新冠肺炎疫情發生以來,關于核酸檢測假陰性率過高的話題,一直是各方關注的焦點。有報道稱,以熒光定量RT-PCR作為檢測手段的新冠病毒檢測的陽性率目前僅有30%~50%,導致奇高的假陰性率。
導致假陰性率發生的原因很多。2月22日,南京大學模式動物研究所發育生物學與遺傳學教授趙慶順接受記者獨家采訪時指出,依據有關機構發布的指南,核酸檢測前需將采集到的樣品進行56℃滅活,這極有可能使新冠病毒核酸被降解,從而導致不能被正常檢出,最終提高了假陰性率。該研究成果《病毒核酸提取前的高溫滅活過程顯著降低可檢出病毒核酸模板量》,已在中國科學院科技論文平臺預發布。
趙慶順在網絡上看到一個教學視頻。該視頻由北京協和醫院和北京市衛健委聯合制作。視頻顯示:在制備核酸模板前,需將采集到的樣品在56℃條件下進行30分鐘病毒滅活,然后才制備核酸模板。
記者通過采訪確認,絕大多數檢驗醫師均按照上述規范,進行56℃條件下時間不等的病毒滅活,然后才制備核酸模板。
這樣做帶來的問題是,病毒RNA極易被核糖核酸酶降解,因為這種酶在60℃時活性最高。
“進行滅活處理是出于生物安全的考慮,保護從事檢測的工作人員不被病毒感染。”趙慶順說。正是出于這方面的考慮,國家衛健委發布的相關文件中,明確要求對標本進行滅活處理。
但是,記者查詢了國家衛健委相關文件,其對于病毒滅活的具體方法并未做出明確規定,只是籠統地要求:感染性材料或活病毒在采用可靠的方法滅活后進行核酸檢測。
“假陰性意味著漏檢,不僅會導致臨床中對疑似患者不能快速確診,而且會使漏檢者成為潛在的病毒傳染源。”趙慶順為此提出建議,一是盡量使用無核糖核酸酶污染的樣本采集管,二是將標本放置在可保護病毒核酸免受高溫滅活損壞的樣品保存液中,從而確保樣品RNA從保存、運輸到高溫滅活等得到全程保護,盡最大可能保證用于臨床檢測的核酸質量,減少病毒核酸可檢出模板在核酸提取前的人為損壞。