燈盞花素雜質化學成分研究

黃春球 郭昕 武正才

【摘 要】 目的：研究燈盞花中提取分離所得的燈盞花素原料藥的化學成分。方法：采用大孔吸附樹脂和Sephadex LH-20 等色譜方法進行分離純化，應用波譜學方法鑒定化合物的結構。結果：分離得到4個化合物。分別鑒定為4'-羥基黃芩素（1），4'-羥基黃芩素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（2），芹菜素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖醛酸苷（3），6-羥基山奈酚-7-O-β-D-吡喃葡萄糖醛酸苷（4）。結論：4個化合物首次從燈盞花素原料藥中分得。

【關鍵詞】 燈盞花素;化學成分;黃酮

【中圖分類號】R284.1 【文獻標志碼】 A 【文章編號】1007-8517（2020）3-0033-03

Abstract：Objective To study the chemical constituents of breviscapine extracted from Erigeron breviscapus.Methods The chemical constituents were isolated by column chromatography with macroporous adsorption resin and Sephadex LH-20. Their structures were identified on the basis of spectroscopic analysis.Results Four ompounds were isolated and identified as 4'-hydroxyscutellarin（1），plantagin（2），apigenin-7-O-β-D-glucuronide（3），6-hydroxykaempferol-7-O-β-D-glucuronopyranoside（4）.Conclusion Four ompounds were isolated from breviscapine for the first time.

Keywords：Breviscapine;Chemical Components;Flavonoids

燈盞花素為菊科植物短葶飛蓬（Erigeron breviscapus （Vant.） Hand. Mazz.）中提取分離得到的原料藥，其是一個混合物，由野黃芩苷（燈盞花乙素）與其他成分組成，2015版《中國藥典》一部燈盞花素標準中，規定含野黃芩苷不得低于90.0%（供口服用）或98.0%（供注射用）[1]，除對野黃芩苷（燈盞花乙素）有含量規定外，對其它成分沒有相關限度檢測。燈盞花素對心腦血管以及肝、腎、肺損傷具有保護作用。大量研究表明[2]，其保護缺血再灌注腦組織的可能機制為保護神經元與防治細胞毒性、調節血管內皮功能、緩解腦血管痙攣、改善微循環，降低血脂、調節免疫及減輕炎性反應、抗自由基損傷、抑制血小板凝集等作用。

目前，以燈盞花素為原料制成的制劑有片劑、注射劑和注射粉針劑等，臨床應用較廣。為了使燈盞花素原料藥的物質基礎和雜質成分更加清楚，對燈盞花素中野黃芩苷（燈盞花乙素）之外的成分進行分離，使燈盞花素為原料藥制成的制劑產品物質基礎更加清楚，為產品質量標準進一步提升及提高產品安全性打下基礎。本實驗從燈盞花素中進行分離，最終分離得到4個化合物，經光譜鑒定為4'-羥基黃芩素，芹菜素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖醛酸苷，4'-羥基黃芩素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷，6-羥基山奈酚-7-O-β-D-吡喃葡萄糖醛酸苷。

1 儀器與材料

NMR測試使用Bruker DRX-500和AV-400核磁共振波譜儀;Bruker HCT Esquire 3000離子阱質譜儀;大孔吸附樹脂HPD-100（滄州寶恩吸附材料科技有限公司）和凝膠Sephadex LH-20，旋轉蒸發儀為Buchi R210（Buchi公司）;樣品檢測使用GF254 TLC板（青島海洋化工）和Waters 600高效液相色譜儀;甲醇、乙醇等均為工業純試劑，燈盞花素由云南植物藥業有限公司原料車間提供。

2 提取分離

取燈盞花素1kg，用3倍量的水，加磷酸氫二鈉溶液至完全溶解，濾過，濾液過大孔吸附樹脂，依次用水，10%、20%、30%、40%和60%乙醇梯度洗脫，經液相檢測合并得到10%～30%乙醇洗脫段、40%乙醇洗脫段、60%乙醇洗脫段組分，分別合并濃縮至小體積，大孔吸附樹脂60%乙醇洗脫段濃縮液經反復凝膠柱層析分離，依次用水、甲醇∶[KG-*3/5]水為10∶[KG-*3/5]90、20∶[KG-*3/5]80、30∶[KG-*3/5]70，40∶[KG-*3/5]60的洗脫劑梯度洗脫，40∶[KG-*3/5]60洗脫段經液相檢測合并相同組分，濃縮至小體積，用磷酸調pH=2，過濾，干燥，得到4'-羥基黃芩素（85mg）;大孔吸附樹脂40%乙醇洗脫段濃縮液經反復凝膠柱層析分離，依次用水、甲醇∶[KG-*3/5]水為10∶[KG-*3/5]90、20∶[KG-*3/5]80、30∶[KG-*3/5]70、40∶[KG-*3/5]60的洗脫劑梯度洗脫，30∶[KG-*3/5]70洗脫段經液相檢測合并相同組分，濃縮至小體積，用磷酸調pH=2，過濾，干燥，得到芹菜素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖醛酸苷（124mg）;大孔吸附樹脂10%～30%乙醇洗脫段濃縮液經反復凝膠柱層析分離，依次用水、甲醇：水為10∶[KG-*3/5]90、20∶[KG-*3/5]80、30∶[KG-*3/5]70、40∶[KG-*3/5]60的洗脫劑梯度洗脫，20∶[KG-*3/5]80洗脫段經液相檢測合并相同組分，濃縮至小體積，用磷酸調pH=2，過濾，干燥，得到4'-羥基黃芩素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（37mg）;10∶[KG-*3/5]90洗脫段經液相檢測合并相同組分，濃縮至小體積，用磷酸調pH=2，過濾，干燥，得到6-羥基山奈酚-7-O-β-D-吡喃葡萄糖醛酸苷（47mg）。

3 結構鑒定

化合物1 黃色粉末，溶于甲醇;ESI--MS：m/z 285[M-H] -;詳細的NMR數據歸屬見表1，通過與文獻數據仔細比對，最終確定該化合物為4'-羥基黃芩素，即4'-hydroxyscutellarin[3]。

化合物2 黃色粉末，微溶于甲醇;ESI+-MS：m/z 471[M+Na]+;詳細的NMR數據歸屬見表1，通過與文獻數據仔細比對，最終確定該化合物為4'-羥基黃芩素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷，即plantagin[4-5]。

化合物3 淡黃色粉末，溶于甲醇;ESI--MS：m/z 445[M-H] -;詳細的NMR數據歸屬見表1，通過與文獻數據仔細比對，最終確定該化合物為芹菜素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖醛酸苷（燈盞甲素），即apigenin-7-O-β-D-glucuronide[5-6]。

化合物4 黃色粉末，微溶于甲醇;ESI--MS：m/z 477 [M-H] -;詳細的NMR數據歸屬見表1，通過與文獻數據仔細對比，最終確定該化合物為6-羥基山奈酚-7-O-β-D-吡喃葡萄糖醛酸苷，即6-hydroxykaempferol-7-O-β-D-glucuronopyranoside [7]。

參考文獻

[1]國家藥典委員會.中國藥典（一部）[M].北京：中國醫藥科技出版社，2015：402-404.

[2]楊麗梅，顧軍，林明建，等. 燈盞花素的研究進展[J].天津藥學，2010，22：56.

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[4]張人偉，張元玲，王杰生，等.燈盞花的化學成分研究[J].中草藥， 1988（19）：199-201.

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