

圖4 不同固相萃取柱處理番茄醬(a)和咸蛋黃(b)加標(biāo)樣品的回收率Fig.4 Recoveries of spiked ketchup(a) and salt yolk(b)treated by different SPE cartridges

2.6 樣品檢測

對(duì)辣椒油、辣椒粉、番茄醬、咸蛋黃、辣條和雞蛋糕6種食品分別加標(biāo)2.0 mg/kg,按照1.2.1.1對(duì)空白樣品和加標(biāo)樣品進(jìn)行提取,采用能穩(wěn)定吸附蘇丹紅的SPE柱B和C進(jìn)行凈化和富集,每個(gè)處理平行測定6次。通過液相檢測,6種空白樣品均未檢出蘇丹紅。表3中,B柱處理加標(biāo)樣品,蘇丹紅的平均加標(biāo)回收率83.7%～91.1%,相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為2.4%～6.2%。表4中,C柱處理加標(biāo)樣品,除辣椒粉以外,平均加標(biāo)回收率84.3%～91.7%,辣椒粉加標(biāo)樣品中蘇丹紅Ⅰ、Ⅱ的平均加標(biāo)回收率偏低,分別為79.7%和76.6%。比較圖5和圖6,辣椒粉基質(zhì)中存在干擾物質(zhì),經(jīng)B柱處理后可消除雜峰,C柱處理后不能消除干擾。圖6辣椒粉加標(biāo)樣品譜圖中,雜峰影響了蘇丹紅Ⅱ、Ⅲ的出峰,需要重新調(diào)整色譜條件。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),對(duì)SPE柱洗脫后,B柱上仍然吸附了部分有色物質(zhì),而C柱上的有色物質(zhì)則完全被洗脫出來,干擾物與目標(biāo)物均在洗脫液中,因此C柱對(duì)于辣椒粉的凈化能力不及B柱。

圖5 B柱處理辣椒粉空白樣品(a)和辣椒粉加標(biāo)樣品(b)的色譜圖Fig.5 Chromatograms of blank paprika(a) and spiked paprika(b)treated by SPE cartridge B注:2:蘇丹紅Ⅱ;3:蘇丹紅Ⅲ。

圖6 C柱處理辣椒粉空白樣品(a)和辣椒粉加標(biāo)樣品(b)的色譜圖Fig.6 Chromatograms of blank paprika(a) and spiked paprika(b)treated by SPE cartridge C注:2:蘇丹紅Ⅱ;3:蘇丹紅Ⅲ。

3 討論與結(jié)論

實(shí)驗(yàn)中所選的三種SPE柱均為商業(yè)化蘇丹紅專用固相萃取柱,與GB/T 19681-2005相比,省去了調(diào)整活度的步驟,整個(gè)前處理過程所需試劑大大減少,富集目標(biāo)物也更有針對(duì)性。不同SPE柱處理番茄醬加標(biāo)樣品、咸蛋黃加標(biāo)樣品,四種蘇丹紅加標(biāo)回收率RSD均小于10%,回收率穩(wěn)定。

Cleanert Sudan SPE柱(A柱)為單層填料,使用時(shí)需控制上樣溶液和淋洗溶液的量。當(dāng)上樣液超過10 mL、淋洗液異丙醇—正己烷超過3 mL,蘇丹紅Ⅱ會(huì)隨著溶液的流出被洗下,同時(shí)蘇丹紅Ⅰ也有一定程度的損失。對(duì)于深色樣品如辣椒粉和辣椒醬,需要正己烷多次溶解旋蒸瓶內(nèi)有色物質(zhì),上樣量增加;對(duì)于高油脂物質(zhì),少量的淋洗液不足以洗出填料中的油脂,否則在洗脫時(shí)油脂將和蘇丹紅一起被洗下,未達(dá)到凈化效果。因此Cleanert Sudan SPE柱適用于淺色、低油脂食品的前處理。ProElut SDH SPE柱(B柱)填料為多種吸附劑按一定比例分兩層填裝而成,上樣時(shí)可以同時(shí)吸附蘇丹紅、有色物質(zhì)、油脂等,對(duì)于深色和高油脂物質(zhì),隨著上樣溶液或淋洗溶液的不斷增加,填料吸附蘇丹紅能力穩(wěn)定,不會(huì)產(chǎn)生明顯損失,洗脫時(shí)目標(biāo)物被洗下,而其他有色物質(zhì)仍被吸附,減少了進(jìn)樣過程中雜質(zhì)的干擾。ProElut SDH SPE柱普遍適用于不同種類食品的前處理。CNW Poly-sery MIP-SDR SPE柱(C柱)為單層填料,在上樣和淋洗階段,蘇丹紅能夠較好地保留在SPE柱上,不受上樣溶液和淋洗液體積增大的影響,但是在洗脫階段,有色干擾物質(zhì)也會(huì)隨蘇丹紅一同被洗脫,因此適用于除辣椒粉以外的大部分食品的前處理。

盡管借助SPE柱的凈化,樣品溶液中雜質(zhì)大大減少,但是食品基質(zhì)復(fù)雜,每次進(jìn)樣后仍不可避免的有強(qiáng)保留物質(zhì)吸附在色譜柱中,因此需要在色譜柱前加保護(hù)柱以減少對(duì)色譜柱的污染。在檢測辣椒粉、辣椒油等顏色特別深和高油脂的樣品后,容易造成保護(hù)柱或色譜柱的污染和基線的漂移,進(jìn)而出現(xiàn)后續(xù)進(jìn)樣的基線波動(dòng)大、峰型變寬、有雜峰等問題,因此在檢測深色和高油脂樣品后,應(yīng)及時(shí)按照乙腈-異丙醇-乙腈的順序沖洗色譜柱,根據(jù)不同色譜柱的維護(hù)指南,對(duì)于可以反沖的色譜柱采取反向沖洗,將縮短清洗時(shí)間和提高清除效果。