哮喘及COPD患者血清觸珠蛋白、血紅素結合蛋白的表達及相關性

楊旭 宋磊 張海燕 李丹

(吉林大學白求恩第一醫院呼吸內科，吉林 長春 130021)

支氣管哮喘(哮喘)和慢性阻塞性肺疾病(COPD)均為常見的呼吸系統疾病，臨床表現以喘息、咳嗽、呼吸困難為主。哮喘是多種細胞及細胞組分參與的氣道慢性炎癥，常伴有氣道高反應性，且氣流受限多為可逆性。CODP與吸入有害氣體及有害顆粒的異常炎癥反應有關，其特征是持續性、進行性發展的氣流受限。復雜的發病機制及相似的臨床表現導致二者的鑒別十分困難。作為急性期反應蛋白血清觸珠蛋白(Hp)、血紅素結合蛋白(Hpx)含量在感染應激時顯著升高〔1〕，研究表明Hp、Hpx可能參與機體的炎癥反應，其血清含量在哮喘及COPD患者中均有不同程度的改變〔2〕。本研究通過檢測血清Hp、Hpx濃度，探索其對哮喘和COPD的診斷價值及與臨床指標的相關性。

1 對象與方法

1.1研究對象 選取吉林大學白求恩第一醫院呼吸內科住院哮喘患者47例(哮喘組)及COPD患者52例(COPD組)。哮喘組及COPD組均符合中華醫學會制定的哮喘及COPD診斷標準〔3，4〕。健康對照組選取門診體檢健康志愿者45例；受試者均排除嚴重心、肝、腎疾病，自身免疫性疾病，精神疾病等引起氣流受限的疾病。3組一般資料差異無統計學意義(P>0.05)。見表1。

表1 3組一般資料比較

1.2Hp、Hpx測定方法 抽取所有研究對象空腹肘靜脈血5 ml，室溫下靜置15～30 min至血液凝固，3 000 r/min離心15 min，收集上清液保存于-80℃冰箱。測定時將樣品放于冰上解凍，檢驗步驟嚴格按照試劑盒說明操作。主要試劑和儀器有Hp、Hpx酶聯免疫吸附試驗(ELISA)試劑盒(Abcam 英國)、多功能酶標儀 SynergH1 Hybrid Reader(Bio-Tek公司美國)、BNⅡ全自動蛋白分析儀(Sismens Healthcare 德國)。

1.3統計學方法 采用SPSS21.0軟件進行獨立樣本t檢驗、Logistic回歸分析，根據受試者工作特征(ROC)曲線評價Hp、Hpx對哮喘及COPD的診斷意義。

2 結 果

2.1各組血清Hp、Hpx表達水平比較 血清Hp、Hpx含量哮喘組顯著高于COPD組及健康對照組(P<0.001)，COPD組顯著高于健康對照組(P<0.05)。見表2。

表2 3組Hp、Hpx表達水平比較

與健康對照組比較：1)P<0.05;與COPD組比較：2)P<0.05

2.2單項生物標志物檢測對疾病診斷意義 血清Hp、Hpx單項及聯合檢測的特異性、靈敏度及ROC曲線下面積(AUC)及臨界值見表3。(1)Hp：在診斷哮喘時比Hpx表現出更高的靈敏度；在診斷COPD時表現出更好的診斷價值；但在鑒別CODP與哮喘時沒有表現出最佳的診斷意義、特異性和靈敏度。(2) Hpx：在診斷哮喘時比Hp更具有診斷價值及特異性；在診斷COPD時，其特異性與Hp相似；在鑒別COPD與哮喘方面，Hpx的診斷意義、特異性及靈敏度均較Hp高。

表3 各組間單項及組合標志物診斷價值

2.3多項生物標志物檢測對疾病診斷意義 血清Hp、Hpx聯合檢測的特異性、靈敏度及AUC見表3，表中兩種標志物聯合檢測其診斷意義均優于單項標志物。(1)哮喘組與健康對照組：Hp、Hpx聯合檢測在哮喘與健康對照組鑒別時較單項標志物具有最大的AUC、更高的靈敏度及特異性。(2) COPD組與健康對照組：Hp、Hpx聯合檢測在COPD與健康對照組鑒別時更具診斷意義及靈敏度，但沒有表現出突出的特異性。(3) 哮喘組與COPD組：Hp、Hpx聯合檢測在哮喘組與COPD組表現出最佳的診斷價值及更高的特異性。

3 討 論

生物標志物被定義為細胞內的生物化學組分、結構或功能，能夠客觀測量和評估的指標。因其具有較高的敏感性、較強的特異性和較好的穩定性被廣泛研究。通過對生物標志物的檢測，能夠判斷疾病的病理生理過程、發生發展、治療及預后等〔5〕。本研究通過檢測血清Hp和Hpx在各研究組中的濃度含量不同，探討其對哮喘及COPD的診斷價值。

Hp又稱結合珠蛋白，其主要作用是與游離血紅蛋白(Hb)結合形成 Hp-Hb復合物，Hb通過釋放游離鐵和亞鐵血紅素參與氧化反應導致機體損傷。研究表明在肺損傷中幾乎都存在紅細胞外滲到肺組織引起氧化損傷，Hp與Hb結合能夠減少這一損傷〔6，7〕。Hp作為一種急性期蛋白，在感染、炎癥、應激時，血清濃度及合成水平明顯升高，表明其具有重要的生理作用〔8〕。葉青等〔9〕研究發現COPD患者合并肺部感染時Hp含量較正常個體升高，差異具有統計學意義，說明其作為生物標志物對疾病的診斷有著良好的檢測意義。本研究結果說明Hp在哮喘及COPD尤其是COPD診斷時具有可參考的診斷價值。

Hpx是由肝臟合成的急性期反應蛋白，其主要生理功能是清除有害的游離血紅素，證據表明游離血紅素與溶血性疾病、敗血癥、肺部炎癥等疾病有關，Hpx與其結合后能夠減少游離血紅素對機體造成的氧化損傷〔10〕。Verrills等〔11〕研究發現慢性鈹塵病導致的肺部炎癥患者肺泡灌洗液中Hpx水平升高。本研究結果提示Hpx是本研究標志物中診斷價值最高的。

研究表明多種生物標志物的聯合檢驗比單一標志物具有更好的臨床價值〔11〕。對Hp及Hpx聯合檢測診斷哮喘及COPD的價值進行研究發現，兩種聯合檢驗比單項標志物的特異性和靈敏度更高，且其AUC也是最大，這說明兩種標志物聯合檢測最具有診斷價值。

本研究從生物標志物檢測及聯合檢測的角度，對哮喘和COPD的診斷及兩者的鑒別進行了有益的探討，由于收集的樣本量較少，所獲得的結果有一定局限性，有待于進一步實驗證實；Hp、Hpx為何在哮喘及COPD表達不同、穩定期表達水平是否與急性期一致均有待于深入的研究探討，得到的結果有望應用于哮喘或COPD的治療的幫助。